Институт молекулярной биологии и генетики НАН Украины 252143, Киев, ул. Академика Заболотного, 150 При системных аутоиммунных заболеваниях выявляются аутоантитела против многих белков и рибонуклеопротеидов-компонентов аппарата трансляции. Ранее нами было сообщено о выявлении аутоантител против серил-тРНК синтетазы у больных системной красной волчанкой и ревматоидным артритом. В данной работе нами охарактеризованы аутоантитела против другого компонента аппарата трансляции-тирозил-тРНК синтетазы. В то время как поликлональные антитела ингибировали аминоацилирующую активность фермента до 30% базового уровня, аутоантитела из аутоиммунных сывороток активировали фермент до 280 % базового уровня, чего не наблюдалось для других исследованных в этом направлении аминоацил-тРНК синтетаз. Обсуждаются возможные причины подобного феномена.
The autoantibodies directed against actin and myosine have been detected in the blood sera of patients with dilated cardiomyopathy (DCMP) at the level that was sufficiently higher than in healthy donors. While comparing of the immunogeneicity of these pro teins we have stated that myosine from affected by DCMP myocardium have been more immunogenic then from normal one. In the case of actin the immunogeneicity have been higher for the protein from normal myocard. The investigations of actin by limited proteolysis may suggest that the differencies in immune properties are not connected with primary structure but with structures of higher levels.
Animal and fungal cells (in contrast to prokaryotes) contain two distinct sets of related aminoacyl-tRNA synthetases (aaRSs) encoded by nuclear genes and functioning in cytosol and mitochondria. The structural differences between mitochondrial and cytoplasmic enzymes may reflect the functional adaptation to fulfil mitochondrial processes in addition to protein synthesis. Mitochondrial import of nuclear-encoded tRNAs has been described in yeast, plants and protozoans but it has not been observed in mammalian cells. Its established that mitochondrial lysyl-tRNA synthetase (MSK) plays a prominent role in the transport of tRNA into yeast mitochondria for complementation of mitochondrial tRNAs genes mutations. We tried to identify MSK homologues in mammalian cells with the help of monospecific antibodies against pre-MSK by ELISA and Western-blot analysis. We have identified cross-reactive proteins in mitochondrial and cytoplasmic fractions of mammalian cell lysates. These data, together with the results of crossaminoacylation on mitochondrial and cytoplasmic tRNAs, suggest the presence of common antigenic determinants in the mitochondrial and cytoplasmic lysyl-tRNA synthetases from higher animals. ©L. h.
In this study two cDNA expressing libraries generated from thyroid papillar carcinomas were screened using SEREX approach. Thirty positive cDNA clones representing seventeen different genes were identified from both libraries. It is important to note, that three of them were isolated previously by other laboratories in SEREX screens of various types of human cancer. These include transcription factor NZF, a-catenin and ВАС RPU-a protein with unknown function. Moreover, we identified a whole panel of novel potential tumor-associated antigens, which would be further investigated. We are particularly interested in more detailed analysis of cathepsin H and transducer of ErbB2 (TOB2), which are differentially expressed in various types of human cancer. We will analyse the frequency of autoantibodies against identified antigens in sera of patients with various malignancies and healthy donors by heterologous screening. It is expected that among the clones isolated in this study, there might be novel cancer-associated markers.
Для пошуку нових пухлинних антигенів раку щитовидної залози людини використано метод SEREX. Ідентифіковано 16 різних антигенів шляхом скринування аутологічними сироватками двох експресуючих кДНК бібліотек, виділених з тканин папілярних карцином раку щитовидної залози. Здійснено алогенний скринінг одержаних антигенів сироватками здорових донорів, а також пацієнтів, хворих на рак щитовидної і молочної залоз та товстого кишечника. Вісім антигенів прореагували виключно з аутологічними сироватками, два (KY-Thy-25 та KY-Thy-40)-лише з сироватками пацієнтів, хворих на рак щитовидної і молочної залоз (10 та 2,4 % відповідно), а решта антигенів прореагувала як із сироватками здорових донорів, так и хворих на рак. KY-Thy-17 (білок, який містить мотив «цинковий палець» типу С2Н2), KY-Thy-28 (переносник ERBB2) та KY-Thy-29 (білок, асоційований з солідними пухлинами) виявили високу імунореактивність із сироватками пацієнтів, хворих на рак щитовидної та молочної залоз і раком товстого кишечника, у порівнянні з сироватками здорових донорів. Згадані антигени можуть бути перспективними для розробки на їхній основі нових діагностичних та імунотерапевтичних підходів при ракових захворюваннях. Вступ. Рання діагностика та імунотерапія пухлин базується на пошуку пухлинних антигенів, здатних викликати гуморальну та клітинну імунну від повідь у онкологічних хворих. Пухлиноасоційовані антигени, идентифіковані на сьогодні, можна роз поділити на п'ять групп: 1) ембріоспецифічні анти гени (CT-cancer-testis), які експресуються у різних типах пухлин і відсутні в нормальних тканинах, за винятком сім'яників; 2) антигени диференціації меланоцитів, що експресуються в меланомах і нор мальних меланоцитах; 3) антигени, які виникли © Р.
ВЫДЕЛЕНИЕ ОСНОВНЫХ ТКАНЕСПЕЦИФИЧЕСКИХ АНТИГЕНОВ ИЗ МИОКАРДА ЗДОРОВЫХ ЛИЦ И БОЛЬНЫХ ДИЛЯТАЦИОННОЙ КАРДИОМИОПАТИЕЙОписаны методы выделения основных ткане специфических антигенов нормального и пораженного дилятационной кардиомиопатией (ДКМП) миокарда (актин, миозин и тропо миозин) и аорты человека, исследованы их физико-химические свойства. Показано существенное снижение содержания данных белков в пораженном ДКМП миокарде по сравнению с нормальным.Введение. При ряде патологий сердечно-сосудистой системы человека обнаружены аутоантитела к различным белкам, а также надмолекулярным структурам миокарда [1]. Одним из заболеваний, при которых существенный вклад в развитие патологических процессов вносят аутоиммунные реакции, является дилятационная кардиомиопатия (ДКМП). Сократительный аппарат мышечных волокон представляет собой многокомпонентную белковую систему, в состав которой входят около 20 различных протеинов. Среди них миозин, актин, тропомиозин, α-, β-, γ-актинины и др. белки, выделению и изучению которых посвящен ряд исследований [2][3][4][5]. В наибольших количествах представлены три первых белка, содержание которых составляет 55, 15 и 3 % соответственно. Кроме того, данные белки играют наиболее существенную роль в процессах сокращения миокарда, в связи с чем нарушения в их функционировании могут обусловливать несостоятельность сердечной мышцы при ДКМП, приводящей к развитию сердечной недостаточности.С нашей точки зрения, исследование аутоантителогенеза против актина, миозина, тропомиозина миокарда, а также белков аорты (коллагены, структурные D-гликопротеиды, эластин) позволит изучить процессы возникновения и развития указанного заболевания.Данная работа посвящена выделению и очистке препаратов ткапеспецифических антигенов из миокарда и аорты человека для дальнейших иммунохимических исследований.Материалы и методы. Ткани нормального миокарда и миокарда больных ДКМП любезно предоставлены сотрудниками УкрНИИ кардиологии им. акад. Н. Д. Стражеско. До выделения. антигенов ткань освобождали от жира и тщательно отмывали от остатков крови холодной дистиллированной водой.Гомогенат ткани миокарда экстрагировали раствором Бейли (0,5 M KCl, 0,03 M NaHCO 3 ), после чего разводили в 20 раз холодной бидистиллированной водой. В результате актомиозиновый комплекс выпадал в осадок. Осадок собирали центрифугированием и использовали для выделения актина и миозина.
Восстановленный и карбоксиметилированный полиэдрин расщепляли трипсином. Из триптического гидролизата методом гель-фильтрования, высоковольтного электрофореза и хроматографии на бумаге выделено 48 пептидов. Определено их строение или аминокислотный состав. 30 пептидов с уникальными аминокислотными последовательностями насчитывают 246 остатков аминокислот. Обсуждаются особенности взаимодействия протеазы полиэдров ВЯП М. neustria с полиэдрином. Введение. Ранее [1] мы сообщили о том, что в нашей лаборатории завершается выяснение первичной структуры полиэдрина ВЯП шестого по счету (или десятого в мире) насекомого М. neustria. Мы осуществляем подобные исследования непосредственно на белке [2, 3], в других лабораториях мира основываются на нуклеотидной последовательности соответствующих генов [4, 5]. Стратегия выяснения аминокислотной последовательности, выбранная нами, предельно проста, так как полиэдрины относятся к разряду высокогомологичных белков [4, 6]. В этом случае изучается строение только триптических пептидов. Результаты таких исследований на полиэдрине ВЯП М. neustria приведены в настоящем сообщении. Физико-химический анализ этого белка был проведен ранее [7]. Материалы и методы. Полиэдрин получали растворением полиэдров в 0,1 н. NaOH (30 мин) при комнатной температуре. Раствор центрифугировали на ультрацентрифуге в течение 1,5 ч при 20 000 об/мин и 8 °С. Белок осаждали из надосадочной жидкости 14 %-м раствором трихлоруксусной кислоты и промывали дистиллированной водой. Осажденный белок восстанавливали, карбоксиметилировали [8] (ВКМ-белок) и расщепляли трипсином («Worthington», США). Протеолиз проводили в 0,2 н. NH 4 HCO 3 (рН 7,8, 37 °С) в течение 12 ч с промежуточной добавкой свежего фермента через 6 ч. Фермент-субстратное соотношение 1 : 50. Реакцию останавливали подкислением реакционной смеси
scite is a Brooklyn-based organization that helps researchers better discover and understand research articles through Smart Citations–citations that display the context of the citation and describe whether the article provides supporting or contrasting evidence. scite is used by students and researchers from around the world and is funded in part by the National Science Foundation and the National Institute on Drug Abuse of the National Institutes of Health.
hi@scite.ai
10624 S. Eastern Ave., Ste. A-614
Henderson, NV 89052, USA
Copyright © 2024 scite LLC. All rights reserved.
Made with 💙 for researchers
Part of the Research Solutions Family.