The purification of the main tissue-specific antigens from the normal and effected by dilatative cardiomyopathia human heart

Abstract

ВЫДЕЛЕНИЕ ОСНОВНЫХ ТКАНЕСПЕЦИФИЧЕСКИХ АНТИГЕНОВ ИЗ МИОКАРДА ЗДОРОВЫХ ЛИЦ И БОЛЬНЫХ ДИЛЯТАЦИОННОЙ КАРДИОМИОПАТИЕЙОписаны методы выделения основных ткане специфических антигенов нормального и пораженного дилятационной кардиомиопатией (ДКМП) миокарда (актин, миозин и тропо миозин) и аорты человека, исследованы их физико-химические свойства. Показано существенное снижение содержания данных белков в пораженном ДКМП миокарде по сравнению с нормальным.Введение. При ряде патологий сердечно-сосудистой системы человека обнаружены аутоантитела к различным белкам, а также надмолекулярным структурам миокарда [1]. Одним из заболеваний, при которых существенный вклад в развитие патологических процессов вносят аутоиммунные реакции, является дилятационная кардиомиопатия (ДКМП). Сократительный аппарат мышечных волокон представляет собой многокомпонентную белковую систему, в состав которой входят около 20 различных протеинов. Среди них миозин, актин, тропомиозин, α-, β-, γ-актинины и др. белки, выделению и изучению которых посвящен ряд исследований [2][3][4][5]. В наибольших количествах представлены три первых белка, содержание которых составляет 55, 15 и 3 % соответственно. Кроме того, данные белки играют наиболее существенную роль в процессах сокращения миокарда, в связи с чем нарушения в их функционировании могут обусловливать несостоятельность сердечной мышцы при ДКМП, приводящей к развитию сердечной недостаточности.С нашей точки зрения, исследование аутоантителогенеза против актина, миозина, тропомиозина миокарда, а также белков аорты (коллагены, структурные D-гликопротеиды, эластин) позволит изучить процессы возникновения и развития указанного заболевания.Данная работа посвящена выделению и очистке препаратов ткапеспецифических антигенов из миокарда и аорты человека для дальнейших иммунохимических исследований.Материалы и методы. Ткани нормального миокарда и миокарда больных ДКМП любезно предоставлены сотрудниками УкрНИИ кардиологии им. акад. Н. Д. Стражеско. До выделения. антигенов ткань освобождали от жира и тщательно отмывали от остатков крови холодной дистиллированной водой.Гомогенат ткани миокарда экстрагировали раствором Бейли (0,5 M KCl, 0,03 M NaHCO 3 ), после чего разводили в 20 раз холодной бидистиллированной водой. В результате актомиозиновый комплекс выпадал в осадок. Осадок собирали центрифугированием и использовали для выделения актина и миозина.

Expression and subcellular localization of p70S6 kinase under heart failure

“…Опре де ле ние ко ли чествен но го уров ня p70Sk6 в ли за тах ле во го же лу доч ка сер дца че ло века: а -ре зуль тат Вес терн-блотана ли за (1-5 -нор маль ные сердца; 6-10 -сер дца, по ра жен ные ДКМП); б -уро вень бел ка p70Sk6, нор ма ли зо ван ный от носи тель но кон троль но го бел ка GAPDH (n = 5) сок из-за осо бен нос тей функ ци о ни ро ва ния сер дца. Кос вен но это под твер жда ют и по лу чен ные на ми ранее ре зуль та ты [22] о сни же нии то таль но го уров ня бел ка в ле вом же лу доч ке по ра жен но го ДКМП ми окар да, что, не сом нен но, сви де т ельству ет о на ру шении ра бо ты бе лок син те зи ру ю ще го ап па ра та и о возмож ном сдви ге рав но ве сия меж ду би о син те зом и дег ра да ци ей бел ков в кар ди о ми о ци те [23] при прогрес сии сер деч ной не дос та точ нос ти.…”