To identify DNA of the main tick-borne pathogens in dogs from Recife (Brazil), polymerase chain reactions were carried out on blood samples of dogs treated at the Veterinary Hospital of the Universidade Federal Rural de Pernambuco from March 2007 to June 2008. The detection of DNA was performed using specific primers. Amplicons were analyzed through electrophoresis and sequencing. A phylogenetic tree was constructed using the UPGMA method, revealing that the sequences were closely related to those of strains from other geographic regions. Among the 205 blood samples analyzed, 48.78% was positive for Anaplasma platys; 38.04% was positive for Ehrlichia canis; 7.31% was positive for Babesia canis vogeli; and 0.49% was positive for Hepatozoon canis and Mycoplasma haemocanis. Coinfection of two or three pathogens was found in 23.9% (49/205) of the dogs. The subspecies B. canis vogeli was identified. Infection by H. canis and M. haemocanis is reported for the first time in dogs in the state of Pernambuco (Brazil). The data indicate that the main tick-borne pathogens in dogs in this region are E. canis and/or A. platys, followed by B. canis vogeli.

Percepção sobre o conhecimento e profilaxia das zoonoses e posse responsável em pais de alunos do pré-escolar de escolas situadas na comunidade localizada no bairro de Dois Irmãos na cidade do Recife (PE)Perception of the zoonosis and responsible pet care by the parents from public schools kindergarten located at metropolitan region of Recife, northeast of Brazil

ResumoOs sinais clínicos das infecções por Ehrlichia canis e Anaplasma platys são similares, e o diagnóstico desses patógenos feito por esfregaços sanguíneos corados é difícil devido à sensibilidade e especificidade. Por outro lado, os diagnósticos moleculares são altamente sensíveis e específicos, e nested-PCRs têm sido otimizadas para o diagnóstico preciso desses patógenos em cães. Em um Hospital Veterinário Escola, amostras de sangue total com EDTA foram obtidas de 100 cães, e esfregaços foram feitos das amostras de sangue para busca dos parasitos intracelulares. Para cada amostra, DNA foi extraído e submetido à nPCR para detecção de E. canis e A. platys. Os resultados dos esfregaços sanguíneos mostraram que 9% dos animais foram positivos para E. canis e 21% para A. platys. Com relação à nPCR, 57 e 55% dos cães foram positivos para E. canis e A. platys, respectivamente. Quando comparados com a nPCR, os esfregaços sanguíneos corados revelaram resultados falso-negativos para E. canis e A. platys. Os resultados indicam que a nPCR é altamente sensível e específica para detecção de ambos os patógenos, e os diagnósticos moleculares podem ser mais úteis nos Hospitais Veterinários.Palavras-chave: nPCR, cães, Ehrlichia, Anaplasma. AbstractThe clinical signs of Ehrlichia canis and Anaplasma platys infection are similar, and the diagnosis of these pathogens made by stained blood smears is poor due sensibility and specificity. On the other hand, the molecular diagnosis is highly sensitive and specific and nested-PCR have been optimized for accurate diagnosis these pathogens in dogs. At the veterinary teaching hospital, whole-blood samples with EDTA were obtained from 100 dogs and smears were made from blood samples for evaluation for intracellular parasites. For each sample, DNA was extracted and submitted to nPCR analysis for detection of E. canis and A. platys. The results of stained blood smears showed 9% of the animals were positive for E. canis and 21% for A. platys. Regarding of nPCR analysis, 57 and 55% of dogs were positive for E. canis and A. platys respectively. As compared to a nested PCR, the stained blood smears revealed false-negative results for both E. canis and A. platys. The results indicate that the nPCR is highly sensitive and specific for detection of both pathogens and the molecular diagnosis could be more useful at veterinary hospital.

Six hundred and eleven random-source dogs (338 male, 273

Trypanosoma (Duttonella) vivax is an important cause of economic losses among feedlot cattle. These losses are related to the morbidity, mortality, reproductive issues and decreased production. It is known that the clinical signs observed in infections by this protozoon are similar to other hemoparasitosis, which difficult the diagnosis. Therefore, the aim of this study was to detect and molecularly characterize an outbreak of trypanosomiasis caused by T. (D.) vivax in dairy cattle in the municipality of São Miguel Aleixo, state of Sergipe, Brazil. Blood samples from cattle (n = 15) presenting clinical signs compatible with trypanosomiasis were collected and parasitological and molecular evaluated. Among the samples analyzed, 34% (5/15) were positive from blood smears, 60% (9/15) from the buffy coat method and 80% (12/15) from the molecular method. The DNA sequence obtained (659 bp) showed 99% similarity to T. (D.) vivax sequences that are available in the GenBank database. The presence of this protozoon in cattle herds is a problem for producers. Diagnosing trypanosomiasis is problematic because its evolution is similar to that of other parasitic blood diseases. In addition, this is the first report of infection by T. (D.) vivax in cattle in the state of Sergipe, northeastern Brazil.Keywords: Trypanosomiasis, parasitological diagnosis, molecular diagnosis. ResumoTrypanosoma (Duttonella) vivax é responsável por consideráveis perdas econômicas na bovinocultura. Estas perdas estão relacionados à morbidade, mortalidade, problemas reprodutivos e declínio na produção. Sabe-se que os sinais clínicos apresentados em infecções por este protozoário se assemelha a outras hemoparasitoses, dificultando muitas vezes o diagnóstico. Portanto, objetivou-se com este estudo detectar a ocorrência de T. (D.) vivax em bovinos leiteiros no município de São Miguel Aleixo, Estado de Sergipe, Brasil. Para tanto, amostras de sangue (n = 15) foram coletadas e avaliadas através de métodos parasitológicos e moleculares. Do total das amostras analisadas, 34% (5/15) foram positivas no esfregaço sanguíneo, 60% (9/15) pelo método do Buffy Coat, enquanto na biologia molecular 80% (12/15) amplificaram um fragmento de DNA (659 pb) compatível com T. (D.) vivax (GenBank). Em conclusão a presença de T. (D.) vivax nos rebanhos bovinos caracteriza-se como um problema para os pecuaristas, como também para o diagnóstico, uma vez que essa tripanossomíase apresenta evolução semelhante a outras hemoparasitoses. Ademais, este é o primeiro relato de infecção por T. (D.) vivax em bovinos do estado de Sergipe, nordeste do Brasil.Palavras-chave: Tripanossomíase, diagnóstico parasitológico, diagnóstico molecular.

Objetivou-se, no presente estudo, pesquisar a prevalência de anticorpos anti-Neospora caninum em 812 amostras de soros sangüíneos de bovinos leiteiros procedentes de propriedades rurais de sete municípios das microrregiões de Itapecuru-Mirim, Médio Mearim e Presidente Dutra, estado do Maranhão, Brasil. Para o cálculo do tamanho da amostra, considerou-se um soroprevalência de 34,7% para N. caninum, com erro máximo de 9,5% e intervalo de confiança de 95%. Para a detecção da presença de anticorpos da classe IgG, utilizou-se a técnica de Imunofluorescência Indireta (IFI), com ponto de corte 1:200, usando como antígeno, taquizoítos da cepa NC-1, mantida em cultura celular no Laboratório de Diagnóstico das Parasitoses dos Animais da Escola de Medicina Veterinária da UFBA. Do total de amostras analisadas, encontrou-se uma prevalência de 50,74%. Os títulos variaram de 1:200 a 1:6400, assim distribuídos: 108 (26,21%) amostras de soro apresentaram título de 1:200; 132 (32,04%) 1:400; 94 (22,81%) 1:800; 46 (11,16%) 1:1600; 23 (5,58%) 1:3200 e nove (2,18%) com títulos de 1:6400. Dentre as microrregiões, a Itapecuru-Mirim apresentou o menor percentual de animais soropositivos (20,69%) e Presidente Dutra o maior (47,66%). Com relação à variável sexo, observou-se maior prevalência de sororreagentes nas fêmeas (46,80%) do que nos machos (52,46%). Não se verificou diferença significativa (P>0,05) para as variáveis microrregiões, sexo e idade. Conclui-se que os bovinos leiteiros das regiões estudadas estão expostos à infecção por N. caninum.

Felids are important in the epidemiology of Toxoplasma gondii because they are the only hosts that can excrete the environmentally resistant oocysts in their feces. Cats acquire T. gondii infection in nature by ingesting tissues of small mammals and birds. Serum samples of 223 feral marsupials and 174 feral rodents captured in 7 segments of the Atlantic Forest of the State of Pernambuco, northeastern region of Brazil, and in urban areas of the municipality of Recife were examined for antibodies to T. gondii by the modified agglutination test (MAT). Antibodies (MAT ≥ 25) were found in 6.7% (15 of 223) of the marsupials and 5.7% (10 of 174) of the rodents. No association was observed between seropositivity in marsupials or rodents and sex, age, or different areas of collection (P > 0.05). This is the first study on the seroprevalence of T. gondii in marsupials and rodents performed in the Atlantic Forest of the northeastern region of Brazil. The presence of antibodies to T. gondii are reported for the first time in long-furred woolly mouse opossum ( Micoureus demerarae ), murine mouse opossum ( Marmosa murina ), brown four-eyed opossum ( Metachirus nudicaudatus ), and gray short-tailed opossum ( Monodelphis domestica ).

The aim of the present study was to quantify the parasite load of Leishmania infantum in dogs using real-time PCR (qPCR). Bone marrow, lymph node and spleen samples were taken from 24 dogs serologically positive for L. infantum that had been put down by the official epidemiological surveillance service. According to the clinical signs the dogs were classified as asymptomatic or symptomatic. After DNA extraction, the samples were subjected to qPCR to detect and quantify L. infantum DNA. Out of the 24 dogs, 12.5% (3/24) were classified as asymptomatic and 87.5% (21/24) as symptomatic. Real-time PCR detected L. infantum DNA in all the animals, in at least one biological sample. In particular, 100% of bone marrow and lymph node scored positive, whereas in spleen, the presence of DNA was detected in 95.9% (23/24). In addition, out of 24 animals, 15 were microscopically positive to amastigote forms of L. infantum in bone marrow. No statistical significant difference was found in the overall mean quantity of DNA among the different biological samples (P = 0.518). Considering each organ separately, there was 100% positivity in bone marrow and lymph nodes, while among the spleen samples, 95.9% (23/24) were positive. Regarding the different clinical groups, the overall mean parasite load varied significantly (P = 0.022). According to the results obtained, it was not possible determine which biological sample was most suitable tissue for the diagnosis, based only on the parasite load. Therefore, other characteristics such as convenience and easily of obtaining samples should be taken into consideration.Keywords: Leishmania, molecular, diagnosis, parasite load, dogs. ResumoO objetivo do presente estudo foi quantificar a carga parasitária de Leishmania infantum em cães pela técnica de PCR em tempo-real (qPCR). Amostras de medula óssea, linfonodo e baço foram obtidos de 24 cães sorologicamente positivos para L. infantum que foram submetidos à eutanásia pelo serviço de vigilância oficial. Segundo os sinais clínicos, os animais foram classificados em assintomáticos ou sintomáticos. Após extração de DNA, as amostras foram submetidas à qPCR para detecção e quantificação de DNA de L. infantum. Dos 24 cães, 12,5% (3/24) foram classificados como assintomáticos e 87,5% (21/24) como sintomáticos. A PCR em tempo real detectou DNA de L. infantum em 100% dos animais, em pelo menos uma amostra biológica. Considerando cada órgão isoladamente, foi observada uma positividade de 100% em medula óssea e linfonodo, já nas amostras de baço 95,9% (23/24) foram positivas. Não foi observada diferença estatística entre a quantidade média geral de DNA entre as diferentes amostras biológicas (P = 0,518). Considerando os diferentes grupos clínicos, a carga parasitária média geral variou significantemente (P = 0,022). De acordo com os resultados obtidos não foi possível eleger a mais apropriada amostra biológica para o diagnóstico, baseado apenas na carga parasitária. Portanto, outras características como a conveniência e a facilidade de obtenção...