Isolation and identification of microorganisms in raw milk is interesting from the viewpoint of public health, since, depending on the species isolated, directed actions may be taken to improve milk quality. Milk deterioration is mainly the result of the growth of psychrotrophic microorganisms that produce heat-resistant lipases and proteases which are not denatured during pasteurization, conferring rancid and sour flavors, respectively. Thus, this work aimed at isolating and identifying the main genera of bacteria belonging to the Enterobacteriaceae family, oxidase-positive Gram-negative, Staphylococcus and Enterococcus genera, as well as determining lipase and protease activity in 16 rural farms in Boa Esperança-MG, Brazil. The Gram-negative bacteria were isolated in Eosin Methylene Blue (EMB) and Hektoen Enteric agar media. Staphylococci were isolated in Baird-Parker agar and Enterococcus in KF agar. Colonies of interest were collected and submitted to Gram stain and to catalase and oxidase tests. Following these procedures, the isolates selected were identified using Bactray I, II and III; Api 20 Strep and tests suggested by Bergey´s Manual of Determinative Bacteriology. Sorological identification of Enterococcus was carried out using Prolex. Milk from the 16 rural properties contained strains of fecal microorganisms, such as Escherichia coli and Enterococcus from the Lancefield D group. Oxidase-positive Gram-negative bacteria were identified in five farms. Staphylococcus was found in 10 farms. Milk collected from the farms investigated contained microorganisms that compromise its quality. All the microorganism groups tested showed lipase and protease activities. Keywords: raw milk; bacterial identification; mesophyllic bacteria; lipases; proteases. ResumoO isolamento e a identificação de microrganismos em leite cru se tornam interessantes do ponto de vista de saúde pública, pois dependendo das espécies isoladas, ações direcionadas podem ser tomadas visando a melhoria de sua qualidade. A deterioração do leite é conseqüência sobretudo do crescimento de microrganismos psicrotróficos, que produzem lipases e proteases termoestáveis que não são desnaturadas durante o processo de pasteurização, conferindo sabores e odores rançoso e amargo, respectivamente. Assim, o objetivo deste trabalho foi isolar e identificar os principais gêneros de bactérias pertencentes à família Enterobacteriaceae, Gram- IntroduçãoA natureza complexa e interligada para se obter alimentos e produzi-los de forma segura tem sido amplamente reconhecida. A aproximação integrada para controlar a segurança dos alimentos por toda a cadeia produtiva tem se tornado importante aspecto para se garantir grande número de alimentos seguros. Pensando em segurança, vários países elaboraram e introduziram regulamentações para garantir a segurança do alimento em diferentes estágios na cadeia de produção (VALEEVA et al., 2005). Assim, no Brasil, em 2005, entrou em vigor a Instrução Normativa 51 na qual, dentre vários fatores a serem adotados para a o...

Biofilmes correspondem a comunidades constituídas por células sésseis, mono ou multiespécies, aderidas a um substrato, embebidas em uma matriz de polímeros extracelulares (exopolissacarídeos -EPS), em cuja formação os microrganismos exibem diferenciados fenótipos, metabolismo, fisiologia e transcrição genética. (DONLAN;COSTERTON, 2002). Como etapas importantes para a sua formação, são descritas as adesões iniciais, passando os microrganismos de seu estilo de vida planctônico ao séssil, à formação de microlônias, à maturação e ao destacamento de células, retornando estas a seu estilo de vida planctônico (Figura 1 e Figura 2).Estas estruturas naturalmente ocorrem em variados tipos de ambientes, sejam eles bióticos ou abióticos. Entretanto, afora a sua ocorrência natural, pesquisas sobre a sua formação em superfícies utilizadas na produção de alimentos, como aço inoxidável American Iron and Steel Institute -AISI 304 (2008), vêm recebendo destaque, principalmente no que se refere aos malefícios de sua presença. Uma vez constituídos, os biofilmes agem como pontos de contaminação constante, liberando células de microrganismos patogênicos e/ou deterioradores, como Staphylococcus aureus e Aeromonas hydrophila, podendo comprometer, assim, a qualidade microbiológica de matérias-primas, produtos pré-acabados e acabados (FUSTER-VALLS et al., 2008). As negatividades de sua ocorrência também se relacionam à corrosão de equipamentos, usualmente designada pela expressão Corrosão Microbiologicamente Influenciada (MIC), e pela redução da capacidade da troca de calor entre superfícies (MANSFELD, 2007). Seguindo à hipótese de que na natureza a constituição destas comunidades oferecia proteção aos indivíduos, o mesmo AbstractThe aim of this research was to verify the capability of biofilm formation on stainless steel by Aeromonas hydrophila and Staphylococcus aureus using milk and different conditions of cultivation. The variables consisted in mono and multi-species cultivation of these microorganisms and in the temperatures of 4, 7 and 18 °C. Containers containing 1000 mL of milk, population density of 10 5 CFU.mL -1 of each microorganism, and ten suspended chips of stainless steel AISI 304 (10 × 20 mm) were used to seal up and storage, under 60 rpm of agitation for 10 days. The analyses were conducted every 48 hours. Sessile cells of A. hydrophila and S. aureus and were enumerated by plating in m-Aeromonas selective agar and Baird-Parker agar. Complementary studies included the generation time calculation, enumeration of planktonic cells, and visualization of chips by scanning electron microscopy. S. aureus, in mono-cultivation, formed biofilm at 18 °C and at 7 °C. At 4 °C was observed attachment. The presence of A. hydrophila reduced the performance of S. aureus. In this condition, S. aureus formed biofilm at 18 °C. A. hydrophila formed biofilm under all conditions. Keywords: Aeromonas hydrophila; Staphylococcus aureus; biofilm; milk; stainless steel; temperature. ResumoO objetivo desta pesquisa consistiu em avaliar a formação de...

RESUMOO objetivo deste trabalho foi avaliar as características microbiológicas das bebidas lácteas fermentadas comercializadas no sul de Minas Gerais. Realizou-se a enumeração coliformes totais e termotolerantes, fungos filamentosos e leveduras e bactérias lácticas. Foram coletadas amostras de cinco marcas de bebidas lácteas comercializadas em Lavras, com quatro repetições, de diferentes lotes de fabricação, para serem submetidas às análises microbiológicas. As bebidas lácteas fermentadas apresentaram-se dentro dos padrões estipulados pela ANVISA quanto à presença de contaminação microbiana, pois os mesmos não foram detectados nas amostras analisadas. A contagem de bactérias láticas foi menor que 10 6 UFC/mL em todas as análises, apresentando-se fora dos padrões estabelecidos pela legislação brasileira para as bebidas lácteas fermentadas. Termos para indexação:Bebidas lácteas fermentadas, contaminação, bactérias láticas. ABSTRACTThe objective of this work was to evaluate the microbiological characteristics of fermented dairy beverages commercialized in southern Minas Gerais. The enumeration of total and heat tolerant coliforms, filamentous fungi and lactic bacteria and yeasts was carried out. Samples were collected from different manufacturing lots of five brands of dairy beverages commercialized in Lavras-MG, with four repetitions and submitted to microbiological analyses. The fermented dairy beverages met the standards required by ANVISA for presence of microbial contamination, since no contamination was detected in the samples analyzed. Lactic bacteria count was lower than 10 6 UFC/mL in all the analyses and did not meet out legal parameters established by the Brazilian legislation for fermented dairy beverages.

O leite é um alimento de grande valor nutricional, alta atividade de água e elevado teor proteico, características que o tornam um excelente substrato para o desenvolvimento de microrganismos. Os tipos e números de microrganismos encontrados no leite cru podem ser usados para avaliar os níveis de contaminação existentes. O trabalho visou avaliar a qualidade do leite cru em dois municípios do Sul Fluminense-RJ. Foram coletadas 10 amostras e submetidas à enumeração de microrganismos aeróbios mesófilos e psicrotróficos pelos métodos de plaqueamento em profundidade e superfície, respectivamente. A atividade proteolítica foi verificada em Ágar Leite, a partir de colônias de microrganismos psicrotróficos. A enumeração de coliformes totais e termotolerantes foi realizada pela Técnica do Número Mais Provável (NMP). A presença de coliformes fecais foi confirmada em três amostras. Uma amostra apresentou contagem de microrganismos aeróbios mesófilos acima do valor estabelecido pela legislação. Sete amostras exibiram contagem de microrganismos psicrotróficos entre 103 e 106 UFC/mL. A atividade proteolítica foi confirmada em seis amostras. A qualidade do leite é influenciada diretamente pela maneira com que o mesmo é coletado, armazenado e comercializado. É necessário um controle rigoroso na higiene do animal, dos utensílios, dos ordenhadores e materiais onde o leite será armazenado.

This research evaluated the antimicrobial effect of the clove (Syzygium aromaticum) and lemongrass (Cymbopogon citratus (DC.) Stapf.) essential oils (EOs) against Listeria monocytogenes ATCC 19117 growth added to bovine ground meat stored under refrigeration (5 ± 2 °C) for three days. The EOs, extracted by hydrodistillation and analyzed by gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS), were tested in vitro using an agar well diffusion methodology for determination of Minimum Inhibitory Concentration (MIC). The MIC concentrations for both essential oils on culture tested of L. monocytogenes were 1.56%. The EOs concentrations applied in contaminated ground beef were 1.56, 3.125 and 6.25% (w/v) based on MIC levels and possible activity reductions by food constituents. The bacteria populations were significantly reduced (p ≤ 0.05) after one day of storage in ground meat samples treated with clove and lemongrass EOs at concentrations of 1.56%. There were no significant counts of L. monocytogenes in samples at the other concentrations of the two oils applied after the second day of storage. The sensory acceptability evaluation of the bovine ground meat samples treated with EOs showed that the addition at concentrations higher than 1.56% promote undesirable alterations of taste, odor and characteristic color. The application of EOs at low concentrations in food products can be used in combination with other preservation methods, such as refrigeration, to control pathogens and spoilage bacteria during shelf-life; which goes according to current market trends, where consumers are requesting natural products.

Resumo Cruá vermelho é um fruto aromático ainda pouco conhecido, originário da América Tropical, provavelmente do Brasil. É utilizado para fins alimentar, medicinal, repelente de insetos e aromatização de ambientes. Pouco se sabe acerca de suas características nutricionais. Diante do exposto, o presente trabalho visou realizar a caracterização física, físico-química e nutricional do fruto cruá vermelho. Os frutos foram caracterizados quanto a composição centesimal, pH, sólidos solúveis (SS), acidez titulável (AT), cálculo da ingestão diária recomendada (IDR), antocianinas, carotenoides totais, vitamina C e atividade antioxidante da polpa. A estabilidade dos carotenoides, da vitamina C e da cor dos frutos foi acompanhada durante 21 dias de armazenamento sob congelamento a -18 °C. Os carotenoides, a vitamina C e a cor do fruto foram afetados pelo congelamento durante o armazenamento. O fruto apresenta características apreciáveis do ponto de vista nutricional e funcional, uma vez que o consumo diário de 100 g de sua polpa fornece uma apreciável fração de nutrientes recomendados para ingestão diária por um indivíduo adulto. O fruto apresenta um baixo valor calórico, fato interessante para preparações dietéticas, além de apresentar capacidade antioxidante e compostos fitoquímicos de interesse para a saúde humana, como carotenoides e antocianinas. Em relação à preservação dos compostos bioativos apresentados pelo fruto, verificou-se que o congelamento não foi eficaz para a preservação de carotenoides e vitamina C. Diante de todas as características apresentadas, cruá vermelho se apresenta como uma excelente alternativa para inclusão na alimentação humana.

RESUMO:A evolução de certos microrganismos permite sua rápida adaptação aos ambientes em constante mudança, desenvolvendo assim, tolerância ou resistência ao aumento de determinados estresses. O uso de compostos bioativos provenientes da flora nativa tem sido apontado como uma possível solução para os problemas de controle da resistência e proliferação bacteriana. Este trabalho visou verificar a adaptação e adaptação cruzada de L. monocytogenes, frente aos compostos fenólicos eugenol e carvacrol. A concentração mínima inibitória (CMI) dos compostos fenólicos foi determinada pela técnica de microdiluição em placas de 96 cavidades, em caldo TSB + 0,5% de Tween 80. As concentrações finais (%) obtidas foram: 0,06; 0,12; 0,24; 0,49; 0,98; 1,95; 3,9; 6,25; 12,5; 25; 50. A suspensão bacteriana padronizada foi inoculada nas cavidades das placas, as quais foram incubadas a 37ºC por 24 horas com posterior leitura da absorbância a 620 nm e determinação da CMI. A adaptação das células de L. monocytogenes ao eugenol e carvacrol foi realizada com o cultivo das células em TSB + 0,06% de eugenol ou carvacrol à 37°C por 2 horas. A cultura foi então centrifugada e as células ressuspendidas e padronizadas em TSB. A seguir, realizou-se novamente a técnica de microdiluição em caldo. Os resultados obtidos demonstraram que L. monocytogenes apresentou adaptação e adaptação cruzada frente ao carvacrol e eugenol. A CMI do eugenol e carvacrol foi de 24%. A pré-exposição de L. monocutogenes a concentração sub-letal de 0,06% de carvacrol ou de eugenol aumentou sua resistência. A pré-exposição ao carvacrol promoveu a adaptação de L.monocytogenes a ele aumentando a CMI para 12,5%. Já para o eugenol a CMI passou para 25%. Quando submetidas à concentração sub-letal de eugenol, este promoveu a adaptação das células tanto ao carvacrol quanto ao eugenol, sendo a CMI de 12,5%. Os resultados obtidos demonstraram que L. monocytogenes apresentou adaptação e adaptação cruzada ao carvacrol e eugenol. O presente trabalho sugere estudos futuros ainda mais abrangentes quanto à potencialidade antimicrobiana destes compostos. Palavras-chave: antimicrobianos naturais, compostos bioativos, patógeno alimentarABSTRACT: Adaptation and Cross adaptation of Listeria monocytogenes to eugenol and carvacrol compounds. Some microorganisms have evolved and therefore are able to rapidly adapt themselves to a constantly changing environment, thus developing tolerance or resistance to the increase of some specific stresses. The use of bioactive compounds from the native vegetation has been pointed out as a possible solution to the problems of control of bacterial resistance and proliferation. This work aimed to check the adaptation and cross adaptation of L. monocytogenes, towards the phenolic compounds eugenol and carvacrol. The minimum inhibitory concentration (MIC) of the phenolic compounds was determined by the microdilution technic in plates of 96 cavities, in CALDO TSB + 0,5% of Tween 80. The final concentrations (%) obtained were: 0,06; 0,12; 0,24; 0,49; 0,98; 1,95;...

As conseqüências trazidas pelo uso indiscriminado de agrotóxicos como a contaminação, do solo, do lençol freático e de animais; intoxicação dos trabalhadores; além de promover a resistência de patógenos e pragas aos princípios ativos utilizados nos pesticidas, confirmam a necessidade de criação de métodos de controle fitossanitários alternativos. Baseando-se no mecanismo de defesa de plantas, caracterizado como atividade elicitora e sua ação antibacteriana, em especial, o eminente trabalho teve como objetivo avaliar o efeito bactericida dos extratos hidroalcoólicos das plantas: Hemigraphis colorata (hera-roxa) e Cymbopogon citratus (capim-limão) e dos óleos essenciais de Origanum vulgare (orégano), Thymus vulgaris (tomilho) e Melaleuca alternifolia (melaleuca) sobre o fitopatógeno Xanthomonas albilineans, causador da doença dos cultivares de cana-de-açúcar, a escaldadura das folhas. Verificou-se suscetibilidade da bactéria testada frente aos óleos essenciais de orégano e tomilho, com uma concentração mínima inibitória (CMI) de 7,81 μL/mL e insensibilidade aos extratos hidroalcóolicos de capim-limão e hera-roxa e ao óleo essencial de melaleuca.