Институт молекулярной биологии и генетики НАН Украины 252143, Киев, ул. Академика Заболотного, 150 При системных аутоиммунных заболеваниях выявляются аутоантитела против многих белков и рибонуклеопротеидов-компонентов аппарата трансляции. Ранее нами было сообщено о выявлении аутоантител против серил-тРНК синтетазы у больных системной красной волчанкой и ревматоидным артритом. В данной работе нами охарактеризованы аутоантитела против другого компонента аппарата трансляции-тирозил-тРНК синтетазы. В то время как поликлональные антитела ингибировали аминоацилирующую активность фермента до 30% базового уровня, аутоантитела из аутоиммунных сывороток активировали фермент до 280 % базового уровня, чего не наблюдалось для других исследованных в этом направлении аминоацил-тРНК синтетаз. Обсуждаются возможные причины подобного феномена.
Т. А. Рибкинска, А. И. Корнелюк, С. Ф. Берестень, Г. X. Мацука ИММУНОХИМИЧЕСКИЙ ПОДХОД К ИЗУЧЕНИЮ СТРУКТУРЫ ТИРОЗИЛ-тРНК СИНТЕТАЗЫ ИЗ ПЕЧЕНИ БЫКА В данной работе нами показано, что антигенная детерминанта для мАт T 3 против тирозил-тРНК синтетазы (КФ 6.1.1.1) из печени быка расположена вне активного центра фермента. С помощью мАт T 3 показано, что антигенная детерминанта сохраняется и для функционально активной протеолитически модифицированной формы фермента, в которой отщеплен фрагмент полипептидной цепи длиной 20 ООО. Тирозил-тРНК синтетазы млекопитающих (печень быка, печень кроля) имеют общую антигенную детерминанту линейного типа, которая отсутствует у низших эукариот (дрож<жей) и бактерий, т. е. является эволюционно приобретенной только тирозил-тРНК синтетазой высших эукариот.
Локализацию тирозил-тРНК синтетазы изучали методом иммуноэлектронной микроскопии на ультратонких срезах ткани надпочечника быка и фибробластов крыс линии RATI, которые обрабатывали моноклональными антителами ТЗ к тирозил-тРНК синтетазе и комплексами белок А-коллоидное золото. Обнаружено присутствие тирозил-тРНК синтетазы как в цитоп лазме, так и в ядрах клеток млекопитающих. В цитоплазме тирозил-тРНК синтетаза локализована главным образом вблизи полирибосом, что согласуется с концепцией компартментализации компонентов аппарата биосинтеза белка у эукариот. Значительная часть синтетазы обнаружена в ядре и локализована преимущественно в области диффузного хроматина, а также частично-в области ядрышка. Локализация тирозил-тРНК синтетазы в эукариотических клетках сходна с таковой белка р43 кодосомы-предшественника цитокина ЕМ АР Л, являюще гося высокогомологичным к некаталитическому С-домену тирозил-тРНК синтетазы. Ядерная локализация тирозил-тРНК синтетазы предполагает выполнение ею неканонических функций в ядре эукариотической клетки. Одной из таких функций может быть участие тирозил-тРНК синтетазы в экспорте зрелых молекул тРНК из ядра в цитоплазму.
Получена линия гибридом T 5 , секретирующая моноклональные антитела к тирозил-тРНК синтетазе (КФ 6.1.1.1) из печени быка, с использованием метода селекции гибридом, основанного на определении ферментативной активности. Методом иммуноблотинга показано, что антигенная детерминанта для этих антител сохраняется в денатурирующих условиях.
scite is a Brooklyn-based organization that helps researchers better discover and understand research articles through Smart Citations–citations that display the context of the citation and describe whether the article provides supporting or contrasting evidence. scite is used by students and researchers from around the world and is funded in part by the National Science Foundation and the National Institute on Drug Abuse of the National Institutes of Health.