We describe a new one-step enzyme immunoassay of troponin T that uses two specific monoclonal antibodies and streptavidin-coated tubes as the solid phase. The monoclonal antibodies were obtained by conventional hybridoma technology, with human troponin T as antigen. The identity of the cardiac troponin T antigen was confirmed by analysis of the amino acid composition and by partial sequence analysis. The specificity of the monoclonal antibodies for cardiac troponin T was proved by immunoblot analysis and displacement curves. The capture antibody is labeled with biotin. The second antibody is conjugated to horseradish peroxidase (EC 1.11.1.7). The assay [Enzymun-TestR system (Boehringer Mannheim GmbH)] is performed in only 90 min at room temperature; the measuring range for troponin T is 0.1 to 15 micrograms/L. The assay shows excellent between-run precision (CV = 3.3-4.9%).
Zusammenfassung: Für eine modifizierte Methode nach Hillmann (1) zur Bestimmung der katalytischen Konzentration an saurer Phosphatase im Serum (Substrat: a-Naphthylphosphat) werden Ergebnisse mitgeteilt.In einem Kollektiv von 158 Männern im Alter von 16 bis 85 Jahren ergab sich als Obergrenze des Referenzbereiches (95. Perzentil) für die gesamte saure Phosphatase 4,7 U/l (37 °C) bzw. 4,2 U/l (30 °C) und für die tartrathemmbare saure Phosphatase 1,6 U/l (37 °C) bzw. 1,5 U/l (30 °C). Bei 60 Frauen im Alter von 18 bis 80 Jahren lag die Obergrenze des Referenzbereiches (95. Perzentil) für die gesamte saure Phosphatase bei 3,7 U/l (37 °C) bzw. 3,0 U/l (30 °C).Eine Altersabhängigkeit der katalytischen Konzentrationen war weder bei Männern noch Frauen nachweisbar.Bei 89 Patienten mit Prostata-Carcinom der Stadien C und D wurde die katalytische Konzentration der tartrathemmbaren sauren Phosphatase mit den Substraten -Naphthylphosphat und p-Nitrophenylphosphat bestimmt.Bei 74 dieser Patienten wurde die Konzentration an prostataspezifischer saurer Phosphatase mit einem Enzyrri-Immunoassay sowie einem Radio-Immunoassay ermittelt.Die Sensitivität der Methode mit p-Nitrophenylphosphat ist unbefriedigend (66%), die anderen Methoden ergeben eine bessere und vergleichbare Seiisitivität (ca. 90%). Die Ergebnisse mit p-Nitrophenylphosphat unterscheiden sich signifikant von denen mit -Naphthylphosphat als Substrat; die beiden immunchemischen Verfahren zeigen jedoch gegenüber der neuen Methode keinen signifikanten Unterschied.Es wird deshalb vorgeschlagen, die ältere Methode mit/7-Nitrophenylphosphat zugunsten der neuen Methode aufzugeben. Katalytische Konzentrationen an tartrathemmbarer saurer Phosphatase im Grenzbereich normal-pathologisch (1,6-2,0 U/l, 37 9 C) sollten mit einem immunchemischen Verfahren kontrolliert werden.
Acid phosphatase in serum (substrate: a^naphthylphosphate): Reference values and diagnostic significanceSummary: We report the results obtained with a modification of Hillmann's method (1) for determination of the catalytic concentration of acid phosphatase in serum using -naphthylphosphate äs the substrate. In a group of 158 males aged 16-85 years, the upper limit of the reference ränge (95 th percentile) for the total
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