No abstract

No abstract

Thawing in the water bath is often considered as a standard procedure. The thermal history of samples thawed in this way is poorly controlled, but cryopreservation and banking of cell-based products require standardization, automation and safety of all the technological stages including thawing. The programmable freezers allow implementation of the controlled cooling as well as the controlled thawing. As the cell damage occurs during the phase transformation that takes place in the cryoprotectant medium in the process of freezing-thawing, the choice of warming rates within the temperature intervals of transformations is very important. The goal of the study was to investigate the influence of warming rates within the intervals of the phase transformations in the DMSO-based cryoprotectant medium on the cell recovery and to develop a cryopreservation protocol with controlled cooling and warming rates. The temperature intervals of phase transformations such as melting of the eutectic mixture of the cryoprotectant solution (MEMCS), melting of the eutectic salt solution (MESS), melting of the main ice mass (MMIM), recrystallization before MEMCS, recrystallization before MESS and recrystallization before MMIM were determined by thermo-mechanical analysis. The biological experiments were performed on the rat testicular interstitial cells (TIC). The highest levels of the cell recovery and metabolic activity after cryopreservation were obtained using the protocol with the high (20 °C/min) warming rate in the temperature intervals of crystallization of the eutectics as well as recrystallizations and the low (1 °C/min) warming rate in the temperature intervals of melting of the eutectics as well as MMIM. The total cell recovery was 65.3 ± 2.1 %, the recovery of the 3-beta-HSD-positive (Leydig) cells was 82.9 ± 1.8 %, the MTT staining was 32.5 ± 0.9 % versus 42.1 ± 1.7 %; 57.4 ± 2.1 % and 24.0 ± 1.1 % respectively, when compared to the thawing in the water bath.

The aim: of the work was to study the antiviral activity of the metabolites of the probiotic strain Lactobacillus rhamnosus GG (LGG or ATCC 53103) regarding clinical strains of enteroviruses (Coxsackie B-5, ECNO21) isolated from the feces of intestinal infections. Materials and methods: The object of the study was substrate-dependent cell cultures of HeLa, Vero, Hep-2 lines. The titer of the virus was determined by the presence of a clear cytopathic action (CPA) in the monolayer infected cells of the virus. Results: Determination of the enteric virus infections activity in the culture fluid showed that in samples with the LGG metabolites, the infections activity of the clinical strains of enteroviruses decreased after 24 hours, at 1.5-1.7 (p <0.05) times, and after 96 hours in 3, 6 – 5,7 times (p <0,01). the processing of cell cultures by metabolites in the amount of 0.3 mg / ml contributed to a decrease in the titer of viruses by 2.77 ± 0.11 lg TCDD50 / cm3, 2.83 ± 0.11 lg TCD50 / cm3 and 2.94 ± 0.13 lg TCD50 / cm3 for Vero, HeLa and Hep-2 line cells in 24 hours. Conclusions: It has been experimentally determined that the maximum tolerated dose (MTD) of L. rhamnosus GG metabolites was 0.3 μg / ml for all cultures of cell lines. Determination of the antiviral activity of L. rhamnosus GG metabolites in clinical viruses of enteroviruses (Coxsackie B-5 and ECNO-21) showed a decrease in infection activity in 1.5-1.7 times, (p <0.05) of clinical trials in clinical trials enteroviruses.

Реферат: У роботі досліджено вплив зберігання в замороженому стані структурних та метаболітних дериватів Вifidobacterium bifidum на їхню протимікробну активність. Структурні компоненти отримували шляхом циклічного заморожуваннявідігріву суспензії пробіотичного штаму біфідобактерій, продукти метаболізму -в процесі культивування біфідобактерій у власному «дезінтеграті». Зразки, що містять структурні та метаболітні деривати пробіотика, піддавали фільтрації. Протимікробну активність фільтратів визначали якісним і кількісним методами одразу після одержання та зберігання впродовж 60 діб за температури (-23 ± 1)ºС по відношенню до тест-культур: стафілококів, коринебактерій та синьогнійної палички. Результати дослідження показали, що заморожування дозволяє ефективно зберігати протимікробний потенціал фільтратів: відмінності між протимікробною активністю свіжоотриманих фільтратів та тих, що зберігалися в замороженому стані, відсутні за умови застосування якісного методу оцінки. Кількісний метод дозволив виявити статистично значуще зниження протимікробної активності фільтратів після зберігання у замороженому стані. Різниця між кількісними показниками життєздатності тест-культур після експозиції у свіжоотриманих та розморожених фільтратах склала 0,2-0,8 lg КУО/мл.Ключові слова: біфідобактерії, деривати біфідобактерій, протимікробна активність, зберігання, заморожування-відігрів.Реферат: В работе исследовано влияние хранения в замороженном состоянии структурных и метаболитных дериватов Вifidobacterium bifidum на их противомикробную активность. Структурные компоненты получали путем циклического замораживания-отогрева суспензии пробиотического штамма бифидобактерий, продукты метаболизма -в процессе культивирования бифидобактерий в собственном «дезинтеграте» Образцы, содержащие структурные и метаболитные дериваты пробиотика, подвергали фильтрации. Противомикробную активность фильтратов определяли качественным и количественным методами сразу после получения и хранения в течение 60 суток при температуре (-23 ± 1)ºС по отношению к тест-культурам: стафилококков, коринебактерий и синегнойной палочки. Результаты исследования показали, что замораживание позволяет эффективно сохранять противомикробный потенциал фильтратов: различия между противомикробной активностью свежеполученных фильтратов и образцов, хранившихся в замороженном состоянии, отсутствуют при условии применения качественного метода оценки. Количественный метод позволил выявить статистически значимое снижение противомикробной активности фильтратов после хранения в замороженном состоянии. Разница между количественными показателями жизнеспособности тест-культур после экспозиции в свежеполученных и размороженных фильтратах составила 0,2-0,8 lg КОЕ/мл. Ключевые слова: бифидобактерии, дериваты бифидобактерий, противомикробная активность, хранение, замораживаниеотогрев.Abstract: The effect of storage in a frozen state of structural and metabolic derivatives of Bifidobacterium bifidum on their antimicrobial activity was investigated. Structural components were obtained by cyclic...

Transplantation of hormone-producing cells is an experimental endocrine dysfunction treatment. The present study investigated the effects of orchidectomy (OE) and transplantation of interstitial cell suspension (ICS) on rat sexual behavior. Adult experimental animals were divided into two populations. One of these populations had sexual experience before the experiment and the other did not. Each population was divided into three groups: control group and two orchidectomized groups. One of the orchidectomized groups was treated with ICS, and the other was treated with the vehicle. The changes in the sexual behavior were investigated on the following parameters: mount latency (ML), intromission latency (IL), ejaculation latency (EL), mount frequency (MF), intromission frequency (IF), copulatory efficacy (CE), and IF/EL ratio. The investigation of these changes lasted 4 weeks after ICS transplantation. The parameters of sexual behavior reflected a decrease in sexual function after OE at the beginning of the observation, especially for the animals that did not have a sexual experience. However, it was shown that sexual activity increased in the following 4 weeks. We have indicated that the loss of gonads attenuated the capacity to acquire sexual experience; nonetheless, it did not mean that the animals completely lost this capacity. Transplantation of ICS facilitated the maintenance of male sexual behavior after OE, fractionally enlarged the size of regressed seminal vesicles of the animals, and increased the free testosterone (T) level. These findings suggest the ICS can be considered as a temporal source of androgens, which can facilitate a restoration of sexual activity.

Реферат: Досліджено життєздатність бактерій пробіотичного штаму Bifi dobacterium bifi dum 1 за впливу гіпотермії, одноразового та повторних циклів заморожування-відтавання (термоциклювання). Зразки суспензій біфідобактерій одразу після виділення або після добового гіпотермічного зберігання заморожували трьома cпособами до кінцевої температури (-23 ± 1) або (-196 ± 1)ºС. Після повільного заморожування зразків до (-23 ± 1)ºС спостерігали більші кількісні втрати біфідобактерій, ніж після швидкого заморожування прямим зануренням у рідкий азот. Зберігання зразків за гіпотермічних умов та одноразове заморожування-відтавання супроводжувалися значним пригніченням добового приросту біомаси біфідобактерій і посиленням утворення ними біоплівок. Десятиразове термоциклювання найбільш несприятливим для виживання способом не призводило до загибелі всіх клітин у суспензіях: життєздатними залишалися до 35% біфідобактерій. Показники здатності біфідобактерій до нарощування біомаси зберігалися на рівні 35%, а здатності до біоплівкоутворення-на рівні 43,7-65,5% від відповідних показників свіжовиділених клітин.

No abstract