Molecular characterization of Bovine leukemia virus (BLV) isolates from Brazil using the env gene sequences revealed a high conservation of this gene. In most cases the substitutions corresponded to silent transitions. In addition, cystein residues, potential glycosylation sites, neutralization domains and other critical residues involved with the envelope structural domains and viral infectivity were conserved. Most of the substitutions found in the aminoacid sequences of the gp51 protein were localized in the G and H epitopes. Using the SIFT software, it was predicted that they should not alter the protein functions. Phylogenetic analyses showed that partial or complete env gene sequences grouped in three or four phylogenetic clusters, respectively. The sequences from the Brazilian isolates had similar mutation rates as compared to samples from other countries, and belonged to at least two phylogenetic clusters.

Analysis of the partial bovine leukaemia virus (BLV) env gp51 gene sequences obtained from three BLV strains isolated in three different regions of Brazil was carried out. The Brazilian BLV env gp51 sequences were compared with seven other corresponding sequences of BLV strains isolated in different countries and with consensus sequence as well. The obtained data point on qualitative and quantitative differences among the analysed strains as far as the occurrence of single point mutations is concerned. Two Brazilian strains show significantly higher mutation rate than other analysed strains. Amino acid analysis did not show, however, any substantial changes of the primary protein structure coded by well conserved region of BLV env gp51 gene. Based on the obtained data, the putative dendogram image of possible phylogenetic relations among the studied BLV strains is presented as well.

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RESUMOAmostras de sangue de 12 animais soropositivos pelo teste de imunodifusão em gel de agarose e que não apresentavam sinais clínicos sugestivos de infecção pelo vírus da artrite-encefalite caprina (CAEV) foram coletadas para isolamento viral. Mácrofagos derivados de monócitos foram co-cultivados com células de membrana sinovial caprina (MSC), resultando em cinco amostras que apresentaram efeito citopático característico do tipo persistente, semelhante ao observado para o CAEV. Uma técnica de reação em cadeia de polimerase (PCR) foi padronizada para amplificar parte do gene gag do genoma pró-viral, codificante para a proteína do capsídeo viral (p25). As cinco amostras foram amplificadas pela PCR e três delas, BR-UFMG/PL1, BR-UFMG/PL2 e BR-UFMG/PL3, foram seqüenciadas diretamente dos seus produtos de PCR. O alinhamento múltiplo das seqüências obtidas com outras de lentivírus de pequenos ruminantes (LVPR), obtidas no GenBank, e o dendrograma revelaram que as novas amostras de CAEV são únicas e distintas das demais amostras de LVPR, possuindo maior identidade de nucleotídeos e aminoácidos entre si e com as amostras de CAEV do que com a do vírus maedi-visna.Palavras-chave: vírus da artrite-encefalite caprina, isolamento, PCR, análise filogenética ABSTRACT Blood samples from 12 seropositive animals by agar gel immunodifusion test (AGID) showing no evident clinical signs of disease were taken to attempt caprine arthritis-encephalitis virus (CAEV) isolation. Monocyte-derived macrophages were co-cultured with goat synovial membrane cells (GSM) resulting in five virus isolations, which presented cytophatic effects of the persistent type, resembling those observed for CAEV. A polymerase chain reaction (PCR) assay was designed to amplify a portion of the gag proviral gene coding for the major core protein (p25). All of the five isolates were amplified by this PCR and three of them named BR-UFMG/PL1, BR-UFMG/PL2 and BR-UFMG

Bovine leukemia virus (BLV) is the causative agent of enzootic bovine leukosis (EBL). After infection with BLV there is no detectable viremia but there is a strong and persistent humoral immune response to structural proteins, essentially the gp51 envelope glycoprotein and the major core protein p24. Polymerase chain reaction (PCR) with primers used to amplify part of env gene, agar gel immunodiffusion (AGID) which employs a crude antigen preparation derived from concentrated cell culture fluid, two commercial immuno enzymatic assays (ELISAs) and one ELISA with recombinant gp51 antigen were used to detect proviral DNA and BLV antibodies in DNA and serum from bovines of Goias (GO), Mato Grosso do Sul (MS), Minas Gerais (MG) and Paraná (PR) States of Brazil. The evaluated tests presented good results. The ELISA tests were more sensitive than AGID, and highly specific. PCR sensitivity should be improved, nevertheless it is a good complementary tool for serologic diagnosis. Resumo: O Vírus da Leucemia Bovina (BLV) é o agente etiológico da Leucose Enzoótica Bovina (LEB). Após a infecção não se observa viremia, mas desenvolve-se uma resposta imune humoral forte e duradoura às proteínas estruturais, principalmente a glicoproteína do envelope gp51, do envelope, e à proteína do cerne p24. A reação em cadeia pela polimerase (PCR), com iniciadores direcionados à amplificação de fragmentos do gene env do BLV, a imunodifusão em gel de agar (IDGA), que emprega antígeno bruto derivado de sobrenadante de cultivo celular concentrado, dois ensaios imunoenzimáticos (ELISA) comerciais e um ELISA que emprega a proteína gp51 recombinante foram utilizados para detectar, respectivamente, o DNA proviral e anticorpos para o BLV em amostras de DNA e soro de bovinos dos estados de Goiás, Mato Grosso do Sul, Minas Gerais e Paraná. Os testes de ELISA foram mais sensíveis que a IDGA e altamente específicos. A PCR revelou-se útil como ferramenta de diagnóstico complementar aos testes sorológicos.

O herpesvírus bovino tipo 1 (HVB-1) é o agente causador da rinotraqueíte infecciosa bovina, além de estar associado a doenças do trato genital em bovinos. A transmissão do HVB-1 através da inseminação artificial (IA) pode ocasionar problemas reprodutivos nas vacas inseminadas, como endometrite, infertilidade, absorção embrionária e abortos. Animais infectados tornam-se portadores vitalícios do HVB-1 e podem apresentar episódios intermitentes de reexcreção viral. O HVB-1 poder ser encontrado no sêmen de touros, independente do desenvolvimento de anticorpos neutralizantes. Uma vez que os testes sorológicos não são suficientes para se estimar a presença do HVB-1 no sêmen e que as condições de processamento e armazenamento do sêmen são ideais para a preservação do vírus, somente o exame individual das partidas pode assegurar a comercialização de sêmen livre do vírus. Testes laboratoriais para detecção do HVB-1 no sêmen bovino e medidas adicionais para controlar a transmissão do vírus através da IA são apresentados.