RESUMOAmostras de sangue de 12 animais soropositivos pelo teste de imunodifusão em gel de agarose e que não apresentavam sinais clínicos sugestivos de infecção pelo vírus da artrite-encefalite caprina (CAEV) foram coletadas para isolamento viral. Mácrofagos derivados de monócitos foram co-cultivados com células de membrana sinovial caprina (MSC), resultando em cinco amostras que apresentaram efeito citopático característico do tipo persistente, semelhante ao observado para o CAEV. Uma técnica de reação em cadeia de polimerase (PCR) foi padronizada para amplificar parte do gene gag do genoma pró-viral, codificante para a proteína do capsídeo viral (p25). As cinco amostras foram amplificadas pela PCR e três delas, BR-UFMG/PL1, BR-UFMG/PL2 e BR-UFMG/PL3, foram seqüenciadas diretamente dos seus produtos de PCR. O alinhamento múltiplo das seqüências obtidas com outras de lentivírus de pequenos ruminantes (LVPR), obtidas no GenBank, e o dendrograma revelaram que as novas amostras de CAEV são únicas e distintas das demais amostras de LVPR, possuindo maior identidade de nucleotídeos e aminoácidos entre si e com as amostras de CAEV do que com a do vírus maedi-visna.Palavras-chave: vírus da artrite-encefalite caprina, isolamento, PCR, análise filogenética
ABSTRACT
Blood samples from 12 seropositive animals by agar gel immunodifusion test (AGID) showing no evident clinical signs of disease were taken to attempt caprine arthritis-encephalitis virus (CAEV) isolation. Monocyte-derived macrophages were co-cultured with goat synovial membrane cells (GSM) resulting in five virus isolations, which presented cytophatic effects of the persistent type, resembling those observed for CAEV. A polymerase chain reaction (PCR) assay was designed to amplify a portion of the gag proviral gene coding for the major core protein (p25). All of the five isolates were amplified by this PCR and three of them named BR-UFMG/PL1, BR-UFMG/PL2 and BR-UFMG
RESUMO Os pequenos ruminantes podem ser infectados por um grupo de vírus genericamente denominado de Lentivírus de Pequenos Ruminantes (LVPR), que compreende vários isolados, distribuídos em quatro grupos filogenéticos. Os vírus Maedi-Visna (MVV) e da Artrite Encefalite Caprina (CAEV), originalmente, isolados de ovinos e caprinos, respectivamente, são os protótipos dos dois grupos. O objetivo desse trabalho foi isolar, identificar amostra de LVPR e realizar levantamento sorológico, em ovinos da raça Santa Inês. Através do co-cultivo de células de membrana sinovial ovina e sangue periférico de um ovino soropositivo ao teste de IDGA foi isolado LVPR, amostra BrPe2-01, identificada pelo aparecimento de sincícios nas monocamadas e pela reação em cadeia da polimerase (PCR). A sorologia foi feita através do teste de Imunodifusão em Gel de Agar (IDGA) em animais de 25 propriedades procedentes das regiões Agreste, Sertão, Mata Meridional e Metropolitana do Estado de Pernambuco, totalizando 558 amostras. Os resultados demonstraram sorologia positiva em 6 (1,07%) ovinos de 3 (12%) rebanhos estudados. Concluiu-se que os ovinos da raça Santa Inês estão sendo infectados pelos LVPR, porém com baixa prevalência.
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