Contribution of seminal plasma proteins to semen freezability has been reported in several species, suggesting these proteins as genetic markers. The aim of this study was to evaluate the relationship between cysteine-rich secretory protein-3 (CRISP-3) and some of its single-nucleotide polymorphisms (SNPs) with post-thawing semen quality in stallions. DNA was obtained from 100 stallions, regions of interest were amplified by polymerase chain reaction and sequenced. Evaluated SNPs within the equine CRISP-3 gene were CRISP3c.+199A>G (SNP1), CRISP3c.+566C>A (SNP2), CRISP3c.+622G>A (SNP3) and CRISP3c.+716A>G (SNP4). CRISP-3 protein content in seminal plasma was determined by enzyme-linked immunosorbent assay. Semen from 30 stallions was cryopreserved and post-thaw motility, kinetics, abnormal morphology (AM), sperm vitality (SV) and membrane integrity (MI) were evaluated. Generalized linear models were fitted and means were compared using Tukey's test. Correlation and regression analyses were performed. For SNP1 and SNP3, the AA genotype had the highest results for motility and MI; for SNP2, the best results for motility and AM were obtained with the CC genotype. For SNP4, the GG genotype had the lowest results, except for MI. A high level of CRISP-3 protein in seminal plasma had the best results for motility, kinetics, SV and AM. In conclusion, there was a relationship between CRISP-3 genotype and seminal plasma protein and post-thawing semen quality in stallions.

Cysteine-rich secretory protein-3 (CRISP-3) and some of its nonsynonymous polymorphism have been related to the fertility and freezability of stallion semen; however, the role of the CRISP-3 gene and its seminal plasma protein in the raw semen quality is still unknown. The aim of this study was to evaluate the relationship of CRISP-3 with semen quality in stallions. DNA was obtained from blood samples of 100 stallions, from which 30 stallions were randomly selected to obtain 60 ejaculates. Through PCR amplification and sequencing, the variation of four nonsynonymous SNPs from CRISP-3 was identified and haplotypes were derived. Semen quality was assessed through the total motility (MOT), sperm vitality (SV), normal morphology (NM), functional integrity of membrane (MI) and a seminal quality index (SQi). CRISP-3 protein content of seminal plasma (SP) was determined by ELISA. The effect of the genotype, the haplotype and the concentration of the CRISP-3 protein on the seminal quality were evaluated through generalized linear models and linear regression analyses. Homozygous genotypes for SNP1, SNP2 and SNP3 and the heterozygous genotype for SNP4 showed a positive effect on seminal quality. Different haplotypes with positive effect on MOT, SV, NM, MI and SQi were identified. The allelic substitution analysis resulted in positive regression coefficients for MOT (SNP2) and MI (SNP2 and SNP3). A high level of CRISP-3 resulted in a higher MOT and SQi. It is concluded that the quality of stallion semen is influenced by the genotype of CRISP-3 and the concentration of CRISP-3 protein in SP.

No abstract

A, et al. Lack of compensatory growth response in longfin yellowtail (Seriola rivoliana, Valenciennes, 1833) juveniles related to cyclical fasting and refeeding under rearing conditions.

Sperm undergo oxidative stress due to excessive production of reactive oxygen species (ROS) during cryopreservation. Some unconventional natural antioxidants can reduce ROS-induced changes in cryopreserved canine sperm. This study aimed to identify the cryoprotective effects of ergothioneine and isoespintanol on the quality of thawed canine semen. Twelve ejaculates from six dogs were cryopreserved in a tris-yolk extender without (control) or with 50 (E50), 100 (E100), or 150 (E150) µM ergothioneine or 20 (I20), 40 (I40), or 60 (I60) µM isoespintanol. We evaluated the motility and kinetics of thawed sperm using computerized analysis; determined morphology by eosin-nigrosin staining; functional membrane integrity using hypoosmotic tests, and structural membrane and acrosome integrity; mitochondrial membrane potential by fluorescence microscopy; and ROS production by spectrophotometry. Data were statistically analyzed using mixed models and Tukey tests. E100 increased total (60.6% vs. 49.6%) and progressive (26.4% vs. 20.1%) motility, straight line velocity (41.3 vs. 35.9 µm/s), and rapid sperm (17.6% vs. 12.3%) compared with controls. However, E150 reduced the numbers of hyperactive sperm. E100, I40, and I60 reduced the abnormal morphology and ROS production, and all concentrations of both antioxidants increased acrosomal integrity. We concluded that ergothioneine and isoespintanol reduce deleterious sperm alterations and oxidative stress in thawed canine semen.

El objetivo de esta investigación fue evaluar la relación entre la composición, la capacidad antioxidante y el contenido de polifenoles de concentrados para perros de diferentes segmentos comerciales. Se seleccionaron aleatoriamente 19 alimentos para perros de cuatro segmentos comerciales: popular, económico, premium y super premium. Mediante un análisis bromatológico se evaluó la composición de cada alimento. Se midió la capacidad antioxidante total (CAT) y el contenido fenólico total (FT) a través de los métodos ABTS y Folin-Ciocalteu, respectivamente. Se realizaron análisis de varianza y de correlación. Los concentrados de los segmentos premium y super premium presentaron proporciones mayores de proteína cruda y grasa, y menores de fibra cruda, cenizas, calcio y fósforo en comparación con los concentrados de los segmentos popular y económico (p<0.05). Para los segmentos popular, económico, premium y super premium se encontraron valores de FT de 160.1 ± 49.8, 146.7 ± 41.5, 131.6 ± 21.5 y 144.9 ± 34.1 mg de ácido gálico/100 g de muestra y valores de CAT de 3146.0 ± 564.5, 2895.4 ± 581.0, 2837.6 ± 241.7 y 2875.79 ± 325.8 μmol Trolox/l de muestra, respectivamente (p>0.05). Se encontró una correlación positiva entre el contenido de fibra cruda y el FT (r = 0.47, p<0.05). Se concluye que la segmentación comercial de los concentrados para perros no está reflejada en su aporte antioxidante y que un mayor contenido de fibra cruda, propio de concentrados de los segmentos popular y económico, está asociado positivamente con el contenido de fenoles.

. Evaluación de la calidad espermática epididimal en hipopótamos Hippopotamus amphibius (Artiodactyla: Hippopotamidae) ubicados en el Magdalena Medio, Colombia. Acta Zoológica Mexicana (n. s.), 32(2): 158-167. RESUMEN. El hipopótamo común (Hippopotamus amphibius)es un mamífero del orden Artiodactyla, que habita en África, con una población decreciente a nivel global. Con fines de conservación genética, se han realizado procesos de biotecnología reproductiva, entre los que se reporta, la recuperación de espermatozoides por métodos como la electroeyaculación y la extracción desde epidídimos. Este mamífero es considerado una especie invasora exótica y fue introducido en Colombia en 1985; actualmente se reproduce de forma descontrolada en la región del Magdalena Medio. Como medida de control poblacional, se ha realizado la esterilización quirúrgica de algunos ejemplares. El objetivo de este estudio fue evaluar diferentes parámetros espermá-ticos e histológicos, relacionados con la calidad seminal epididimal de hipopótamos comunes ubicados en el Magdalena Medio, Colombia. Dos hipopótamos fueron orquiectomizados quirúrgicamente y los espermatozoides fueron recuperados por los métodos combinados de lavado retrógrado e inyección de medio. Se realizó la evaluación de la movilidad (sistema SCA ® ), la vitalidad espermática y la morfología espermática (prueba supravital), el potencial de membrana mitocondrial (JC-1), la integridad acrosómica (FITC-PNA), y la integridad estructural (SYBR14/IP) y funcional (prueba HOS) de la membrana plasmática. Asimismo, se realizó un análisis histológico de testículos y epidídimos. A excepción de la movilidad progresiva, la integridad funcional de membrana y la morfología espermática, se hallaron resultados muy similares para los parámetros de calidad seminal de ambos individuos. Las anormalidades espermáticas predominantes fueron gota citoplasmática y cola enrollada. El análisis histológico evidenció un proceso activo de espermatogénesis. Se concluye que la extracción epididimal de espermatozoides, posterior a la orquiectomía de hipopótamos comunes ubicados en un hábitat no nativo, permite obtener muestras espermáticas de buena calidad. Palabras clave: Colombia, cinética espermática, histología. Restrepo ABSTRACT. Common hippopotamus (Hippopotamus amphibius)is a mammal of the Artiodactyla order, living in Africa, with a declining population globally. With genetic conservation purposes, there have been processes of reproductive biotechnology, among which it is reported, recovery of sperm by methods as electroejaculation and extraction from the epididymis. This mammal is considered an exotic and invasive species was introduced in Colombia 1985; currently it reproduces out of control in the Middle Magdalena region. As a means of population control, it has performed the surgical sterilization of some specimens. The aim of this study was to evaluate different sperm and histological parameters related with epididymal semen quality of common hippopotamus located in the Colombian Middle Magdalen...

RESUMENSe desconoce en gran medida el aporte del plasma seminal a la criotolerancia del semen equino. Algunos componentes del plasma seminal son conocidos por su acción antioxidante y, en consecuencia, podrían influir en la estabilidad oxidativa de los lípidos y las proteínas del semen. Esta investigación tuvo como objetivo evaluar la relación entre la estabilidad oxidativa y algunos componentes del plasma seminal con la criotolerancia del semen equino. En el plasma seminal de 30 caballos se evaluó el contenido de vitamina C (VC) por HPLC, proteínas totales (PT) por Bradford, y la oxidación proteica (OP) y lipídica (PL) por medición de carbonilos y el ensayo TBARS, respectivamente. El semen se congeló con 10% de plasma seminal y se evaluó la calidad seminal posdescongelación. Se realizó el ajuste de modelos lineales generalizados (GLM), análisis de regresión y correlación y la comparación de medias por Tukey. Se encontraron promedios de 7.13 mg BSA/ml y 6.05 mg/l para PT y VC, respectivamente. Los resultados de oxidación de lípidos y proteínas fueron de 3.27 nmol MDA/l y 0.03 nmol carbonilos/g de proteína, respectivamente. Se encontraron asociaciones entre VC, PT, OP y PL con varios parámetros de calidad seminal posdescongelación (p<0.05). Se concluye que los niveles de vitamina C, proteínas totales y oxidación del plasma seminal están asociados con la criotolerancia del semen equino.