Environmental Control for Large Scale Production of In Vitro Plantlets

Kozai, Toyoki; Kitaya, Yoshiaki; Fujiwara, Kazuhiro; Adelberg, Jeffrey

doi:10.1007/978-94-011-0307-7_92

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“…Comparativamente, as plantas desenvolvidas heterotroficamente, em geral, apresentamse pouco lignificadas, com células de parede pouco espessadas, com abundância de espaços intercelulares, sistema vascular pouco desenvolvido e reduzida quantidade de tecidos de sustentação, sujeitos a desordens morfológicas e fisiológicas. Portanto, em geral, a anatomia interna e a ultra-estrutura são, diferentes daquelas crescidas fotoautroficamente, em casa de vegetação ou em campo (DONNELLY et al, 1985;KOZAI & KITAYA, 1995;WETZSTEIN et al, 1981;ZIV, 1986).…”

Section: (Recebido Em 2 De Fevereiro De 2007 E Aprovado Em 8 De Junhounclassified

Estímulo do comportamento fotoautotrófico durante o enraizamento in vitro de Annona glabra L. , II. Aspectos da anatomia da folha antes da aclimatização

et al. 2008

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RESUMOA baixa sobrevivência durante a aclimatização de plantas regeneradas através da micropropagação tem sido atribuída, entre vários fatores, à baixa capacidade fotossintética. O desenvolvimento de protocolos que utilizem sistemas de cultivo in vitro fotoautotróficos surgem como possibilidades potenciais para aumentar a eficiência da micropropagação. Objetivou-se, neste trabalho comparar as medições dos tecidos foliares de plantas de Annona glabra L. cultivadas in vitro, sob condições de estímulo ao fotoautotrofismo e heterotróficas, durante a fase de enraizamento, com plantas ex vitro (mantidas sob radiação fotossintética ativa de 130-170µmol.m -2 .s -1 , sem controle de temperatura). As brotações foram enraizadas em condições de estímulo ao fotoautotrofismo (meio sem sacarose e com aeração) e em condições heterotróficas (meio com sacarose e sem aeração). O meio de cultivo utilizado foi o WPM adicionado de 164,4mM de carvão ativado e 4,9µM AIB. Após 30 dias de cultivo realizaram-se medições das espessuras das epidermes abaxial, adaxial, parênquima esponjoso, paliçadico e do limbo. Verificaram-se variações na anatomia das folhas, que foram caracterizadas por um aumento na espessura foliar de acordo com a aeração estabelecida. O enraizamento de plantas de A. glabra em condições de estímulo ao fotoautotrofismo permitiu desenvolvimento anátomo-fisiológico semelhante àquele observado em condições ex vitro, o que pode minimizar as perdas no processo de micropropagação.Termos para indexação: Cultura de tecidos, rustificação, redução de custos, Annona glabra. ABSTRACTThe low survival during the acclimatization of plants regenerated through the micropropagation has been attributed, among several factors, to low the photosynthetic capacity. The development of photoautotrophic in vitro culture systems appears as potential possibilities of increasing the efficiency of the micropropagation. The aim of this work was to compare the leaf anatomy of plants of Annona glabra L. cultivated in vitro, under photoautotrophic and heterotrophic conditions, during the phase of rooting, with ex vitro (maintained in greenhouse under photosynthetic acitve radiation of 130-170µmol.m -2 .s -1 , without control of room temperature). Shoots were rooted in photoautotrophic conditions (sucrose-free medium with aeration) heterotrophic conditions (medium with sucrose without ventilation). The medium of culture was the WPM supplied of 164.4mM of activated charcoal and 4.9 M AIB. After 30 days of culture measurements of the foliar thickness of the epidermises abaxial, adaxial, parenchyma spongy, palisade and limb one. Verified variations in the anatomy of the leaves, that had been characterized by an increase in the leaf thickness in accordance with the established aeration. In vitro photoautotrophic rooting of plants Annona glabra L stimulated an anatomical and physiological development similar to the one observed in an ex vitro condition, which may minimize the losses at the acclimatization process.

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Section: (Recebido Em 2 De Fevereiro De 2007 E Aprovado Em 8 De Junhounclassified

Estímulo do comportamento fotoautotrófico durante o enraizamento in vitro de Annona glabra L. , II. Aspectos da anatomia da folha antes da aclimatização

et al. 2008

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“…Por sua vez, o uso comercial da cultura de tecidos é ainda limitado, principalmente pelo elevado custo dos reagentes e equipamentos utilizados e pela relativa baixa eficiência no desenvolvimento e multiplicação que algumas espécies apresentam sob condições in vitro (Ziv, 1995;Kozay et al, 1997;Guerra et al, 1999).…”

Section: Introductionunclassified

“…Além disso, o uso de um meio de cultura apropriado para cada fase do cultivo é condição básica, devendo estes meios proporcionarem os nutrientes necessários ao metabolismo das células vegetais em cultivo para o crescimento e diferenciação dos tecidos (Kozay et al, 1997).…”

Section: Introductionunclassified

Protocolo para produção de material propagativo de batata em meio líquido

Pereira

Fortes

2003

Pesq. agropec. bras.

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Resumo -Os meios semi-sólidos são os mais utilizados em trabalhos de micropropagação, mas há indícios de que o estado físico dos meios de cultura influencia a multiplicação dos cultivos. O objetivo deste trabalho foi estabelecer um protocolo para a multiplicação de material propagativo de batata em meio de cultura líquido. Explantes de batata da cultivar Eliza, com uma gema axilar, foram cultivados em seis diferentes meios de cultura, com (semi-sólido) ou sem (líquido) a adição do solidificante ágar. Após 21 dias de cultivo, o meio de cultura que proporcionou os melhores resultados para crescimento e taxa de multiplicação teve sua composição modificada com o objetivo de melhorar a eficiência de multiplicação de cinco cultivares em meio líquido. Foi também avaliada a necessidade de agitação dos cultivos em meio líquido. Houve ganho na eficiência de multiplicação in vitro da batata, quando se utiliza meio de cultura líquido. Os melhores resultados são obtidos quando o material é cultivado em meio constituído pelos sais de MS na concentração plena, acrescido de ácido pantotênico (5,0 mg L -1 ), tiamina (1,0 mg L -1 ), ácido giberélico (0,25 mg L -1 ) e sacarose (20 g L -1 ), sob agitação constante.Termos para indexação: Solanum tuberosum, micropropagação, cultura in vitro, propagação vegetal. Protocol for potato propagative material production in liquid mediumAbstract -Semi-solid media are more commonly used in studies of micropropagation, but the physical state of the culture media seems to influence the growth and multiplication rate of the cultivation. The objective of this work was to establish a protocol for in vitro multiplication of potato in liquid culture media. Potato explants, cultivar Eliza, with an axillary bud, were cultivated in six different culture media, with (semi-solid) or without (liquid) the addition of agar. After 21 days, the culture medium that provided the best results for growth and multiplication rate had the composition modified with the objective of improving the efficiency of in vitro multiplication of five cultivars in liquid medium. The need of agitation was also evaluated in liquid culture medium. There was high efficiency of the in vitro potato multiplication when it was cultivated in liquid medium. The MS salt medium in the full concentration, added by gibberellic acid (0.25 mg L -1 ), panthotenic acid (5.0 mg L -1 ), thiamine (1.0 mg L -1 ) and sucrose (20 g L -1 ), and under constant agitation, showed to be suitable for this purpose.Index terms: Solanum tuberosum, micropropagation, in vitro culture, plant propagation.(1) Aceito para publicação em 24 IntroduçãoA técnica de cultivar tecidos de plantas in vitro vem sendo rotineiramente aplicada a inúmeras espécies vegetais, pela possibilidade de manutenção da identidade genética dos indivíduos e obtenção de grande número de plantas sadias e de alta qualidade em pequeno espaço físico e em curto tempo, independentemente da época do ano. Por sua vez, o uso comercial da cultura de tecidos é ainda limitado, principalmente pelo elevado...

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“…A cultura de tecidos ou micropropagação vem sendo muito utilizada como uma alternativa viável de propagação da cultura em grande escala, produzindo mudas de alto vigor vegetativo, em curto espaço de tempo e isentas de problemas fitossanitários (Kozai et al, 1997;Souza et al, 2000;Alves et al, 2004).…”

Section: Introductionunclassified

Enraizamento in vitro de mudas micropropagadas de bananeira (Musa sp.) em diferentes meios de cultivo

et al. 2010

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RESUMOObjetivou-se, neste trabalho, avaliar o processo de enraizamento in vitro de mudas micropropagadas das cultivares de bananeira (Musa sp.) 'Nanicão Jangada' (AAA), 'Nanicão Grande Naine' (AAA) e 'Maçã' (AAB) utilizando-se os meios de cultivo semissólido e líquido. Foram utilizadas mudas micropropagadas oriundas de meristemas retirados de mudas do tipo chifrinho coletadas em bananais comerciais na Região do Médio Paranapanema, estado de São Paulo. Foram constituídos dois tratamentos sendo: meio líquido, sem a adição de agente gelificante e meio semissólido, gelificado com 7 g L -1 de ágar. O delineamento estatístico utilizado foi o inteiramente casualizado, sendo que cada tratamento foi constituído por 30 frascos, contendo 6 mudas/frasco. Após 30 dias, as plântulas foram retiradas dos frascos e foram avaliados os seguintes parâmetros: comprimento da maior raiz, número total de raízes, número total de folhas e altura da parte aérea. Foram avaliadas 50 plântulas por tratamento. Os resultados obtidos demonstraram que as 3 cultivares avaliadas apresentaram melhor desenvolvimento radicular em meio semissólido, entretanto, o número de raízes foi maior em meio líquido, principalmente para a cultivar 'Maçã'. O número total de folhas por plântula foi maior, de modo geral, no meio semissólido, enquanto que a altura das plântulas foi maior no meio líquido. A cultivar 'Maçã' apresentou as maiores diferenças entre os meios semissólido e líquido em todos os parâmetros avaliados. Termos para indexação:Micropropagação, cultivares, sistema radicular. ABSTRACTThe objective of this study was to evaluate the process of in vitro rooting of micropropagated seedlings of 'Nanicão Jangada' (AAA), 'Nanicão Grande Naine' (AAA) and 'Maçã' (AAB) banana cultivars (Musa sp.) using semi-solid and liquid media. Plantlets originated from micropropagated meristems removed from seedlings collected in banana trade in the Médio Paranapanema region, State of São Paulo were used. Two treatments were tested: liquid medium without the addition of jelling agent and a semi-solid medium with 7 g L -1 agar. The statistical design was completely randomized, each treatment was set for 30 flasks containing 6 seedlings per flask. After 30 days, the seedlings were removed from flask, and the following parameters were assessed: length of the longest root, the total number of roots, the total number of leaves and plant height. Fifty seedlings were evaluated per treatment. The results demonstrate that the 3 cultivars evaluated showed better root development in semi-solid medium, however, the number of roots was higher in liquid medium, mostly for 'Maçã' cultivar. The total number of leaves per seedling was higher, generally in semisolid medium, while plant height was higher in liquid medium. The 'Maçã' cultivar presented the largest differences between the semisolid and liquid media in all parameters evaluated.

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Environmental Control for Large Scale Production of In Vitro Plantlets

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Estímulo do comportamento fotoautotrófico durante o enraizamento in vitro de Annona glabra L. , II. Aspectos da anatomia da folha antes da aclimatização

Estímulo do comportamento fotoautotrófico durante o enraizamento in vitro de Annona glabra L. , II. Aspectos da anatomia da folha antes da aclimatização

Protocolo para produção de material propagativo de batata em meio líquido

Enraizamento in vitro de mudas micropropagadas de bananeira (Musa sp.) em diferentes meios de cultivo

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