Die Immunisierung von Schweinen mit Vakzinen aus inaktiviertem Aujeszky‐Virus

Skoda, R; Wittmann, G.

doi:10.1111/j.1439-0450.1973.tb01110.x

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Influence of DEAE Dextran upon Pig Lymphocyte Stimulation by Aujeszky Disease Virus Antigen

Wittmann¹,

Bartenbach²

2010

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Introduction DEAE-D is a potent adjuvant in inactivated foot-and-mouth disease and Aujeszky disease vaccines, enhancing antibody formation and protection against challenge infection, especially in pigs (SKODA and WITTMANN, 1973; WITTMANN et al., 1970 WITTMANN et al., , 1972. It has been demonstrated that inactivated virus is not adsorbed to DEAE-D, and that DEAE-D exerts its adjuvant effect even if it is separately injected locally and temporally from the inactivated virus WITTMANN et al., 1975). In vitro stimulation experiments with mouse lymphocytes (BARTENBACH and WITTMANN, 1976) showed that DEAE-D is a weak mitogen for these lymphocytes, acting apparently upon B and T cells.By using combinations of DEAE-D with concanavalin A, and lipopolysaccharide it was demonstrated that DEAE-D considerably enhances B and T cell stimulation by these mitogens, thereby favouring the T cell response. From these experiments it is concluded that DEAE-D enhances the immunologic reactivity of immunocompetent cells.To gain more information on this subject we have investigated the effect of DEAE-D on the stimulation of lymphocytes from ADV infected and noninfected pigs using virus antigen and virus-free antigen. These experiments were part of more comprehensive investigations on cell-mediated immunity against ADV (WITTMANN et al., 1976). The present paper deals with the influence of DEAE-D on virus specific lymphocyte stimulation. Material and Methods Animals and Lymphocyte PreparationFor the experiments 4'12 to 5 month old pigs of the breed "Deutsches Landschwein" were used. Nine animals were intranasally infected with 108 Abbrevations: ADV = Aujeszky disease virus; ADVSA = ADV soluble antigen; cpm = counts per min; DEAE-D = diethylaminoethyl dextran; NSA = non viral soluble antigen. Influence of DEAE Dextran upon Pig Lymphocyte Stimulation 813TCD,, of ADV, strain Phylaxia, 5th passage in BHK 21 clone CT cells. Pig no. 1 was slaughtered 4 days, pig no. 2 one week, pig no. 3 two weeks, pig no. 4 three weeks, pig no. 5 four weeks, and pig no. 6 five weeks after infection. Pigs no. 7, 8 and 9 were reinfected 4 weeks after the first infection and no. 7 slaughtered one week and no. 8 and 9 two weeks after reinfection. Furthermore, 3 non-infected 5 month old pigs (no. 10, 11 and 12) were slaughtered as controls.Further details concerning virus, cell cultures, course of infection as well as preparation of lymphocyte suspensions from retropharyngeal lymph nodes, thymus and bone marrow have been published elsewhere (WITTMANN et al., 1976). In Vitro Lymphocyte StimulationLymphocyte cultures from the various tissues (8 X lo6 lymphocytes in 2ml.) were treated with DEAE-D (MW 5 X lo5; Pharmacia, Uppsala, Sweden) 50 p g . per culture, ADVSA and NSA (0.2 ml. per culture) as well as with combinations of with ADVSA (0.2 ml.) or NSA (0.2 ml.). Lymphocyte cultures without DEAE-D and antigen served as controls. The culture medium consisted of Eagle's minimal essential medium supplement with heat-inactivated (56 "C/30 min.) fetal calf serum, and pe...

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Influence of DEAE Dextran upon Pig Lymphocyte Stimulation by Aujeszky Disease Virus Antigen

Wittmann¹,

Bartenbach²

2010

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“…Das Ausgangsvirus fur die Herstellung der Vakzinen wurde in BHK-21-Zellen, Klon CT (SCHWOBEL und AHL, 1972) geziichtet. Einzelheiten uber Virustitrationen, Neutralisationstests, Nahrmedien und Herstellung der Vakzinen sinld bereits fruher beschrieben worden (SKODA und WITTMANN, 1973). ' t ) Z.…”

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Immunisierung von Schweinen mit Aujeszkyvirus-Vakzinen, hergestellt aus zwei Plaquevarianten des Virus

Skoda

Jakubik

2010

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EinleitungIn einer vorhergehenden Arbeit (SKODA und WITTMANN, 1973) wurde uber die Wirksamkeit einer Kthylathylenimin (EEI)/DEAE-Dextran-Vakzine gegen die Aujeszkysche Krankheit (AUK) der Schweine berichtet. I m Durchschnitt waren 63 O/o der Impflinge 108 Tage nach Vakzination, bzw. Revakzination, gegenuber einer intracerebralen (i. c.) Testinfektion immun, wobei aber hohere Titerwerte neutralisierender Antikorper nur 6 Wochen lang nachweisbar waren. Nach dieser Zeit bewegten sich die Neutralisations-Titer nur mehr in einem sehr niederen Bereich. Die Vakzine wurde aus dem virulenten Stamm ,,Phylaxia" hergestellt, der wie die meisten Feldstamme eine gemischte Population von hauptsachlich zwei Varianten darstellt: die eine Variante ruft Abrundung der iadividuell degenerierenden Zellen, die andere Riesenzellbildung hervor (SKODA und Mitarbeiter, 1968). Wir hielten es deshalb fur angebracht zu prufen, wie sich die aus beiden Varianten hergestellten EEI/DEAE-Dextran-Vakzinen zur Inimunisierung der Schweine eignen. Material und Methoden Zellkulturen, Titrationen, Herstellung der VakzinenDie Klon-Isolierung des Virusstammes ,,Phylaxia" (PHY) geschah in Nil-Zellkulturen (DIAMOND, 1967) in Schalchen unter 0,7 O/o Agar als Uberschichtungsmedium. Das Ausgangsvirus fur die Herstellung der Vakzinen wurde in BHK-21-Zellen, Klon CT (SCHWOBEL und AHL, 1972) geziichtet. Einzelheiten uber Virustitrationen, Neutralisationstests, Nahrmedien und Herstellung der Vakzinen sinld bereits fruher beschrieben worden (SKODA und WITTMANN, 1973). ' t ) Z. Z. in Fa. Dr. Rentschler und Co., 7958 Laupheim.

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“…

EinleitungIn einer fruheren Veroffentlichung haben wir uber die Herstellung und die Prufung einer Aujeszkyvirus-Vakzine berichtet, die aus EEI-inaktiviertem Virus und DEAE-D als Adjuvans bestand (SKODA u. WITTMANN, 1973). Diese Vakzine schutzte etwa 60 O/o der vakzinierten Schweine 85 und 108 Tage nach der Vakzination und 109 Tage nach der Revakzination gegen eine intracerebrale Testinfektion mit AV.

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“…Nach 24 Stunden bei 4 "C wurde das inaktivierte Virus an 2-2,5 kg schweren Kaninchen auf seine Unschadlichkeit gepruft, wobei, je nach Groi3e der Charge, ein bis 3 Tiere 10 ml inaktiviertes Virus auf mehrere Stellen verteilt intramuskular appliziert bekamen. Auf die Impfung von Zellkulturen verzichteten wir, da das Kaninchen gegen A V sehr empfindlich ist und bereits durch eine bis 10 KID,, innerhalb [2][3] Tagen getotet wird (unveroff entlichte Versuche (WITTMANN u. Mitarb., 1976).…”

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Frühstadium der Immunität nach Impfung von Ferkeln mit einer inaktivierten Aujeszkyvirus‐Vakzine

Wittmann¹,

Jakubik²

1977

Zentralblatt für Veterinärmedizin Reihe B

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Zusammenfassung Nach Impfung von 6–8 Wochen alten Ferkeln mit einer Aujeszkyvirus (AV)‐Vakzine, die aus Äthylenimin‐inaktivertem Virus und DEAE‐Dextran als Adjuvans bestand, konnten neutralisierende Antikörper zum ersten Mal eine Woche nach der Impfung nachgewiesen werden. Während des geprüften Zeitraumes (6 Wochen) waren die Titer relativ nieder und die Mittelwerte zeigten keinen signifikanten Anstieg oder Abfall. Im Gegensatz zur Antikörperbildung traten bei den vakzinierten Tieren nach intranasaler Testinfektion zeitlich bedingte Immunitätsunterschiede auf. Während die vakzinierten Tiere eine Woche und 2 Wochen post vacc. immun waren, konnte 3 Wochen post vacc. ein gewisses Nachlassen des Impfschutzes festgestellt werden. Dagegen war der Impfschutz 6 Wochen post vacc. wieder stark ausgeprägt. Letzteres dürfte damit im Zusammenhang stehen, daß nach dem Verhalten der infizierten nicht vakzinierten Kontrolltiere zu schließen, die natürliche Resistenz von Ferkeln gegen das AV mit zunehmendem Alter rasch ansteigt. Die Ergebnisse wurden im Hinblick auf die Impfprophylaxe gegen AV besprochen. Summary Early stages of immunity after vaccination of piglets with an inactivated Aujeszky virus vaccine Vaccination of 6–8 week old piglets with an Aujeszky virus (AV) vaccine, consisting of ethyleneimine‐inactivated virus and DEAE dextran as adjuvant, resulted in detectable neutralizing antibody levels one week later. The titres were rather low and the mean values showed no significant rise or decline during the test period (6 weeks). Contrary to antibody production the vaccinated animals showed differences in protection against intranasal challange infection depending on vaccination time elapsed. One week and 2 weeks post vacc. the vaccinated animals were immune, whereas 3 weeks post vacc. a partial reduction of protection could be found. However, protection was very good again after 6 weeks post vacc. This may be connected with the finding that natural resistance of pigs against AV rises with age, as was shown by the infection of non vaccinated control pigs. The results are discussed with regard to immune prophylaxis against AV. Résumé Stades précoces de l'immunité après une vaccination de porcelets avec un vaccin inactivé du virus de la maladie d'Aujeszky Des anticorps neutralisants sont apparus une semaine après la vaccination de porcelets âgés de 6–8 semaines avec un vaccin du virus de la maladie d'Aujeszky (AV) inactive par l'éthyleninine et avec DEAE‐dextran comme adjuvant. Les titres furent relativement bas durant le temps d'examination (6 semaines) et les valeurs moyennes ne présentèrent aucune élévation ou chute spécifique. Certaines différences d'immunité sont intervenues dans la formation d'anticorps chez des animaux vaccinés après une infection intranasale expérimentale. Alors que les animaux vaccinés étaient immunisés une et deux semaines après la vaccination, on a constaté une certaine faiblesse de la protection vaccinale après trois semaines. La protection fut à nouveau renforcée six semaines après la vaccinati...

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Die Immunisierung von Schweinen mit Vakzinen aus inaktiviertem Aujeszky‐Virus

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Immunisierung von Schweinen mit Aujeszkyvirus-Vakzinen, hergestellt aus zwei Plaquevarianten des Virus

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