Terapia gênica

Abstract

Gene therapy is a medical intervention that involves modifying the genetic material of living cells to fight disease. Genes influ -

Realidades e perspectivas do uso de terapia gênica no tratamento de doenças

“…Teoricamente, a correção de uma mutação advinda de uma doença monogênica, como a hemofilia ou a fibrose cística, é mais simples de ser realizada, como por meio do instrumento CRISPR/Cas9 na edição de genes, 10 quando comparada com o tratamento de uma doença multifatorial como o câncer. 4,5 Para realizar o tratamento de doenças monogênicas é necessário, basicamente, que se conheça o gene responsável pela enfermidade e faça a edição e/ou inserção de cópias funcionais do gene para que a correção tenha efeito. 9 Além disso, outro método de reparo para doenças monogênicas é a utilização do sistema CRISPR/Cas9 que, por meio de um ácido ribonucleico (RNA) guia e uma enzima de restrição, identifica e corta pontualmente o DNA no gene de interesse e o próprio sistema celular de reparo do DNA é ativado para corrigir a mutação, podendo também ser inseridos ou deletados alguns nucleotídeos para reparar a mutação.…”

“…2 Para a grande maioria das doenças genéticas às quais não é possível aplicar algum desses métodos de tratamento citados, a modificação genética das células ex vivo, através da modificação de células humanas em cultura posteriormente transplantadas, será a abordagem mais propícia para um tratamento de sucesso. 3 Nesses casos, as "células geneticamente modificadas poderão ativar mecanismos de defesa naturais do organismo (como o sistema imune) ou produzir moléculas de interesse terapêutico", 4 melhorando o quadro clínico do paciente. É de interesse dos portadores de qualquer doença genética o desenvolvimento de um método para amenizar ou curar os sintomas advindos de sua enfermidade.…”

Terapia gênica em distrofias hereditárias de retina

“…Inicialmente, deve-se definir o cassete de expressão gênica, que é uma sequência de DNA contendo as informações do gene de interesse e dos elementos regulatórios que vão controlar sua expressão (1)(2) . Um segundo ponto relevante consiste em se determinar o veículo (ou vetor) que carregará o cassete de expressão até a célula-alvo (5) . O vetor ideal possui algumas características importantes, como: baixa imunogenicidade e citotoxicidade, capacidade de expressar de forma estável e duradoura o transgene, direcionamento para tipos específicos de células ou tecidos, baixo custo, fácil manipulação e produção em larga escala e a possibilidade de regular o tempo de expressão do gene exógeno.…”

“…Até o momento não foi possível produzir este vetor ideal, mas, levando em consideração o tecido-alvo, doença, duração do tratamento, aplicação in vivo ou ex vivo, tratamento localizado ou sistêmico, resposta imunológica, tamanho do transgene e interferência de elementos regulatórios, é possível determinar o melhor vetor que carregará o material genético e o introduzirá na célula-alvo, que passará a expressá-lo (4)(5) . A utilização de vetores virais para a transferência gênica é o método mais comum.…”

“…Os métodos químicos consistem na interação entre um lipí-deo catiônico (lipoplexo) ou polímero catiônico (poliplexo) e o DNA, onde a carga positiva do complexo interage com o grupamento fosfato do DNA. A internalização celular ocorre por endocitose e o vetor é degradado no citoplasma deixando a molécula de DNA livre para entrar no núcleo (5)(6) .…”