Evaluation of PCR and multiplex PCR in relation to nested PCR for diagnosing Theileria equi

Abstract

ABSTRACT.-Leal D.C., Madruga C.R., Matos P.F., Souza B.M.P.S. & Franke C.R. 2011. Evaluation of PCR and multiplex PCR in relation to nested PCR for diagnosing Theileria equi. Pesquisa Veterinária Brasileira 31(7):575-578.

Investigação clínica e comparação do esfregaço sanguíneo e PCR para diagnóstico de hemoparasitas em equinos de esporte e tração (carroceiros)

“…O exame de PCR se trata de uma prova confiável, que diagnostica a infecção em fase aguda ou crônica, em animais com alta ou baixa parasitemia, uma vez que busca a presença do DNA do hemoparasita na amostra de sangue (Barlough et al 1995, Reubel et al 1998, Madigan & Pusterla 2000, Bermann et al 2002, Parra 2009, Leal et al 2011, Malekifard et al 2014, Posada-Gusmán et al 2015. Neste estudo ficou demonstrada a maior sensibilidade do método de PCR, visto que 100% dos equinos (30 animais) apresentaram resultados positivos para hemoparasitas pela técnica molecular, enquanto que o esfregaço sanguíneo revelou 33,3% (10 equinos) de positivos.…”

“…Devido a baixa sensibilidade deste método, testes imunológicos indiretos e métodos diretos como a Reação em Cadeia da Polimerase -PCR (Polymerase Chain Reaction) tem sido incorporados com sucesso na rotina de laboratórios veterinários (Maroso et al 2002, Golynski et al 2008, Salvagni et al 2010, Leal et al, 2011, Abedi et al, 2014, Laus et al 2015, Malekifard et al 2014, Posada-Guazmán et al 2015, Sgorbini et al 2015. Provas sorológicas, como a Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) e o Ensaio Imunoenzimático (ELISA) acusam que o animal teve contato com o agente em alguma fase da vida, mas não necessariamente que são animais doentes, podendo ou não estar com o agente no seu organismo no momento da colheita, induzindo a ativação do sistema imunológico (Parra 2009, Abedi et al 2014, Laus et al 2015, Sgorbini et al 2015.…”

“…Provas sorológicas, como a Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) e o Ensaio Imunoenzimático (ELISA) acusam que o animal teve contato com o agente em alguma fase da vida, mas não necessariamente que são animais doentes, podendo ou não estar com o agente no seu organismo no momento da colheita, induzindo a ativação do sistema imunológico (Parra 2009, Abedi et al 2014, Laus et al 2015, Sgorbini et al 2015. A técnica de PCR tem sido amplamente utilizada e reportada na literatura como mé-todo que visa à investigação do DNA do agente causador da doença na amostra testada, sendo considerado método direto com maior sensibilidade que a microscopia (Bashiruddin et al 1999, Leal et al 2011, Abedi et al 2014, Laus et al 2015, Malekifard et al 2014, Posada-Guazmán et al 2015, Sgorbini et al 2015, apresentando maior eficácia comparado aos demais métodos de diagnóstico para as enfermidades em questão. O PCR identifica o DNA ou RNA de uma sequência do genoma do patógeno e é extremamente sensível à presença de poucos organismos nas amostras, por isso sua especificidade e sensibilidade são muito altas.…”

Molecular Detection and Genetic Analysis of Theileria equi Detected in Apparently Healthy Horses in Nigeria

“…In contrast, the molecular techniques from this study revealed a prevalence of 7 (6.9 %) that was lower than the value detected by microscopy. The region of the gene targeted for the detection of this parasite has been adjudged to be a very sensitive region for the detection of T. equi [10,11,23], and as such would be expected to be more sensitive than the microscopy method. Hence, the PCR prevalence result that was lower than that of microscopy may only suggest that those positive samples by microscopy that be- among the horse population in the study area.…”