<p class="p1"><em>Stevia rebaudiana </em>es una planta herbácea perenne que pertenece a la familia Asteraceae. Es originaria del norte de Paraguay y crece en climas tropicales y subtropicales. Debido a la dulzura natural de sus hojas, se le conoce como edulcorante natural, sin calorías y con muchas aplicaciones en la industria alimentaria. Por lo tanto, resulta de gran importancia comercial contar con técnicas que permitan determinar la calidad y pureza de la materia prima procesada en polvo para la producción de edulcorantes. Se ha recurrido a la implementación de técnicas moleculares mediante marcadores ISSR, que permiten amplificar las secuencias que se encuentran entre los microsatélites, con lo que se obtiene un patrón de bandas característico de cada organismo. </p><p class="p1">En este estudio se analizó la amplificación de los ISSR S3, S4, S5, S10, S11, S12 y S15 a partir de muestras de ADN de <em>S. rebaudiana</em>, provenientes de plantas cultivadas en invernadero. Las muestras de ADN se obtuvieron mediante tres diferentes protocolos de extracción a partir de material seco y fresco de la planta. De acuerdo con los resultados obtenidos, los ISSR S3, S4, S5 y S11 representan una buena opción para la detección de polimorfismos en esta especie, y por tanto para la identificación molecular de la especie. Se debe comprobar si los ISSR S10, S12 y S15 son capaces de amplificar segmentos de ADN de <em>Stevia</em>, ya que bajo las condiciones de trabajo de esta investigación no se logró la amplificación de ADN con estos imprimadores. Se considera que los ISSR son marcadores universales y se podría identificar individualmente cada cultivar de <em>Stevia </em>que vaya a destinarse a la producción comercial de esteviósidos, pero es necesario repetir los protocolos descritos con diferentes variedades e incluso se puede trabajar con diferentes especies del género <em>Stevia</em>, para obtener una caracterización general. </p>
<p>Los beneficios para la salud registrados a partir del uso de metabolitos secundarios de la planta llamada uña de gato (<em>Uncaria tomentosa</em>) han generado una fuerte demanda comercial, así como la extracción intensiva de esta especie en los países en los cuales se distribuye, con el consecuente deterioro de este recurso genético en su hábitat natural.</p> <p>Es por eso que resulta necesario implementar protocolos de cultivo de células y tejidos de esta especie, con el fin de lograr la síntesis de los compuestos en forma controlada. La corteza de las raíces es uno de los tejidos en los que se concentra la producción de estos compuestos, razón por la cual la producción de raíces de cabellera (<em>hairy roots</em>) resulta ser una técnica alternativa para la producción a escala de los metabolitos de interés.</p> <p>En este proyecto se implementó un protocolo de agroinfección de microestacas de <em>U. tomentosa </em>utilizando cepas silvestres de <em>Agrobacterium rizhogenes </em>(AR1500 y A4RS), así como el mantenimiento en medio líquido de las raíces pilosas obtenidas. En colaboración con el Laboratorio de Biología Molecular del programa PIPRA (UC Davis), se determinó la eficacia del protocolo de agroinfección, así como el uso de otras herramientas moleculares para la detección de expresión génica, las cuales mostraron resultados satisfactorios en los ensayos de agroinfección, bajo las metodologías establecidas en el proyecto.</p>
El Centro de Investigación en Biotecnología (CIB), creado en 1994, es la unidad de investigación de la Escuela de Biología del Instituto Tecnológico de Costa Rica. Como ente investigador, el CIB ofrece a la sociedad una serie de servicios técnicos especializados, como producto del conocimiento obtenido a lo largo de una cantidad creciente de proyectos de investigación, que se han desarrollado enfocados en las tres áreas de investigación: Biotecnología Vegetal, Biotecnología Ambiental y Aplicaciones
Biomédicas. Durante los 25 años de su funcionamiento, los investigadores han mostrado un fuerte compromiso para generar ciencia y tecnología con impacto a nivel nacional e internacional. Adicionalmente, las diferentes iniciativas de cooperación entre este centro y otras instituciones son una muestra clara de la dinámica de crecimiento de esta unidad de investigación, tanto en el número de proyectos como en el nivel de los mismos, siendo referente a nivel nacional y regional.
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