Caracterización genética molecular de materiales procesados de Stevia rebaudiana utilizando la técnica de microsatélites

Abstract

<p class="p1"><em>Stevia rebaudiana </em>es una planta herbácea perenne que pertenece a la familia Asteraceae. Es originaria del norte de Paraguay y crece en climas tropicales y subtropicales. Debido a la dulzura natural de sus hojas, se le conoce como edulcorante natural, sin calorías y con muchas aplicaciones en la industria alimentaria. Por lo tanto, resulta de gran importancia comercial contar con técnicas que permitan determinar la calidad y pureza de la materia prima procesada en polvo para la producción de edulcorantes. Se ha recurrido a la implementación de técnicas moleculares mediante marcadores ISSR, que permiten amplificar las secuencias que se encuentran entre los microsatélites, con lo que se obtiene un patrón de bandas característico de cada organismo. </p><p class="p1">En este estudio se analizó la amplificación de los ISSR S3, S4, S5, S10, S11, S12 y S15 a partir de muestras de ADN de <em>S. rebaudiana</em>, provenientes de plantas cultivadas en invernadero. Las muestras de ADN se obtuvieron mediante tres diferentes protocolos de extracción a partir de material seco y fresco de la planta. De acuerdo con los resultados obtenidos, los ISSR S3, S4, S5 y S11 representan una buena opción para la detección de polimorfismos en esta especie, y por tanto para la identificación molecular de la especie. Se debe comprobar si los ISSR S10, S12 y S15 son capaces de amplificar segmentos de ADN de <em>Stevia</em>, ya que bajo las condiciones de trabajo de esta investigación no se logró la amplificación de ADN con estos imprimadores. Se considera que los ISSR son marcadores universales y se podría identificar individualmente cada cultivar de <em>Stevia </em>que vaya a destinarse a la producción comercial de esteviósidos, pero es necesario repetir los protocolos descritos con diferentes variedades e incluso se puede trabajar con diferentes especies del género <em>Stevia</em>, para obtener una caracterización general. </p>

ISSR markers to assess genetic diversity of cultivated populations from artificial selection of <i>Stevia rebaudiana</i> (Bert.) Bertoni

“…The use of ISSR in the identification of genetic diversity within cultivated areas of stevia is relevant since molecular identification is more reliable than morphological characterization, highly affected by the environment. ISSR markers have only been used to investigate the relationship between accessions and between collections of stevia ( Garro-Monge et al 2014 , Heikal et al 2008 , Othman et al 2016 , 2018 , Sharma et al 2016 ). Genetic diversity within each accession or collection has not been revealed by ISSR markers.…”

“…ISSR primers have been used to evaluate the genetic fidelity of in vitro propagated plants of Stevia rebaudiana (Bert.) ( Deshmukh et al 2017 , Lata et al 2013 , Singh et al 2014 , Soliman et al 2014 ) and to assess genetic similarity among collections ( Sharma et al 2016 ) and different accessions ( Garro-Monge et al 2014 , Heikal et al 2008 , Othman et al 2018 ) of S. rebaudiana .…”

“…Although ISSR primers have been used to investigate genetic relationships among stevia accessions and collections ( Garro-Monge et al 2014 , Heikal et al 2008 , Othman et al 2018 , Sharma et al 2016 ), they have not been employed to evaluate whether there is any genetic diversity within local populations (accessions or collections). Knowledge on genetic diversity within each cultivated population and genetic structure of populations may be important to guide similar or differential management practices and for the development of more effective cultivation methods in the species.…”