(Primolius couloni) se considera un loro del Nuevo Mundo en peligro de extinción. Para establecer rangos hematológicos de referencia, se tomaron muestras de sangre de 13 especímenes (7 machos, 6 hembras) criados en cautividad en el Zoológico del Patronato del Parque de Las Leyendas de Lima, Perú. El promedio de eritrocitos y leucocitos fue 2608 x 10 3 /ml y de 10.11 x 10 3 /ml, respectivamente; 50.15% de hematocrito y 200 fl de volumen corpuscular medio; asimismo, en el recuento diferencial leucocitario se observó 64.7 y 25.3% de heterófilos y leucocitos, respectivamente. El diámetro mayor y menor de los eritrocitos fue de 11.3 y 7.0 µm, respectivamente. Estos resultados podrían emplearse como valores locales de referencia para esta especie.
RESUMENSe evaluó la posible ocurrencia de Hepatozoon caimani en una población de "caimán blanco" Caiman crocodilus en un zoológico de Lima, Perú. Se colectó muestras de sangre periférica de 10 especímenes de ambos sexos y de diversas edades, clínicamente sanos y mantenidos en cautiverio en el Parque Zoológico Huachipa. Se obtuvo tres frotices de sangre por animal y fueron teñidos con May-Grunwald-Giemsa 2%. Se identificó la presencia de hemoparásitos intraeritrocitarios del género Hepatozoon, determinándose por sus aspectos morfológicos que los gamontes corresponden a H. caimani. Palabras clave: Alligatoridae, Caiman crocodilus, Hepatozoon caimani ABSTRACTThe presence of Hepatozoon caimani in a population of Caiman crocodilus in a zoo located in Lima, Peru was evaluated. Blood samples were collected from 10 specimens of both sexes and various ages. The animals were clinically healthy and kept in captivity at the "Parque Zoológico de Huachipa". Three blood smears were prepared per animal and stained with May-Grunwald-Giemsa 2%. Intraerythrocitic haemoparasites of the genus Hepatozoon were identified and due to the morphological aspect they were considered to be H. caimani.
The comparison of temperature responses of two mytilids from the high (Brachidontes purpuratus) and low (Semimytilus algosus) intertidal zone of the Peruvian coast was carried out focusing on the production of micronucleus and nuclear abnormalities in gill tissue. Two temperatures (23 and 11°C) were evaluated, in presence of three mitomycin C concentrations as a stressor (0.02, 0.04 and 0.06 £ 10 ¡6 ), simulating hypothetical El Niño and La Niña conditions. Responses to extreme temperatures between both species were signiWcantly diVerent (P = 0.008). Frequency of micronuclei and nuclear abnormalities in S. algosus did not diVer statistically among the temperature treatments, whereas in B. purpuratus there was an observed signiWcant decrease in nuclear abnormalities (P = 0.012) and micronuclei frequencies (P = 0.002) between both temperature treatments. The low frequency of micronuclei observed at high temperature and mitomycin C suggests a better eYciency to stress resistance, as occurs during El Niño events, of the species from the higher intertidal zone of B. purpuratus compared to S. algosus from the lower intertidal zone.
ResumenEl presente trabajo describe la estandarización de las técnicas del Test de Micronúcleo (MN) y Ensayo Cometa para la evaluación del daño en el DNA de bivalvos marinos. La importancia de estas técnicas radica en que permiten evaluar la respuesta temprana al estrés ocasionado por agentes contaminantes y cambios ambientales. Tejidos branquiales de Semimytilus algosus y Aulacomya ater fueron utilizados para tratamientos in vivo e in vitro. Los tejidos fueron expuestos a los agentes mutagénicos Mitomicina C en concentraciones de 0,02; 0,04 y 0,06 x 10 -6 M y H 2 O 2 en una concentración de 100 μM con tiempos de evaluación de 1, 3, 6, 24 y 48 h. Diferentes soluciones para la colecta del tejido y aislamiento celular fueron evaluados obteniendo una mayor viabilidad celular en la solución salina CMFS, pH 7,3; en frío. El Test de Micronúcleo se modificó en la forma de obtener el disgregado celular, realizando la hipotonización en Citrato de sodio 0,9%, fijación en metanol por segundos posterior al frotis y la tinción con Giemsa 2%. La estandarización del Ensayo Cometa Alcalino, descrita por Wilson et al. (1998), se realizó modificando la suspensión celular en agarosa LMP (1% en solución Kenny, pH 7,5), la exposición a solución de lisis (pH 10 con DMSO y Tritón) con variaciones en el tiempo de 1 a 16 h, y la electroforesis en solución alcalina pH 13,7 y tinción con Bromuro de etidio y Nitrato de plata para geles de agarosa. Los cambios realizados en ambas técnicas permitieron obtener un alto número celular con morfología definida, observándose macrolesiones como la formación de MN y aberraciones nucleares, y la determinación cualitativa de microlesiones observadas por fragmentación y migración del DNA. Palabras claves: daño del DNA, micronúcleo, Ensayo Cometa alcalino, estrés, bivalvos AbstractThis work describes the standardization of Micronucleus Assay (MN) and Comet Assay techniques used for the evaluation of the DNA damage on marine bivalves. These techniques are important because they can evaluate the early stress response caused by pollutant agents and environmental changes. Branchial tissues of Semimytilus algosus and Aulacomya ater were used for in vivo and in vitro treatments. Tissues were exposed to the mutagenetic agents Mitomicine C in concentrations of 0,02; 0,04 and 0,06 x 10 -6 M and H 2 O 2 in concentration of 100 μM evaluated at 1, 3, 6, 24 and 48 h. Different solutions for the tissue collection and cell isolation were evaluated, obtaining more cell viability with cold CMFS pH 7,3 saline solution. Micronucleus Assay were modified in the obtaining of suspension cell, we used 0,9% Sodium citrate hipotonic solution, fixation in methanol for seconds after the spread and dyed with 2% Giemsa. The Alkaline Comet Assay protocol described by Wilson et al. (1998) was standardized modifying the single-cell suspension embedded in LMP Agarose (1% in Kenny solution, pH 7,5), the exposure at lysing solution (pH 10 with DMSO and Triton) with changes from 1 to 16 h, electrophoresis in alkaline solution pH 13,7 and d...
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