O transportador vesicular de acetilcolina (VAChT) participa efetivamente da neurotransmissão colinérgica. Estudos realizados em células PC12 mostraram que a serina 480 é o sítio de fosforilação do VAChT. Experimentos demostraram que a proteína quinase C (PKC) é a quinase envolvida na fosforilação do VAChT e que a substituição da serina 480 por glutamato – que imita o evento da fosforilação - aumenta a expressão do VAChT em LCDVs (vesículas maiores onde normalmente se encontram os transportadores de monoaminas ou VMATs). Para verificar se a fosforilação do VAChT altera seu tráfego em células PC12, foram feitos dois mutantes do VAChT. No primeiro, foi substituída a serina 480 (sítio de fosforilação para PKC), por alanina (um aminoácido sem carga, portanto, não pode ser fosforilado), este mutante foi denominado GFP-VAChT S480A. No segundo, a serina foi substituída por glutamato (um aminoácido que imita o estado fosforilado do VAChT), este mutante foi denominado GFP-VAChT S480E. O VAChT foi etiquetado com GFP; uma proteína fluorescente, que permite a visualização do VAChT em células PC12, através de microscopia confocal. O objetivo deste trabalho foi verificar se existem diferenças no tráfego e localização do VAChT no estado fosforilado e não fosforilado em células PC12. O VAChT no estado fosforilado localiza-se em maior concentração nas varicosidades das células (36% mais fluorescência que no corpo celular); local onde a ACh é liberada. Já o VAChT no estado não fosforilado localiza-se em maior concentração no corpo celular (20% mais fluorescência no corpo em relação às varicosidades). Estes resultados indicam que a fosforilação do VAChT afeta seu tráfego, e consequentemente, sua localização em células PC12.
scite is a Brooklyn-based organization that helps researchers better discover and understand research articles through Smart Citations–citations that display the context of the citation and describe whether the article provides supporting or contrasting evidence. scite is used by students and researchers from around the world and is funded in part by the National Science Foundation and the National Institute on Drug Abuse of the National Institutes of Health.