: Luiz Carlos Binsfeld: binsfeld@ufpr.br RESUMO: A maturação in vitro de oócitos caninos ainda apresenta resultados insatisfatórios, devido às particularidades da fisiologia reprodutiva da cadela, incluindo as diferentes fases do ciclo estral que interferem nos resultados. Os objetivos do presente trabalho foram avaliar a morfometria ovariana e identificar a influência da fase do ciclo estral sobre a quantidade e a qualidade dos complexos Cumulus oophorus (CCOs) recuperados de cadelas. Ao todo, foram avaliados os ovários de 55 cadelas submetidas à técnica de ovário-salpingo-histerectomia eletiva. Para as mensurações das dimensões e peso dos ovários foram utilizados paquímetro e balança digital. Para a avaliação da concentração plasmática de progesterona se empregou a técnica de radioimunoensaio. A recuperação dos CCOs foi procedida por fatiamento e escarificação dos ovários, enquanto que a classificação dos mesmos foi realizada por avaliação em estereomicroscópios (aumento 40x). Com relação à avaliação morfométrica dos ovários, 100% apresentaram coloração rósea; 96,36% formato oval e 3,64% formato redondo; 94,55% tinham consistência fibroelástica e 5,45% consistência flácida. O peso médio dos ovários ± erro padrão foi de 0,58 ± 0,08 g. Já as medidas médias ± erro padrão de comprimento, largura e altura foram, respectivamente, de: 13,41 ± 0,50; 7,81 ± 0,31 e 6,46 ± 0,27 mm. O número médio de corpos lúteos identificados foi de 3,62 ± 0,49. No total foram recuperados 1642 CCOs, cuja média e erro padrão/animal foram de 29,85 ± 4,20; dentre estes 58,16% foram classificados como grau 1; 26,19% grau 2; 3,78% grau 3 e 11,88% expandido. Conclui-se que a fase do ciclo estral não influenciou no número total e na qualidade dos CCOs. Palavras-chave: ciclo estral; oócito; ovário; progesterona OVARIAN MORPHOMETRIC EVALUATION AND RECOVERY OF CUMULUS-OOCYTE COMPLEXES OF BITCHES IN DIFFERENT PHASES OF ESTROUS CYCLE ABSTRACT:In vitro maturation of canine oocyte still has unsatisfactory results due to the peculiarities of the reproductive physiology of the female dog, including the different phases of the estrous cycle that interfere with the results. The aims of this study were to evaluate ovarian morphology and identify the influence of estrous cycle on the quantity and quality of Cumulus-oocyte complexes (COCs) recovered from bitches. In total, were evaluated 55 ovaries of bitches submitted to elective surgery for ovariohysterectomy. For measurements of ovarian size and weight was used digital paquimeter and balance. To evaluate the plasma progesterone concentration was employed the radioimmunoassay. The recovery of COCs was accomplished by slicing and scarification of ovary, while classifying of COCs was performed by stereomicroscopes (40x). About morphometric study of ovaries, 100% were pinkish; 96.36% had oval and 3.64% round shape, 94.55% had fibroelastic and 5.45% had flaccid consistency. The average weight ± standard error of the ovaries was 0.58 ± 0.08 g. The mean measurements ± standard error of length, width and height ...
The aim of the present paper was to investigate the efficiency of the equine chorionic gonadotropin (eCG) plus human chorionic gonadotropin (hCG) associated with medroxyprogesterone acetate (MAP) to estrous ewes synchronization. Ninety Texel ewes were investigated during seasonal anoestrous. The ewes received intravaginal sponges containing MAP (60 mg) for nine days. At the time of sponges' withdrawal, the ewes were divided into three groups (G): (1) receiving 2 mL of saline i.m. (n = 30), (2) receiving eCG 400 IU i.m. (n = 30), and (3) receiving eCG 400 IU plus hCG 200 IU i.m. (n = 30). Twelve h after sponges' removal, teaser rams were used to estrus check and remained with the ewes for 96 h. The artificial insemination was made with fresh semen 10 h after estrus detection. The effect of the treatment was not significant for the estrous rates among the groups: 73%, 90%, and 86%, respectively. The main effect was observed in the pregnancy and lambing rates among the groups: 70%, 86%, 56%, and 80%, 120%, 56%, respectively. Based on these results from our study, the use of the MAP—eCG is the best choice to improve the fertility rate on ewes.
RESUMO -O objetivo deste trabalho foi estudar a concentração de glicerol e tempo de equilíbrio para congelação de espermatozóides caninos diluídos em Tris-Gema. Vinte cães serviram como doadores sendo estimulados por massagem peniana. Semanalmente colheu-se a fração rica sêmen até a obtenção de 20 pools (3 ejaculados/pool). Após a avaliação macro e microscópica, o pool foi dividido em 4 partes iguais e diluído em amostras de Tris-gema adicionado de 4, 6, 8 e 10% de glicerol respectivamente, pelo método "one step", à temperatura de 37ºC. As amostras foram envasadas em palhetas de 0,5 ml permanecendo em equilíbrio a 4ºC por 1, 2, 3 e 4 horas, sendo então colocadas em vapor de nitrogênio líquido (N 2 ) por 15 minutos e posteriormente mergulhadas e, então, raqueadas e armazenadas em botijão criobiológico. A descongelação foi feita a 37 ºC por 30 segundos retirando-se uma alíquota para avaliação da motilidade, vigor e retenção acrossomal; o restante do sêmen foi incubado em banho Maria a 39 °C por até 4 horas para teste de termoresistência (TTR). Os melhores resultados pós-descongelação de motilidade (P <0,0001), vigor (P < 0,0008), retenção acrossomal (P < 0,04), e ttr (P < 0,01) foram obtidos com 8% de glicerol (P<0,0001) e 1 hora de equilíbrio.Palavras chave: Sêmen, cão, glicerol, tempo de equilíbrio.ABSTRACT -The aim of this study was to evaluate the glicerol concentration and the time of freezing equilibrium for the canine spermatozoa diluted in TRIS-yolk. Twenty dogs served as donors and were stimulated by penis massage. Only the rich fraction of the ejaculated fluid was weekly collected until 20 pools were obtained (3 ejaculates / pool). Following macroscopic and microscopic evaluation, the pool was divided in 4 parts and diluted in different samples of TRIS-yolk extender at 4, 6, 8 and 10% of glycerol concentration respectively, using the "one step" method at 37ºC. These samples were packed in 0.5 ml straws and kept for 1, 2, 3 and 4 hours at 4 ºC, followed by 15 minutes in nitrogen vapor, then immersed in liquid nitrogen and kept in cryobiologic bottle. The thawing step was carried out for 30 seconds at 37 ºC. A semen aliquot was used to evaluate the motility vigor and acrossomal retention and the remaining was incubated in water bath at 39°C up to 4 hours for TTR (test of thermal resistence). The best post-thawing results of motility (P < 0.0001), vigor(P < 0.0008), acrossomal retention (P < 0.04) and ttr (P < 0.01) were obtained with 8% of glicerol concentration (P <0.0001) and 1 hour of cooling-off.Key words: Semen, dog, glycerol, cooling-off period. IntroduçãoCrioprotetor: O sucesso da criopreservação do sêmen canino é afetado por muitas variáveis, incluindo-se o potencial tóxico do agente crioprotetor, particularmente relativo a concentração, duração e a temperatura em que o sêmen é exposto ao crioprotetor. Na maioria dos protocolos desenvolvidos para a criopreservação espermática, o glicerol é o agente mais utilizado, variando grandemente entre as espécies, sendo que a concentração ideal é freqüentemen...
Objetivo do presente trabalho foi comparar a performance de sêmen de cachorro in vitro e in vivo com soro de albumina bovina – tris (TB) e diluente de gema de ovo com Tris (TR). Para isso, foram usados vinte cães como doadores. O sêmen dos cães foi colhido via massagem peniana. Semanalmente a fração rica espermática foi colhida até quarenta ejaculados. Após o exame macroscópico e microscópico, as amostras foram diluídas em partes iguais de cada ejaculado com (TB e TE), pelo método one-step a 32º C. O sêmen foi embalado em palhetas francesas de 0,5 mL, as quais apresentaram características normais antes e após o congelamento. Foi avaliado a integridade cromossômica pelo método de coloração azul tripan giemsa, observando-se espermatozóides vivos intactos (LI), vivos com reação (LR), mortos intactos (DI), mortos com reação (DR). Os espermatozóides foram identificados pelo tempo de descongelamento e após 4 horas de incubação a 39ºC, o (TE) foi significativamente superior ao TB (P < 0,01) nas variáveis LI e LR. O TB foi significativamente superior ao TE (P < 0,01) na variável DR. Cadelas no estro natural foram submetidas à inseminação artificial, vinte delas recebendo sêmen com TE e vinte recebendo sêmen com TB mediante o uso de uma pipeta de Osiris ( IMV, L‘Aigle, France). Os resultados indicaram que o grupo TE foi significativamente melhor que TB (P < 0,01) em relação à taxa de prenhez e ao número de filhotes. Concluiu-se neste estudo que o grupo TE foi melhor que TB, porque isto induziu a uma reação acrossômica mais precoce no sêmen canino.
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