Neste experimento foram utilizados 10 garanhões com o objetivo de avaliar alguns parâmetros de viabilidade de espermatozóidescolhidos mediante vagina artificial antes da orquiectomia, bem como proceder a comparação com os espermatozóides colhidos mediante lavagem da cauda epididimária, após submeter os animais à orquiectomia bilateral. Relativamente às célulasespermáticas constituíram-se três grupos: 1. o colhido com vagina artificial (VA); 2. o colhido do epidídimo esquerdo; 3. e o colhido do epidídimo direito. Os parâmetros pesquisados para a avaliação da viabilidade espermática à temperatura ambiente (cerca de 22°C) foram: teste de resistência a 5°C do sêmen colhido com vagina artificial (grupo 1), motilidade total, motilidade progressiva, vigor e patologias de acrossoma (todos os grupos). Os seguintes resultados foram obtidos: a motilidade total, motilidade progressiva e vigor dos espermatozóides colhidos com VA diferiram (p<0,05) dos colhidos dos epidídimos; estes mesmosparâmetros não apresentaram diferença entre os epidídimos direito e esquerdo. Os defeitos de acrossoma dos espermatozóides não apresentaram diferença significativa entre os grupos.
RESUMO O objetivo do trabalho foi de estudar o desenvolvimento embrionário e revelar quando a prenhez pode ser detectada em bovinos. Constituindo dois grupos, 142 vacas foram submetidas a exames ecográficos para diagnóstico de gestação. Utilizou-se um aparelho Pie Medical Inc., Mod. 450 com transdutor de 5MHz, arranjo linear e uma impressora. No primeiro grupo, constituído de 12 vacas charolesas foram estudadas algumas características da anatomia fetal entre o 10° e o 50° dia. Estruturas foram detectadas na seguinte ordem e tempo (dias): vesícula embrionária (18,0 ± 0,7); embrião (24,1 ± 0,5); batimentos cardíacos (26,2 ± 0,6); âmnio (30,7 ± 0,7); membros (32,7 ± 0,6); vértebras (40,2 ± 0,7) e movimentos fetais (45,6 ± 0,5). No segundo grupo, composto de 130 vacas cruza charolesa, foi observado o desenvolvimento embrionário do 23° até o 50° dia de gestação. Neste período a vesícula embrionária atingiu um diâmetro de 46,4mm, com crescimento diário de 1,38mm; enquanto o comprimento (cabeça-anca) do embrião atingiu 36,4mm, com aumento diário de 1,15mm (P<0,0001). O diagnóstico precoce da gestação, e o seu monitoramento através da ultra-sonografia é possível a partir do 18° dia pós-serviço.
: Luiz Carlos Binsfeld: binsfeld@ufpr.br RESUMO: A maturação in vitro de oócitos caninos ainda apresenta resultados insatisfatórios, devido às particularidades da fisiologia reprodutiva da cadela, incluindo as diferentes fases do ciclo estral que interferem nos resultados. Os objetivos do presente trabalho foram avaliar a morfometria ovariana e identificar a influência da fase do ciclo estral sobre a quantidade e a qualidade dos complexos Cumulus oophorus (CCOs) recuperados de cadelas. Ao todo, foram avaliados os ovários de 55 cadelas submetidas à técnica de ovário-salpingo-histerectomia eletiva. Para as mensurações das dimensões e peso dos ovários foram utilizados paquímetro e balança digital. Para a avaliação da concentração plasmática de progesterona se empregou a técnica de radioimunoensaio. A recuperação dos CCOs foi procedida por fatiamento e escarificação dos ovários, enquanto que a classificação dos mesmos foi realizada por avaliação em estereomicroscópios (aumento 40x). Com relação à avaliação morfométrica dos ovários, 100% apresentaram coloração rósea; 96,36% formato oval e 3,64% formato redondo; 94,55% tinham consistência fibroelástica e 5,45% consistência flácida. O peso médio dos ovários ± erro padrão foi de 0,58 ± 0,08 g. Já as medidas médias ± erro padrão de comprimento, largura e altura foram, respectivamente, de: 13,41 ± 0,50; 7,81 ± 0,31 e 6,46 ± 0,27 mm. O número médio de corpos lúteos identificados foi de 3,62 ± 0,49. No total foram recuperados 1642 CCOs, cuja média e erro padrão/animal foram de 29,85 ± 4,20; dentre estes 58,16% foram classificados como grau 1; 26,19% grau 2; 3,78% grau 3 e 11,88% expandido. Conclui-se que a fase do ciclo estral não influenciou no número total e na qualidade dos CCOs. Palavras-chave: ciclo estral; oócito; ovário; progesterona OVARIAN MORPHOMETRIC EVALUATION AND RECOVERY OF CUMULUS-OOCYTE COMPLEXES OF BITCHES IN DIFFERENT PHASES OF ESTROUS CYCLE ABSTRACT:In vitro maturation of canine oocyte still has unsatisfactory results due to the peculiarities of the reproductive physiology of the female dog, including the different phases of the estrous cycle that interfere with the results. The aims of this study were to evaluate ovarian morphology and identify the influence of estrous cycle on the quantity and quality of Cumulus-oocyte complexes (COCs) recovered from bitches. In total, were evaluated 55 ovaries of bitches submitted to elective surgery for ovariohysterectomy. For measurements of ovarian size and weight was used digital paquimeter and balance. To evaluate the plasma progesterone concentration was employed the radioimmunoassay. The recovery of COCs was accomplished by slicing and scarification of ovary, while classifying of COCs was performed by stereomicroscopes (40x). About morphometric study of ovaries, 100% were pinkish; 96.36% had oval and 3.64% round shape, 94.55% had fibroelastic and 5.45% had flaccid consistency. The average weight ± standard error of the ovaries was 0.58 ± 0.08 g. The mean measurements ± standard error of length, width and height ...
Comparative validation using quantitative real-time PCR (qPCR) and conventional PCR of bovine semen centrifuged in continuous density gradient [Validação comparativa utilizando PCR quantitativo em tempo real (qPCR) ABSTRACTThe objective of the present study was to determine the sperm enrichment with X-bearing spermatozoa, after one centrifugation in a Percoll or OptiPrep continuous density gradient, using quantitative real-time polymerase chain reaction (qPCR) of sperm DNA and resultant in vitro-produced bovine embryos by PCR. Frozen/thawed sperm was layered on density gradients and the tubes were centrifuged. Supernatants were gently aspirated and the sperm recovered from the bottom of the tubes. Cleavage and blastocyst rates were determined through in vitro production of embryos and PCR was performed to identify the embryos' genetic sex. A difference in blastocyst rate was found in the Percoll treatment compared to OptiPrep (P<0.05). The percentage of female embryos in the Percoll and OptiPrep groups was 62.0% and 47.1%, respectively. These results were confirmed by qPCR of spermatozoa DNA and underestimation was seen only in the Percoll group. It was possible to sexing sperm using simple approach.
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