Citrus canker, caused by Xanthomonas axonopodis Starr and Garces pv. citri (Hasse) Vauterin et al., is one of the main problems affecting citrus production. In order to obtain resistance to phytopathogenic bacteria, insect genes, coding for antimicrobial proteins, have been used in plant genetic transformation. In this study, transgenic Citrus sinensis (L.) Osb. `Hamlin' plants expressing the antimicrobial insect-derived attacin A gene (attA) were obtained by Agrobacterium tumefaciens (Smith and Towns.) Conn-mediated transformation. Initially, the cDNA clone was used to construct a binary plasmid vector (pCattA 2300). The construction included the native signal peptide (SP) responsible for directing the insect protein to the extracellular space where bacteria is supposed to accumulate in vivo. In order to investigate the native SP effectiveness in a plant model system, onion (Allium cepa L.) epidermal cells were transformed, via biobalistics, using plasmids containing the attA gene with or without SP, fused with the green fluorescent protein gene (pattA 1303 and pSPattA 1303). Fluorescence accumulation surrounding the cells was observed only in tissues transformed with the plasmid containing the gene with SP, indicating the protein secretion to the apoplast. Citrus transformation was confirmed by PCR and Southern blot hybridization analysis in 12 regenerated plants. Transcription of attA gene was detected by Northern blot analysis in all transgenic plants. Eight selected transgenic lines were propagated and inoculated with a 106 cfu/mL suspension of the pathogen X. axonopodis pv. citri. Compared to control (non-transformed plant), seven transgenic lines showed a significant reduction in susceptibility to citrus canker. The results obtained here indicate the potential use of antibacterial proteins to protect citrus from bacterial diseases.

The development and optimization of efficient transformation protocols is essential in new citrus breeding programs, not only for rootstock, but also for scion improvement. Transgenic Hamlin sweet orange (Citrus sinensis (L.) Osbeck) plants were obtained by Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation of epicotyl segments collected from seedlings germinated in vitro. Factors influencing genetic transformation efficiency were evaluated including seedling incubation conditions, time of inoculation with Agrobacterium and co-culture conditions. Epicotyl segments were adequate explants for transformation, regenerating plants by direct organogenesis. Higher percentage of transformation was obtained with explants collected from seedlings germinated in darkness, transferred to 16 hours photoperiod for 2-3 weeks, and inoculated with Agrobacterium for 15-45 min. The best co-culture condition was the incubation of the explants in darkness, for three days in culture medium supplemented with 100 µM of acetosyringone. Genetic transformation was confirmed by performing ß-glucoronidase (GUS) assays and, subsequently, by PCR amplification for the nptII and GUS genes.Index terms: Citrus sinensis, epicotyls, seedlings, transgenics, breeding methods. Transformação genética de laranja Hamlin via AgrobacteriumResumo O desenvolvimento e otimização de protocolos eficientes de transformação genética é essencial nos programas atuais de melhoramento de citros, tanto para porta-enxertos, como para copas de valor comercial. Plantas transgênicas de laranja Hamlin (Citrus sinensis (L.) Osbeck) foram obtidas pela transformação genética de segmentos de epicótilo, coletados de plântulas germinadas in vitro, com Agrobacterium tumefaciens. Foram avaliados fatores que influenciam a eficiência da transformação genética, como: condições de incubação das plântulas utilizadas para coleta de explantes, tempo de inoculação com Agrobacterium e condições de co-cultivo. A regeneração de plantas a partir de segmentos de epicótilo ocorreu em alta freqüência, por organogênese direta. A maior porcentagem de plantas transgênicas foi obtida utilizando-se explantes coletados de plântulas germinadas no escuro e posteriormente transferidas, por 2-3 semanas, para condições de 16 horas de fotoperíodo, e infectados com Agrobacterium por um período de 15-45 minutos. As melhores condições de co-cultivo foram a incubação dos explantes no escuro, por três dias, em meio de cultura suplementado com 100 µM de acetoseringona. A transformação genética foi confirmada pelo teste histoquímico para ß-glucoronidase (GUS) e, posteriormente, pela amplificação de DNA, por PCR, para detecção dos genes nptII e GUS.Termos para indexação: Citrus sinensis, epicótilo, plântulas, transgênicos, métodos de melhoramento.

O sucesso de técnicas biotecnológicas no melhoramento in vitro de Citrus depende diretamente do desenvolvimento de protocolos eficientes para regeneração de plantas. Objetivou-se avaliar o efeito de concentrações de 6-benzilaminopuria (BAP) na organogênese in vitro de limão-'Cravo' e laranja-'Pêra', bem como o efeito do seccionamento do explante em laranja-'Valência'. Para o limão-'Cravo', foram utilizados como explante, segmentos internodais de plântulas germinadas in vitro, cultivados em meio MT e variando-se as concentrações de BAP em 0; 2,5; 5; 7,5 e 10 mg.L-1. Nas laranjas-'Pêra' e 'Valência' os explantes foram segmentos do epicótilo de plântulas germinadas in vitro. Os explantes de laranja-'Pêra' foram cultivados em meio MT variando-se as concentrações de BAP em 0; 1; 2; 3 e 4 mg.L-1. Para a laranja-'Valência', metade dos explantes foram seccionados e cultivados em meio MT acrescido de 1,0 mg.L-1 de BAP. Todas as brotações obtidas foram alongadas no meio de cultura MT + 25 g.L-1 de sacarose + 1 mg.L-1 de ácido giberélico (GA3) e enraizadas no meio MT + 25 g.L-1 de sacarose + 0,5 g.L-1 de carvão ativado + 1 mg.L-1 de ácido naftaleno acético (ANA). O melhor resultado para o número de brotações adventícias foi obtido na concentração 2,5 mg.L-1 de BAP para limão-'Cravo', e nas concentrações 1,0 e 2,0 mg.L-1 de BAP para laranja-'Pêra'. O seccionamento dos explantes favoreceu a organogênese in vitro da laranja-'Valência', porém as brotações apresentaram menor índice de enraizamento.

RESUMOO presente trabalho foi realizado com o objetivo de avaliar a influência do número de pares de folhas e testar o efeito de diferentes concentrações de AIB (ácido indolbutírico) no enraizamento de estacas semilenhosas de oliveira. O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado, em fatorial 4 x 3, sendo quatro concentrações de AIB (0, 1000, 2000, e 3000 mg L -1 ) e três tipos de estacas (sem folhas, com um par de folhas e com dois pares de folhas). As estacas foram padronizadas com 12 cm de comprimento. Após o preparo inicial, as estacas foram imersas nas soluções de AIB por cinco segundos e, em seguida, colocadas em bandejas de polipropileno contendo o substrato Plantmax ® e transportadas para casa-de-vegetação, com umidade e temperatura controladas, onde permaneceram por 90 dias. As variáveis analisadas foram: porcentagem de estacas enraizadas e brotadas, número de folhas, brotos e raízes emitidas por estaca e comprimento médio das brotações e das raízes. O AIB apenas promoveu influência ao sistema radicular; a concentração de 2000 mg L -1 de AIB promoveu maior enraizamento e a concentração de 3000 mg L -1 de AIB em estacas com dois pares de folhas promoveu melhores resultados para número de raízes por estacas e comprimento médio das raízes; estacas ausentes de folhas favoreceram maior brotação nas estacas.Termos para indexação: propagação, estaquia e AIB. ABSTRACTThe present work was developed with the objective to evaluate the influence of the number of leaves and test the effect of different concentrations of IBA (indolbutyric acid) in the cutting propagation of olive tree. The experimental design was complete randomized, in a two factors arrangement (4 x 3), with four different concentrations of IBA (0, 1000, 2000 and 3000 mg L -1 ) and three different types of cuttings (without leaves, one pair of leaves and two pairs of leaves). The cuttings were padronized with 12 cm of length and treated with IBA for five seconds. After that, they were taken to polysty rene trays filled with Plantmax ® and stayed under house green conditions for 90 days. Rooting and sprouting percentage, number of leaves, sprouts and roots, sprout and root length were evaluated. IBA only influenced the root system; the concentration of 2000 mg L -1 promoted best results for rooting percentage and the concentration of 3000 mg L -1 IBA in cuttings with two pairs of leaves promoted best results for number of roots and root length; cuttings of absent leaves favored larger sprouting in the cuttings.

Resumo -Avaliou-se a produção e o vigor da videira 'Niágara Rosada' sobre os porta-enxertos 'IAC 313', 'IAC 766', 'Kober 5BB', e 'Schwarzmann', no período de 1990 a 1998, em Taubaté, SP. As maiores produções médias foram obtidas quando se utilizaram os porta-enxertos 'IAC 313' e 'IAC 766', totalizando 2,69 kg/planta e 2,59 kg/planta, respectivamente. As produções alcançadas com os porta-enxertos 'Kober 5BB' e 'Schwarzmann' foram, em média, 110% menores que os anteriores, enquanto o 'Traviú' apresentou comportamento intermediário. Os porta-enxertos 'IAC 313' e 'IAC 766' também induziram maior vigor à copa, representado pela maior massa de ramos podados e maior diâmetro das plantas. Para a formação de um vinhedo com 'Niágara Rosada', recomenda-se, para a região, os porta-enxertos 'IAC 313', 'IAC 766' ou 'Traviú'.Termos para indexação: Vitis labrusca, propagação vegetativa, enxertia. Yield and plant vigor of 'Niágara Rosada' grape vine related to the rootstockAbstract -The yield and plant vigor of 'Niágara Rosada' grafted on the 'IAC 313', 'IAC 766', 'Kober 5BB', 'Traviú' (106-8 Mgt) and 'Schwarzmann' rootstocks were evaluated from 1990 to 1998, in Taubaté, SP, Brazil. The highest average yields were obtained on the 'IAC 313' and 'IAC 766' rootstocks, reaching 2.69 kg/plant and 2.59 kg/plant, respectively. Yields on 'Kober 5BB' and 'Schwarzmann' were 110% smaller than on the previous ones, while 'Traviú' showed intermediary behavior. 'IAC 313' and 'IAC 766' also induced higher vigor in the vine, represented by higher mass of pruned branches and higher diameter of plant. 'Niágara Rosada' cultivation in the region is recommended on the 'IAC 313', 'IAC 766' or 'Traviú' rootstocks.Index terms: Vitis labrusca, vegetative propagation, grafting.A relação enxerto/porta-enxerto em viticultura é avaliada por diversas interações e respostas no potencial vegetativo e produtivo das plantas, bem como na qualidade dos frutos (Pastena, 1981). Tem sido verificado que videiras enxertadas apresentam maior produção do que videiras de pé-franco. Segundo Edwards (1988), isto pode ser explicado pelo fato de que os porta-enxertos conferem uma alta densidade de raiz e maior vigor à copa, se comparados ao pé-franco. Além disso, plantas enxertadas antecipam a produção, uma vez que na região em que foi realizada a enxertia ocorre um relativo estrangulamento à passagem de seiva nos dois sentidos, podendo promover aumento na relação carbono/nitrogê-nio na copa (Faust, 1989;Hartmann & Kester, 1990).Atualmente, inúmeras cultivares de porta-enxertos encontram-se disponíveis aos viticultores. Entretanto, cada uma delas apresenta vantagens e defi- IntroduçãoAs condições fundamentais exigidas para um bom porta-enxerto, em viticultura, incluem resistência a filoxera e nematóides, adaptação ao ambiente, facilidade de propagação, afinidade satisfatória com as cultivares copa, e sanidade (Hidalgo, 1993).

RESUMOCom o presente trabalho teve-se como objetivo verificar o enraizamento de estacas de figueira oriundas da desbrota, por meio da utilização de diferentes substratos. Foram coletadas estacas herbáceas de figueira 'Roxo de valinhos', aproximadamente com 10 cm de comprimento, no momento da desbrota da figueira. As estacas com apenas duas folhas e sem gema apical foram acondicionadas em bandejas de polipropileno, contendo diferentes substratos: casca de pinus ® , vermiculita ® , fibra de coco ® , plantmax ® , solo + esterco bovino (1:1 v/v) e tropstrato ® . Posteriormente, as estacas foram colocadas em casa-devegetação, com umidade e temperatura controlada. Após 50 dias, avaliaram-se a porcentagem de estacas enraizadas, brotadas e mortas, número de folhas e raízes emitidas da estaca. Os substratos fibra de coco ® e plantmax ® promoveram melhores resultados. Termos para indexação:Ficus carica L., propagação e estaquia. ABSTRACTThe present work had the objective to verify the rooting of fig tree cuttings originating from sprouting, through the use of different substrates. Herbaceous cuttings were collected of 'Roxo de valinhos' fig tree with 10 cm of length when the sprouting was happening. The cuttings with two leaves and not of the apical bud to conditioned in polypropylene trays containing different substrates: casca de pinus ® , vermiculita ® , coconut fiber ® , plantmax ® , soil + cow mature (1:1 v/v) and tropstrato ® . The cuttings were placed at greenhouse, under humidity and temperature control. After 50 days, the rooting, sprouting and death cutting percentage, the number of leaves and roots of each cutting were evaluated. The substrates coconut fiber ® and plantmax ® promoted better results.

Devido à escassez de trabalhos com o enraizamento de estacas de marmeleiro, realizou-se o presente trabalho com o objetivo de verificar o potencial de enraizamento de estacas de cultivares de marmeleiro. Utilizaram-se estacas lenhosas e lisas coletadas de plantas de marmeleiro 'Radiolo', 'Mendoza Inta-37', 'Much Prolife', 'Pineapple', 'Smyrna', 'De Patras', 'Provencia', 'Van Deman', 'Provance', 'Meliforme', 'Portugal' (Cydonia oblonga) e 'Japonês' (Chaenomelis sinensis L.), sendo estas padronizadas com 20 cm de comprimento. As estacas foram enterradas até a metade do comprimento em canteiro de terra e coberto por tela sombrite 50%, sendo umedecidas diariamente através de regas manuais. Após 75 dias, coletaram-se os seguintes dados biométricos: porcentagem de estacas enraizadas e brotadas, número de folhas e brotos, comprimento da maior raiz, comprimento médio das brotações e número de raízes emitidas por estaca. As cultivares Pineapple, De Patras, Provencia e Mendoza Inta-37 apresentaram maior potencialidade de propagação via estaquia.

Avaliou-se o efeito de várias concentrações e tempos de exposição de dois reguladores de crescimento no enraizamento de estacas de lima ácida `Tahiti' (Citrus latifolia Tanaka). Experimentos complementares também avaliaram a eficiência do enraizamento de estacas de laranjas `Pêra' e `Valencia' (Citrus sinensis L. Osbeck) comparando-a com a da lima ácida `Tahiti'. Os trabalhos experimentais foram conduzidos, em Piracicaba, SP, em câmara de nebulização intermitente, com estacas ponteiro, semi-lenhosas, coletadas 5 meses após a brotação, com 10 cm de comprimento, sem as 3 folhas basais. O delineamento experimental adotado foi o de blocos casualizados com 4 repetições para todos os ensaios realizados. A avaliação dos tratamentos foi realizada 90 dias após a instalação de cada ensaio através da coleta dos seguintes dados biométricos (número médio de raízes/estaca enraizada-NMR, porcentagem de enraizamento-PE, porcentagem de formação de calos-PC, comprimento médio da maior raiz-CMMR e número médio de folhas/estaca enraizada-NMF). Os resultados dos ensaios permitiram as conclusões: a) O enraizamento de estacas de lima ácida `Tahiti' ocorreu com relativa facilidade (PE acima de 50%, podendo chegar a 96%), independentemente da aplicação de reguladores de crescimento; b) Estacas de laranja doce revelaram baixa PE (0,5%), independentemente da utilização de reguladores de crescimento; c) Para cada espécie estudada, não houve diferenças significativas para os parâmetros PC, NMR, CMMR e NMF. Observou-se que a obtenção de mudas de lima ácida `Tahiti' por enraizamento de estacas é um método eficiente e rápido de propagação para essa espécie.