Objective: To evaluate the clinical usefulness of urinary N-acetyl-beta-D-glucosaminidase (NAG) excretion for the detection of early tubular damage in type 2 diabetes mellitus (T2DM). Subjects and methods: Thirty six patients with T2DM were divided into two groups based on urinary albumin to creatinine ratio (ACR): normoalbuminuria (ACR < 30 mg/g; n = 19) and microalbuminuria (ACR = 30-300 mg/g; n = 17). The following parameters were determined in both groups: urinary NAG and albumin, serum and urine creatinine, fasting plasma glucose and glycated hemoglobin (HbA 1c ). Results: Urinary NAG levels [Units/g creatinine; median (range)] were significantly increased in microalbuminuria group [17.0 (5.9 -23.3)] compared to normoalbuminuria group [4.4 (1.5 -9.2)] (P < 0.001). No differences between groups were observed in fasting glucose, HbA 1c , serum creatinine levels and estimated glomerular filtration rates (eGFR). Urinary NAG positively correlated with ACR (r = 0.628; p < 0.0001), while no significant association was observed between NAG and glycemia, HbA 1c , serum creatinine and eGFR. RESUMOObjetivo: Avaliar a utilidade clínica da excreção urinária da N-acetil-beta-D-glucosaminidase (NAG) para a detecção de dano tubular precoce no diabetes melito tipo 2 (DM2). Sujeitos e méto-dos: Foram estudados trinta e seis pacientes com DM2 que se dividiram em dois grupos com base na excreção urinária de albumina (EUA): normoalbuminúrico (EUA < 30 mg/g de creatinina; n = 19) e microalbuminúrico (EUA = 30-300 mg/g de creatinina; n = 17). Em ambos os grupos foram determinados os seguintes parâmetros: NAG e albumina urinária, creatinina sérica e urinária, glicemia de jejum e hemoglobina glicada (HbA 1c ). Resultados: Os níveis de NAG urinária [unidades/g de creatinina; mediana (intervalo interquartílico)] foram significativamente maiores no grupo microalbuminúrico [17,0 (5,9 -23,3)] em comparação com o grupo normoalbuminúrico [4,4 (1,5 -9,2)] (p < 0,001). Não se observaram diferenças significativas entre os dois grupos nos níveis de glicemia de jejum, HbA 1c , creatinina sérica e taxa de filtração glomerular estimada (TFGe). A NAG urinária se correlacionou positivamente com o EUA (r = 0,628, p < 0,0001), não sendo observada associação significativa da NAG com glicemia, HbA 1c , creatinina sérica e TFGe. Conclusões: O aumento da NAG urinária na fase de microalbuminúria da nefropatia diabética (ND) sugere que a disfunção tubular já está presente nesse período. A associação positiva significativa entre a excreção urinária da NAG e EUA indica a possível aplicação clínica da NAG urinária como marcador complementar para a detecção precoce da ND no DM2. Arq Bras Endocrinol Metab. 2014;58(8):798-801 Descritores Nefropatia diabética; diabetes melito tipo
The results show that tobacco alters sperm concentration and morphology with an increase of immature forms, demonstrating an altered spermatogenesis process. The consumption of tobacco should be evaluated to carry out the integral study of infertile man.
Foi desenvolvido e validado um ELISA tipo sanduíche "in house" para a quantificação de anticorpos (Ac) anti-anexina V em plasma. Os parâmetros de validação estudados foram: (i) precisão, expressado como coeficiente de variação (CV) inter-e intra-ensaio, (ii) exatidão, expressado como porcentagem de desvio entre o valor obtido e o valor real, (iii) limite de detecção (LOD), avaliado a partir do branco de reagentes e (iv) robusteza, obtida através da introdução propositada de pequenas variações em diferentes parâmetros. Além disso, a técnica "in house" foi comparada com um método comercial. Encontrou-se que ambos CV foram < 20%, a exatidão foi de 100 ± 20%, o limite de detecção foi menor que 1 U mL -1 e as pequenas variações na técnica não produziram variações significativas nos resultados. A comparação com o método comercial mostrou uma correlação aceitável. Concluiu-se que o método desenvolvido cumpre satisfatoriamente com os parâmetros de padronização e validação para imuno-análise.An "in house" sandwich ELISA for the quantification of plasma anti-annexin V antibodies was developed and validated. The validation parameters studied were: (i) precision, expressed either as the intra-or the inter-assay coefficient of variation (CV), (ii) exactitude, expressed as the percentage deviation between the obtained value and the real value, (iii) limit of detection (LOD), evaluated from the reagents blank and (iv) robustness, obtained by deliberately introducing slight variations in different parameters. Also, a comparison between the "in house" technique and a commercial method was performed. The research revealed that both CV were < 20%, exactitude was within the 100 ± 20% range, limit of detection was below 1 U mL -1 and that slight variations in the technique did not produce any significant variations in the results. Comparison with the commercial method showed an acceptable correlation. It was concluded that the method developed here satisfactorily accomplishes the parameters of standardization and validation for an immunoassay.Keywords: ELISA, annexin V, antibodies, anti-phospholipid syndrome, foetal losses IntroductionAnnexins belong to a family of proteins that are able to bind to negatively charged phospholipids and membrane bilayers through calcium dependent interactions. Though their fine structure has been well described, their functions have not been clearly identified yet.1 Like others, annexins constitute a group of ubiquitous cytoplasmic proteins involved in signal transduction. 2Annexin V is a 320-amino acid-residue, 36-kDa-protein that is folded into a planar cyclic arrangement of four repeats with each repeat composed of five alpha-helical segments. 3,4 It is expressed in various cell types, including placental trophoblasts and vascular endothelial cells. This protein is highly expressed in an apparently constitutive manner by placental trophoblasts and is displayed Quantification of Autoantibodies to Annexin V in Plasma by an "In House" Sandwich ELISA J. Braz. Chem. Soc. 454 on the apical membrane o...
La patogenesi dell'ulcera duodenale ha subito negli ultimi anni una serie di innovazioni in campo eziologico grazie allo sviluppo di nuove tecniche diagnostiche in grado di accertare la presenza dell'Helicobacter pylori nella mucosa gastroduodenale. Tali esami forniscono al paziente una migliore accuratezza e specificità nella risposta unite ad una minore invasività dell'indagine. La precocità della diagnosi porta ad una più rapida eradicazione dell'infezione con la prevenzione di eventuali danni da ulcera gastrica, ulcera duodenale, atrofia e non ultimo con la prevenzione dell'evoluzione in carcinoma. In ceppi ureasi negativi di Hp si verifica la produzione di una citotossina vacuolizzante, la vacA, e si è dimostrato che la produzione di questa tossina si associa alla presenza di una proteina chiamata CagA. Studi successivi hanno dimostrato come la causa diretta del danno gastrico sia da attribuirsi alla tossina vacA mentre la capacità di discernere facilmente nel siero i ceppi producenti tale tossina sia da attribuirsi alla proteina CagA ad essa associata ed avente alto potere immunogeno. Se la positività per Hp incrementa di quasi 3 volte la probabilità di cancro gastrico, la positività in questi soggetti per anticorpi contro un antigene di circa 120 kD (proteina CagA) ne aumenta il rischio sino ad una probabilità 6 volte maggiore. Visto il notevole incremento di richieste per anticorpi anti Hp presso il nostro laboratorio abbiamo voluto valutare in quale percentuale tra sieri Hp positivi si trovassero ceppi che esprimevano la proteina CagA su di una popolazione tipo (studio di prevalenza). Lo studio è stato effettuato solo sui sieri dei pazienti che mostravano una netta e massimale positività per la presenza di anticorpi anti Hp. Per la ricerca di entrambe gli anticorpi (anti Hp ed anti CagA) nel nostro laboratorio abbiamo utilizzato metodiche EIA applicate su apparecchio automatico. Una percentuale di questi pazienti è stata, inoltre, da noi studiata anche per la ricerca dell'antigene Hp nelle feci ottenendo risultati che ci hanno consentito di valutare l'affidabilità dei tests rispetto alla prognosi della malattia. M044 STREPTOCOCCO ß-EMOLITICO DI GRUPPO B: UN ANNO DI ESPERIENZA PRESSO IL NOSTRO LABORATORIO. DATI PRELIMINARI.Fianchino B., Del Re S., Faraoni S., Castelli L., De Paola M., Gregori G., Sergi G., Abozzi M.P., Milano R. Dipartimento di Diagnostica di Laboratorio, U.O. Microbiologia, Ospedale Amedeo di Savoia, TorinoLo Streptococco ß-emolitico di gruppo B (GBS) è uno dei principali agenti di infezione neonatale.Approssimativamente il 10-30% delle donne in gravidanza risulta essere colonizzata a livello vaginale e/o rettale da questo microrganismo. L'infezione nel neonato viene acquisita per contatto diretto durante il passaggio attraverso il canale del parto. Allo scopo di identificare le donne eventualmente colonizzate e candidate alla profilassi intrapartum, è quindi importante effettuare uno screening tra la 35-37ma settimana di gestazione. Scopo del lavoro Abbiamo voluto valutare la frequenza...
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