Rapid Simultaneous Quantification of Zearalenone and Fumonisin B1 in Corn and Wheat by Lateral Flow Dual Immunoassay

Abstract

A lateral flow dual immunoassay (LFDIA) was developed for rapid quantitative detection of zearalenone (ZEN) and fumonisin B1 (FB1) in corn and wheat samples on a single test strip. Two test lines and the control line on the nitrocellulose membrane were coated with ZEN and FB1 conjugates and goat anti-mouse IgG, respectively. Colloidal gold nanoparticles were conjugated with monoclonal antibodies against ZEN or FB1. The intensity of the test lines was analyzed by a photometric strip reader to determine the concentrations of ZEN and FB1 based on the calibration curves of known concentrations versus intensity readings. Test parameters such as types of buffers, ratio of the two gold-labeled antibodies, and dilution of the sample extracts and the gold-labeled antibodies were optimized. The detection limit was 0.35 and 5.23 ng/mL for ZEN and FB1, respectively, and the corresponding detection ranges were 0.94-7.52 and 9.34-100.45 ng/mL, respectively. Spiked and natural samples were analyzed using both LFDIA and liquid chromatography-tandem mass spectrometry. The two methods had a good correlation (R(2) = 0.96). The dual quantitative LFDIA is sensitive, rapid, and easy-to-use for on-site testing of a large number of samples.

Métodos imunológicos para a detecção de fungos toxigênicos e micotoxinas em grãos, alimentos e rações

“…A imunocromatografia é um método rápido que fornece resultados em 5 a 15 minutos e é utilizada para a detecção qualitativa de micotoxinas principalmente na triagem de amostras. Recentemente, porém, foram descritos métodos imunocromatográficos semiquantitativos e quantitativos para a análise de micotoxinas em cereais 27,28 .…”

“…Alguns métodos imunocromatográficos foram desenvolvidos para a triagem rápida da contaminação por fumonisinas em cereais 27,28,168,169 .…”

Rapid testing methods for food contaminants and toxicants

“…For samples that test positive for pesticide residues, there is no color developed at the test line. Successful applications of the test strip have been developed for simultaneous detection of AFB1, OTA , ZEA and fumonisin B1, ZEN by Tang's and Sun's group, respectively (Li et al 2013;Wang et al 2013).…”

Teste Imunocromatográfico De Fluxo Lateral: Uma Ferramenta Rápida De Diagnóstico

“…Estudos mostram a utilização do teste rápido em formato multiplex para detecção de diferentes tipos de papilomavirus humano (XIU et al, 2014), aflatoxina B1, zearalenona, desoxinivalenol em cereais , zearalenona e fumonisina B1 (WANG et al, 2013), detecção de diferentes sorogrupos de Escherichia coli produtora de toxina shiga (YONEKITA et al, 2013). A detecção de mais de um alvo em um único teste é a vantagem deste formato, porém é necessária uma padronização da técnica visando adequada quantidade de conjugado para que este seja consumido no decorrer do teste.…”