Purification and Characterization of Superoxide Dismutase from Martianus Dermestoides Chevrola

Abstract

In this paper, the superoxide dismutase fromMartianus dermestoidesis purified by the following methods: heat treatment, polyethylene concentration, Sephadex G-75 gel filtration, and DEAE-Sepharose FF ion exchange chromatography. The result shows that the purification multiple is 3.86, the activation yield is 21.89% and the specific activation of the enzyme is 447.6 U/mg. The purified SOD appears to be a sole protein on SDS-PAGE and the molecular weight is estimated to be 40.58 kDa. H2O2can obviously inhibit the enzyme activation and CHCl3-CH3CH2OH only demonstrates basically no inhibitory effect. The type of the dermestoides SOD might be Cu/Zn-SOD. After purification, some enzymatic characterizations of the SOD are studied. The optimum reaction temperature of purified SOD is 50°C. The optimum reaction pH value of purification is 6. The dermestoide SOD has a preferable stability below 50°C and at pH values between 5-8.

Caracterización bioquímica de extractos acuosos de ulomoides dermestoides (coleoptera, tenebrionidae): exploración de la inhibición dual de la lipoxigenasa (15-lox) y ciclooxigenasas (cox-1 y cox-2)

“…Santos et al en 2010 (16), utilizaron PBS para obtener extractos acuosos de U. dermestoides, usando una relación de 1g de escarabajos por 2 mL de tampón y un tiempo de extracción de 2 min; estos extractos fueron utilizados para evaluar la actividad anti-inflamatoria en ratas y el efecto inmunomodulador en cultivos de células polimorfonucleares (PMN). También se describió un método para extraer la enzima superóxidodismutasa (SOD) desde el escarabajo adulto, el cual incluyó la pulverización de los escarabajos en nitrógeno líquido, seguido de extracción con solución de NaCl 0,13M, usando una relación de 1g de escarabajo por 13 mL de solución y tiempo de extracción de 14h (24,25). A diferencia de estos trabajos, la metodología presentada en nuestro estudio incluye un paso previo de deslipidación de los escarabajos, así como la adición de un detergente a la composición de los tampones de extracción; como resultado, se observó que la adición de SDS 0,1% al tampón PBS incrementó, en aproximadamente el doble, la cantidad de proteína soluble obtenida, este resultado fue atribuido a la propiedad del SDS para solubilizar proteínas asociadas a membranas o que hacen parte de otras estructuras complejas (26).…”

Extraction of SOD from Alfalfa with Ultrasonic Assisted

“…Qiang Zhang and others have extracted the purified Fe-SOD from fresh plantain by two-step column chromatography [4]. In addition, there are three types Fe-SOD, Mn-SOD and Cu/Zn-SOD have been identified by ultrasonic assisted extraction from cranberry [5]. However, there is no record in the application of extracting SOD form Alfalfa (Medicago sativa, L.) which is known as the "king of the grass".…”