Platelet activation: ultrastructure and morphometry in platelet-rich plasma of horses

Abstract

<jats:p>This study was conducted to investigate the activation ability of the platelet-rich plasma (PRP) by pharmacological agents, as well as to verify the need or not of this activation for therapeutic use. The PRP was obtained from four healthy crossbred geldings aged 13 to 16 years (15±1years), and was processed for observation and quantification of the platelet morphology by using the transmission electron microscopy. All PRP samples were activated with 10% calcium chloride (CaCl2) solution, pure bovine thrombin or associated with CaCl2. The control (pure PRP) was not pharmacologically activated. In the pure PRP samples, 49% of the platelets were classified as state of activation uncertain, 41% as resting, 9% as fully activated and 1% as irreversibly damaged. Treatment with 10% CaCl2 provided a distribution of 54% platelets in state of activation uncertain, 24% as fully activated, 20% as resting, and 2% as irreversibly damaged. The platelet morphology of the bovine thrombin treated samples did not fit into classification adopted, as showing irregular shape with emission of large filamentous pseudopods, appearance of ruptured and whole granules in the remaining cytoplasm and extracellular environment. There was effect of the treatment on the platelet morphology (P=0.03). The 10% CaCl2 is an adequate platelet-activating agent. However, in cases the use of PRP under its liquid form is necessary, the use of pure PRP is recommended, since besides presenting an adequate percentage of fully activated platelets it also has significant amount of the resting type, which can be activated by substances found in the injured tissue.</jats:p>

Plasma rico em plaquetas autólogas na cicatrização do tendão do músculo gastrocnêmio de coelhos

“…Com dupla centrifugação, Nagata et al (2010) relataram a obtenção de maiores concentrações plaquetárias do que com uma única centrifugação e este procedimento foi o adotado no presente trabalho Os animais apresentaram a concentração média de 232.284 plaquetas/µL no sangue total e média de 490.644 plaquetas/µL que foram quantificadas no PRP, com taxa de enriquecimento plaquetário de 110,73%, com aumento de 2,10 vezes a concentração total de plaquetas no PRP em relação ao sangue total. Os valores de plaquetas encontrados no PRP foram semelhantes aos obtidos por Zandim et al (2012) em equinos, de 500.000 plaquetas/µL, e Andrade (2014) em coelhos, de 370.484 plaquetas/µL.…”

Uso do soro autólogo condicionado e do plasma rico em plaquetas na terapia ortopédica de equinos

“…O estudo mais recente publicado sobre ativação ou não de plaquetas de equinos, comparou a porcentagem de plaquetas totalmente ativadas, com ativação incerta, em repouso ou com dano irreversível em amostras de PRP puro, PRP ativado com cloreto de cálcio (CaCl 2 ) (10%) ou ativado com trombina bovina (ZANDIM et al, 2012). Nesse estudo, concluiu-se que no PRP ativado com CaCl 2 existe a maior quantidade de plaquetas ativadas (24%) em relação ao PRP puro (9%), e nas amostras tratadas com trombina bovina, houve grande porcentagem de plaquetas com dano irreversível.…”

“…Ao mesmo tempo em que os neutrófilos liberam citocinas pró-inflamatórias IL-1, TNF-α, IL-6, MMP-8, MMP-9 e espécies reativas de oxigênio (EROs) que podem exacerbar o dano inicial (ANITUA et al, 2004;ZANDIM et al, 2012) Alguns autores ressaltam na descrição de seus produtos que eles são pobres em leucócitos (PRP pobre em leucócitos) ou que tiveram os leucócitos filtrados. Contudo, é possível que um efeito positivo ou negativo não possa ser generalizado para todos os tecidos e todas as condições clínicas (ARNOCZKY; DELOS; RODEO, 2011), sendo imperativa a avaliação de cada caso em particular.…”

Resposta ao uso intra-articular do plasma rico em plaquetas em equinos hígidos: aspectos clínicos, laboratoriais e ultrassonográficos

“…Estudos são controversos quando da indicação de manter ou não os leucócitos no concentrado de plaquetas. Ao mesmo tempo em que os neutrófilos liberam citocinas pró-inflamatórias IL-1, TNF-α, IL-6, MMP 8 e 9 e espécies reativas de oxigênio que podem exacerbar o dano inicial (ANITUA et al, 2007;ZANDIM et al, 2012), as células brancas também aumentam a concentração de fatores de crescimento no concentrado de plaquetas (ZIMMERAMNN et al, 2008) e podem ter um efeito antibiótico, com benefício terapêutico (MOOJEN et al, 2008;CIESLIK-BIELECKA et al, 2009).…”

“…Os menores valores de AH foram encontrados as três, seis e 168 horas no grupo PRP, que pode indicar catabolismo articular (MCILWRAITH, 2005), não havendo diferença entre os grupos, e entre os momentos do grupo SF. Anabolismo articular e aumento na produção de AH foram encontrados por Akeda et al (2006) em cultivo in vitro de condrócitos de suínos e Anitua et al (2007) ;GOLD, 2012;WATANABE et al, 2012;BEITINGER et al, 2013) ou a uma possível neovascularização induzida por fatores de crescimento derivados de plaquetas (ZANDIM et al;2012;XIE et al, 2013 12 ). Para certificar-se qua a neovascularização ocorreu devido à presença de fatores de crescimento, seria interessante dosar os fatores angiogênicos.…”