Optimisation and validation of a quantitative and confirmatory LC-MS method for multi-residue analyses of β-lactam and tetracycline antibiotics in bovine muscle

Abstract

A multi-residue method for the determination of the β-lactam antibiotics ampicillin, cefazolin, cloxacillin, dicloxacillin, nafcillin, oxacillin, penicillin G, penicillin V and the tetracyclines chlotetracycline, tetracycline and oxytetracycline was optimised and validated in bovine muscle. The method is based on the extraction of the residues from muscle using water/acetonitrile (2/8, v/v) with subsequent use of dispersive solid-phase C18 and hexane for purification. Extracts were analysed using ultra-performance liquid chromatography (UPLC-MS/MS) coupled with the mass spectrometer in positive electrospray ionisation mode (ESI+) for all analytes. The method was validated according to the requirements of European Commission Decision 2002/657/EC. The validation results were obtained within the MRL range of 0-1.5 of the MRL, with recoveries varying from 90% to 110% and CV < 20% (n = 54), except for cloxacillin, dicloxacillin and nafcillin. However, matrix interference was observed. The decision limit (CCα) ranged from 10% to 15% of the MRL. The uncertainty measurement was estimated based on both bottom-up and top-down strategies and the uncertainty values were found to be lower than 20% of the MRL. The method has a simple extraction procedure whereby analytes are separated with reasonable resolutions in a single 11-min chromatographic run. According to the validation results, this method is suitable for monitoring β-lactams and tetracyclines according to National Program for Residue and Contaminant Control - Brazil (NPRC-Brazil) in bovine muscle.

Resíduos de medicamentos veterinários em leite e ovos

“…A eritromicina é um antibiótico desse grupo, cujo mecanismo de ação consiste na inibição da síntese protéica pela ligação à porção 50S dos ribossomos bacterianos. 7,18 Os aminoglicosídeos, como a estreptomicina, são antibióticos de amplo espectro, utilizados principalmente contra bactérias gram-negativas, atuando também na inibição da síntese protéica. 31 O cloranfenicol é um antibiótico de amplo espectro da classe dos anfenicóis, com atividade contra bactérias gram-positivas e gram-negativas e outros grupos de microrganismos.…”

“…O preparo de amostra pode ser a etapa mais laboriosa de um método multirresíduo, e diferentes estratégias têm sido utilizadas para extrair os resíduos e realizar o clean-up da amostra. 52 As técnicas mais empregadas para matrizes de origem animal são a extração líquido-líquido (ELL), 22 extração em fase sólida (EFS), 53 extração em fase sólida dispersiva (EFSdispersivo), 18 dispersão de matriz em fase sólida (DMFS), 31 extração líquido-líquido com purificação em baixa temperatura (ELL-PBT), 54,55 extração líquido-líquido com rápida partição à baixa temperatura (ELL-RPBT), 56,57 e o método QuEChERS (do inglês Quick, Easy, Cheap, Effective, Rugged and Safe). 58 A Tabela 1 mostra alguns trabalhos publicados nos últimos anos na análise de resíduos de medicamentos veterinários em amostras de leite, ovos e outras matrizes.…”

“…Recentemente, estudos foram publicados reportando dados relativos a resíduos de medicamentos veterinários no âmbito do PNCRC em produtos cárneos, [15][16][17][18][19] peixe, 20 mel 20,21 e leite. 18,22 A presente revisão tem como foco os resíduos de medicamentos veterinários em leite e ovos, alimentos de grande importância para o mercado interno e consumidor brasileiro.…”

“…18,22 A presente revisão tem como foco os resíduos de medicamentos veterinários em leite e ovos, alimentos de grande importância para o mercado interno e consumidor brasileiro.…”

“…O Plano Nacional de Controle de Resíduos e Contaminantes (PNCRC) é coordenado pelo Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento (MAPA) e inclui programas setoriais para análise de carne, leite, ovos, mel e pescado. O Programa de Análise de Resíduos de Medicamentos Veterinários em Alimentos (PAMVet), da Agência Nacional de Vigilância Sanitária (ANVISA), analisa leite UHT, leite em pó e leite pasteurizado.Recentemente, estudos foram publicados reportando dados relativos a resíduos de medicamentos veterinários no âmbito do PNCRC em produtos cárneos, [15][16][17][18][19] peixe, 20 mel 20,21 e leite. 18,22 A presente revisão tem como foco os resíduos de medicamentos veterinários em leite e ovos, alimentos de grande importância para o mercado interno e consumidor brasileiro.…”