Introdução: O portfólio é uma metodologia de ensino e aprendizagem ativa que reúne os trabalhos realizados durante uma disciplina, visando desenvolver a criticidade e reflexão a partir da prática. Baseado na comunicação dialógica, promove a autonomia e tomada de decisão do estudante, devido ser uma ferramenta estruturada que permite observar os desafios da prática da área de atuação com a capacidade de transformar a dinâmica de aprendizagem. No entanto, evidencia-se a carência de literatura científica que descrevem sua utilização no ensino de Enfermagem. Objetivo: Relatar o uso do portfólio como estratégia de ensino-aprendizagem na graduação em enfermagem. Métodos: Trata-se de um relato de experiência sobre o uso do portfólio na Graduação em Enfermagem da Faculdade de Ciências da Saúde Moinhos de Vento como instrumento avaliativo. A metodologia foi utilizada em duas disciplinas: Assistência de Enfermagem Materno-Infantil e Assistência de Enfermagem ao Paciente Cirúrgico. Em ambas as disciplinas, foi solicitado a construção de portfólios para registro e reflexão sobre as competências trabalhadas em atividades práticas no hospital. Os estudantes receberam as orientações sobre o uso da metodologia em sala de aula e roteiro com pontos a serem observados na prática. Resultados: Na experiência realizada no segundo semestre de 2021, 12 alunos da disciplina assistência de enfermagem materno-infantil e 25 da disciplina de assistência de enfermagem ao paciente cirúrgico foram divididos em grupos de até seis integrantes e realizaram cerca de cinco aulas práticas no hospital em diferentes unidades. Os alunos fizeram observações e registros individualmente a cada dia de prática e entregaram portfólios completos ao final das disciplinas, que foram avaliados e compuseram parte da nota final das disciplinas. Os softwares mais utilizados foram o Microsoft Word e o Canva. A maioria dos estudantes entregou trabalhos de alta qualidade e demonstrou grande dedicação e criatividade, com reflexões críticas e pontos a serem aperfeiçoados. Conclusão: O portfólio mostrou-se uma ferramenta pedagógica eficiente para o desenvolvimento de competências profissionais dos estudantes de Enfermagem. Esta metodologia contribuiu para que os estudantes direcionassem sua atenção a pontos específicos das áreas práticas, sendo reflexivos e críticos diante das suas vivências. Além disso, trata-se de uma ferramenta de fácil aplicabilidade e que possibilita ao docente o acompanhamento do desenvolvimento dos seus objetivos de aprendizagem nas disciplinas específicas da Enfermagem.