Nova técnica para contagem do número de células de blastocistos

Costa, Eduardo Paulino da; Lopes, F. G.; Pereira, E. C. M.; Queiroz, V.L.D.; Macedo, Gustavo Guerino; Neto, João Roberto; Costa, A. H. A.

doi:10.1590/s0102-09352010000600032

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“…Das 50 lâminas citológicas coradas com Panótico 47 (96%) apresentaram qualidade de leitura boa ou regular, sendo que apenas 34 (68%) lâminas coradas com Giemsa receberam a mesma classificação (p<0,05). Resultados semelhantes foram obtidos por Costa et al, 16 que observaram melhor qualidade e nitidez de coloração com Panótico Rápido em relação ao Giemsa para contagem do número de blastocistos de embriões murinos. De acordo com o mesmo estudo o corante Panótico confere maior agilidade na confecção das laminas, melhor nitidez de visualização das células embrionárias e menor tempo de exposição ao corante.…”

Section: Discussionunclassified

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2016

R. Saúde

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Os corantes Panótico Rápido e Giemsa são frequentemente utilizados para a avaliação de células de linhagem espermatogênica, porém nenhuma destas colorações foi desenvolvida especificamente para o processamento tintorial desse tipo celular. Como até presente não existe consenso na literatura sobre qual das técnicas de coloração permite a melhor visualização das células germinativas testiculares, o objetivo deste estudo foi determinar a melhor coloração para esfregaços obtidos por punção biópsia aspirativa testicular (PBA) de bovinos. Foram selecionados 25 machos bovinos adultos, que sofreram PBAs em ambos os testículos (n=50 punções biópsia aspirativas, perfazendo um total de 100 esfregaços testiculares). O conteúdo de cada PBA foi utilizado para a confecção de no mínimo 2 esfregaços em lâminas foscas de vidro que posteriormente foram corados utilizando dois métodos distintos: Panótico Rápido (G1, n=50 esfregaços) ou Giemsa (G2, n=50). Para avaliação da qualidade dos esfregaços as células da linhagem espermatogênica foram contabilizadas e comparadas entre os dois grupos experimentais. A facilidade e nitidez de visualização proporcionada por cada uma das técnicas foi comparada atribuindo-se uma nota de 1 a 3 (1: ruim; 2: regular; 3: boa). A coloração Panótico Rápido permitiu a identificação de maior quantidade de espermatócitos secundários (p=0,0042) e células inflamatórias (p=0,0318), apresentando ainda efeito significativo sobre a qualidade de leitura dos esfregaços (p=0,0087). Embora ambas as colorações permitam a identificação e visualização das estruturas da linhagem espermatogênica, o Panótico Rápido permitiu melhor visualização e avaliação das células testiculares.

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Section: Discussionunclassified

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2016

R. Saúde

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“…Mori et al (2002) and Hoelker et al (2006) reported a positive correlation between the total number of cells and diameter of bovine embryos produced in vitro. Thus, the total number of cells is frequently used as a parameter to evaluate the quality of embryos (Viuff et al, 2001;Pereira et al, 2005;Costa et al, 2010).…”

Section: Introductionmentioning

confidence: 99%

Use of two new formulations as bovine embryo manipulation solution

et al. 2019

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This study aimed to evaluate the effect of two Embryo Manipulation Solutions (EMS and EMS supplemented) in maintenance of the viability of embryos, initially using structures derived from mice (first phase). Next, the efficiency of these solutions in routines of bovine embryo transfer was evaluated (second stage). Mice embryos were used in the stages of early blastocyst, and compact morula grades I and II. These embryos were initially randomly distributed and maintained for four hours in three solutions: Modified phosphate buffered saline (PBS; Control); EMS (treatment 1), and EMS supplemented (treatment 2). Subsequently, they were cultured in TCM 199 medium and evaluated in terms of total number of cells, morphometric characteristics, ultra structural aspects, detection of cell apoptosis, and quantification of Hsp70.3 gene expression. In the second phase, these same solutions were tested in the transfer of quality I and II bovine embryos (excellent and good). These embryos were transferred fresh to 58 recipients. The results showed that the total number of cells in embryos expanded blastocyst (ExB), the number of apoptotic cells, the cell, nuclear, nucleolar diameter and the nucleus/nucleolus ratio was similar among the treatments. The pregnancy rate shown on second phase was also similar. However, the EMS supplemented expressed more Hsp70.3 than EMS. The expression of Hsp70.3 was also greater for embryos in EMS than that of EMS supplemented. The McII embryos, EMS and EMS supplemented samples also expressed more Hsp70.3 compared to control embryos. In conclusion, the tested solutions can be used in routine embryo transfer techniques, replacing modified PBS solution as an effective media in maintaining embryo viability.

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