Ix.—The Sudan Black B Technique in Cytology

Gatenby, J. Bronté; Moussa, Tohamy A.

doi:10.1111/j.1365-2818.1949.tb00965.x

Cited by 14 publications

(6 citation statements)

References 2 publications

Supporting

Mentioning

Contrasting

Unclassified

Order By: Relevance

“…Combining the protocols of Gatenby et al . [ 17 ], and Rasmussen, [ 18 ] for SBB staining, we achieved optimal lipofuscin visualization in cell cultures and tissues with the following methodology: Preparation of SBB solution: 0.7gr of SBB (BDH, Vizas, Athens, Greece) was dissolved in 70% ethanol, covered with parafilm and thoroughly stirred overnight at room temperature. Filtered through filter paper and then filtered again through frittered glass filter of medium porosity with suction.…”

Section: Methodsmentioning

confidence: 99%

“…It is considered a hallmark of aging and is also involved in the pathogenesis of certain age related pathologies such as macular degeneration [ 16 ]. Sudan Black B (SBB) is a lipophilic histochemical stain that identifies lipofuscin and is applicable for in vitro and in situ studies [ 17 - 19 ]. Here we employed SBB in a series of experiments designed to demonstrate that lipofuscin accumulates in vitro in normal human cells during RS or SIPS, as well as in stressed human cancer cells.…”

Section: Introductionmentioning

confidence: 99%

See 1 more Smart Citation

Specific lipofuscin staining as a novel biomarker to detect replicative and stress-induced senescence. A method applicable in cryo-preserved and archival tissues

Georgakopoulou

Tsimaratou²,

Evangelou³

et al. 2012

Aging

298

230

View full text Add to dashboard Cite

There is shortage of extensive clinicopathologic studies of cellular senescence because the most reliable senescence biomarker, the detection of Senescence-Associated-beta-galactosidase activity (SA-β-gal), is inapplicable in archival material and requires snap-frozen tissues. We validated the histochemical Sudan-Black-B (SBB) specific stain of lipofuscin, an aggregate of oxidized proteins, lipids and metals, known to accumulate in aged tissues, as an additional reliable approach to detect senescent cells independently of sample preparation. We analyzed cellular systems in which senescence was triggered by replicative exhaustion or stressful stimuli, conditional knock-in mice producing precancerous lesions exhibiting senescence, and human preneoplastic lesions known to contain senescent cells. In the above settings we demonstrated co-localization of lipofuscin and SA-β-gal in senescent cells in vitro and in vivo (cryo-preserved tissue), strongly supporting the candidacy of lipofuscin for a biomarker of cellular senescence. Furthermore, cryo-preserved tissues positive for SA-β-gal were formalin-fixed, paraffin-embedded, and stained with SBB. The corresponding SA-β-gal positive tissue areas stained specifically for lipofuscin by SBB, whereas tissues negative for SA-β-gal were lipofuscin negative, validating the sensitivity and specificity of the SBB staining to visualize senescent cells in archival material. The latter unique property of SBB could be exploited in research on widely available retrospective tissue material.

show abstract

Section: Methodsmentioning

confidence: 99%

Section: Introductionmentioning

confidence: 99%

Specific lipofuscin staining as a novel biomarker to detect replicative and stress-induced senescence. A method applicable in cryo-preserved and archival tissues

Georgakopoulou

Tsimaratou²,

Evangelou³

et al. 2012

Aging

298

230

View full text Add to dashboard Cite

show abstract

“…Το Sudan Black B (SBB) είναι μία λιπόφιλη χημική ένωση, η οποία αναγνωρίζει τη λιποφουσκίνη. Διαλύεται σε αιθανόλη και μπορεί να εφαρμοστεί με ιστοχημική χρώση και να χρησιμοποιηθεί σε in vitro και in situ μελέτες (Gatenby and Moussa, 1949;Rasmussen, 1961;Jung, Höhn and Grune, 2010). Λόγω της λιπόφιλης φύσης της ένωσης αυτής, όταν έρχεται σε επαφή με λιπίδια, συνδέεται πάνω στην λιπιδική επιφάνεια, καθώς είναι περισσότερο διαλυτό στα λιπίδια παρά σε αιθανόλη.…”

Section: Xρώση με το χημικό αντιδραστήριο Sudan Black Bunclassified

Ανάπτυξη, εφαρμογή και αξιολόγηση χημικών αναλόγων του Sudan Black B στην ανθρώπινη νόσο

Ρίζου¹

View full text Add to dashboard Cite

Η κυτταρική γήρανση αποτελεί το στάδιο της μη αναστρέψιμης, στις περισσότερες περιπτώσεις, διακοπής της κυτταρικής ανάπτυξης, στην οποία το κύτταρο παραμένει μεταβολικά ενεργό. Εμπλέκεται στην εμβρυϊκή ανάπτυξη, σε φυσιολογικές καταστάσεις, στο γήρας (aging), καθώς και σε παθολογικές καταστάσεις. Η συνεισφορά της μπορεί να είναι θετική, όπως στην περίπτωση της επούλωσης πληγής, ή να έχει αρνητικά αποτελέσματα, όπως στην περίπτωση της σαρκοπενίας. Η γήρανση είναι εξίσου σημαντική, καθώς αποτελεί φραγμό της καρκινογένεσης. Αν, όμως, συνεχιστεί η βλάβη του ιστού και γίνει μειωμένη προσέλκυση των μακροφάγων, τότε η γήρανση παύει να αναστέλλει την ανάπτυξη του αδενώματος και δημιουργεί ένα περιβάλλον ευνοϊκό για την ανάπτυξη του όγκου. Μέχρι σήμερα, ο δείκτης που χρησιμοποιείται για τον εντοπισμό της γήρανσης, είναι ο SA β-gal. Ο δείκτης αυτός, όμως, παρουσιάζει πολλά μειονεκτήματα, με αποτέλεσμα να γίνεται όλο και πιο δύσκολη η μελέτη της γήρανσης στα διάφορα κυτταρικά συστήματα. Πρόσφατα ανακαλύφθηκε μία πιο βελτιωμένη, και με ευρεία εφαρμογή, νέα τεχνική ανίχνευσης των γηρασμένων κυττάρων, που βασίζεται στην χρώση με Sudan Black B (SBB), η οποία με την σειρά της έχει κάποιες τεχνικές προκλήσεις. Υπήρξε, λοιπόν, η ανάγκη για την σύνθεση νέων χημικών ενώσεων, οι οποίες εντοπίζουν τη λιποφουσκίνη, και επομένως τα γηρασμένα κύτταρα. Οι ενώσεις, αυτές, δοκιμάστηκαν σε συστήματα αναφοράς για τη γήρανση και το αποτέλεσμα ήταν ενθαρρυντικό. Το νέο χημικό ανάλογο του SBB, το οποίο ονομάζεται GL13 δεσμεύεται ειδικά και με ευαισθησία με τη λιποφουσκίνη. Χρησιμοποιώντας το αντιδραστήριο GL13 αναπτύξαμε μία υβριδική ιστοχημική-ανοσοϊστοχημική μέθοδο και δείξαμε ότι η συσσώρευση λιποφουσκίνης αποτελεί ορόσημο της γήρανσης σε μεγάλη ποικιλία βιολογικών δειγμάτων. Κατά τη διάρκεια της διδακτορικής διατριβής εξετάστηκε, επίσης, το φαινόμενο της κυτταρικής γήρανσης στον ορό του αίματος υγειών και ασθενών ατόμων, μετρώντας τα επίπεδα της λιποφουσκίνης. Οι υγιείς ταξινομήθηκαν σε δύο κατηγορίες ανάλογα με την ηλικία, ενώ οι ασθενείς ταξινομήθηκαν ανάλογα με την ασθένεια από την οποία πάσχουν. Οι ασθένειες που εξετάσθηκαν είναι η καρδιακή ανεπάρκεια, η ρευματοειδής αρθρίτιδα, ο καρκίνος και οι νευροεκφυλιστικές παθήσεις. Βασική ιδέα αυτών των πειραμάτων είναι να ερευνήσουμε αν τα επίπεδα της ελεύθερης λιποφουσκίνης στον ορό διαφοροποιούνται ανάλογα με την ηλικία και σε τι ποσοστό, καθώς επίσης, αν αυτά τα επίπεδα αλλάζουν σε κάποιες ασθένειες, αποτελώντας, ίσως, μελλοντικό προγνωστικό δείκτη.

show abstract

“…Lipofuscin stained with SBB is applicable for in vitro measurements. 119,120,183 Studies demonstrated that SBB-stained lipofuscin is present in cells that expressed SA-β-Gal activity and is absent in SA-β-Gal-negative cells. 118 In a modification of this basic procedure, Gorgoulis, Bartek and co-workers recently developed a two-step staining procedure based on a biotin-antibiotin antibody-peroxidase-conjugated reaction, in order to improve the in vitro and ex vivo lipofuscin detection achieved with commercially available SBB staining (Figure 11).…”

Section: Lipofuscin Detectionmentioning

confidence: 99%

“…118 This activity can be detected both in vitro and in situ by histochemical methods, including staining with the lipophilic diazo dye Sudan Black B (SBB). 119,120,121 Acid β-galactosidase (β-Gal, encoded by GLB1) accumulates in the lysosomes of senescent cells and is the origin of SA-β-Gal activity. 122,123 SA-β-Gal activity is conveniently measured using chromogenic or fluorogenic probes.…”

Section: General Introductionmentioning

confidence: 99%

Novel probes, carriers and prodrugs to target senescent cells in vivo

Torres¹

View full text Add to dashboard Cite

Chapter 1|General introduction and interferents 5.10.24 Silencing and western blotting experiments of β-galactosidase 5.10.25 X-Gal staining of kidney, liver and tumors from BALB/cByJ female mice carrying orthotopic 4T1 mammary tumors with or without palbociclib treatment 5.10.26 Images of BALB/cByJ female mice bearing 4T1 mammary tumors treated with palbociclib and i.p. injected with Cy7Gal 5.10.27 Fluorophore biodistribution in BALB/cByJ mice bearing 4T1 mammary tumours treated with palbociclib and in the animal model of accelerated aging SAMP8 and its control SAMR1, after i.p. injection with Cy7Gal or WOS-Cy7Gal 5.10.28 Images of 2 and 14 months old BALB/cByJ female mice i.p. injected with Cy7Gal Chapter 6| Real time in vivo detection of cellular senescence through the controlled release of the NIR fluorescent dye Nile Blue 201-229

show abstract

Ix.—The Sudan Black B Technique in Cytology

Cited by 14 publications

References 2 publications

Specific lipofuscin staining as a novel biomarker to detect replicative and stress-induced senescence. A method applicable in cryo-preserved and archival tissues

Specific lipofuscin staining as a novel biomarker to detect replicative and stress-induced senescence. A method applicable in cryo-preserved and archival tissues

Ανάπτυξη, εφαρμογή και αξιολόγηση χημικών αναλόγων του Sudan Black B στην ανθρώπινη νόσο

Novel probes, carriers and prodrugs to target senescent cells in vivo

Contact Info

Product

Resources

About