Isolamento, cultura de protoplastos e regeneração de plantas de laranja doce (Citrus sinensis L. Osbeck)

Abstract

Dissertação apresentada para obtenção do título de Mestre em Ciências. Área de concentração: Fitotecnia Piracicaba 2009 Piracicaba Aos meus queridos pais Maria Cristina e Nelson, por todo o apoio e compreensão, e aos meus avós Martha e Wilson (in memorian), Dalvina (in memorian) e Cícero (in memorian). OFEREÇO Ao meu namorado Patrick, por todo o carinho e incentivo; às minhas irmãs Letícia e Luiza pelo companheirismo. DEDICO 4 5 AGRADECIMENTOS Agradeço a meus queridos pais pelo apoio, força e compreensão. Às minhas irmãs pelo companheirismo. Ao meu namorado Patrick Marques Dourado pelo carinho e incentivo. Ao professor Drº Francisco de Assis Alves Mourão Filho pela orientação, pelo crédito, pela oportunidade concedida para a realização do estágio de prática profissionalizante e do mestrado e pelos ensinamentos. À professora Drª Beatriz Januzzi Mendes pela colaboração e sugestões. Ao professor Drº Paulo Hercilio Viegas Rodrigues pelas idéias, apoio e amizade. Aos professores da dos Programas de Pós-Graduação da ESALQ pelos conhecimentos transmitidos. Ao Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) pela concessão da bolsa de estudos. Ao Fundo de Defesa da Citricultura (Fundecitrus) pelo apoio financeiro a este trabalho. Aos colegas do Fabiana pelo apoio, momentos de descontração e um ótimo convívio, e em especial à Luzia, pela sinceridade, amizade, palavras de conforto e auxílio nas horas difíceis. Aos colegas que já passaram pelo Laboratório, Suane, Rosely, Gustavo, Amâncio, Waner Júnior e Jannayna pela convivência. ABSTRACT Isolation, protoplast culture and regeneration of sweet orange (Citrus sinensis L. Osbeck)Plant regeneration, by organogenesis or somatic embryogenesis from cell cultures and in vitro plant tissue culture is the basis for the use of biotechnology in plant breeding. Studies were conducted with five cultivars of sweet orange (Citrus sinensis L. Osbeck), "Pêra", "Natal", "Lima Verde", "Hamlin" and "Westin". This work aimed to evaluate the isolation efficiency of protoplasts, to evaluate platting efficiency of protoplasts based on five densities of cells and different culture media and to evaluate somatic embryogenesis based on culture medium composition and concentration. The enzymatic solutions tested were: 1. Grosser and Chandler (1987): 1% de cellulase Onozuka RS (Yakult), 1% macerase R-10 (Yakult Honsha) and 0,2% de pectoliase Y-23 (Seishin); 2. Grosser and Chandler (1987) modified: 1% de cellulase Onozuka RS (Yakult) and 1% macerase R-10 (Yakult Honsha); 3. Enzimatic solution containing 4% cellulase Onozuka R-10 (Yakult) and 1% macerase R-10. Protoplasts were cultured at densities of 2 x 10 4 ; 5 x 10 4 ; 10 5 ; 2 x 10 5 e 3 x 10 5 protoplasts.mL -1 in EME 0,7M, BH 3 0,7M and BH3 + EME 0,7M, in the dark, at 25 ± 1 ºC. The enzymatic solution 2 provided higher yield for the cultivars "Hamlin", "Natal" and "Pêra", and enzymatic solution 1 resulted in better protoplast isolation for cultivar "Westin". Final platting efficiency, evaluated 90 days after culture, was higher ...

INFLUÊNCIA DA COBERTURA MORTA E DA ADUBAÇÃO NO CONTROLE DA PODRIDÃO RADICULAR EM MUDAS DE CITROS (Phytophthora nicotianae)

“…A produtividade da cultura dos citros tem as várias doenças de importância econômica, destaca-se a gomose de Phytophthora (Castro, 2009), que pode se expressar de diferentes formas causando grandes perdas. Os sintomas podem variar dependendo da espécie ou cultivar de citros, da idade da planta, dos órgãos onde ocorre o ataque ou das condições ambientais prevalecentes.…”