Investigation of the some physicochemical properties of the Pyrausta sticticalis nuclear polyhedrosis virus (NPV) polyhedrin

Восстановленный и карбоксиметилированный полиэдрин расщепляли трипсином. Из триптического гидролизата методом гель-фильтрования, высоковольтного электрофореза и хроматографии на бумаге выделено 48 пептидов. Определено их строение или аминокислотный состав. 30 пептидов с уникальными аминокислотными последовательностями насчитывают 246 остатков аминокислот. Обсуждаются особенности взаимодействия протеазы полиэдров ВЯП М. neustria с полиэдрином. Введение. Ранее [1] мы сообщили о том, что в нашей лаборатории завершается выяснение первичной структуры полиэдрина ВЯП шестого по счету (или десятого в мире) насекомого М. neustria. Мы осуществляем подобные исследования непосредственно на белке [2, 3], в других лабораториях мира основываются на нуклеотидной последовательности соответствующих генов [4, 5]. Стратегия выяснения аминокислотной последовательности, выбранная нами, предельно проста, так как полиэдрины относятся к разряду высокогомологичных белков [4, 6]. В этом случае изучается строение только триптических пептидов. Результаты таких исследований на полиэдрине ВЯП М. neustria приведены в настоящем сообщении. Физико-химический анализ этого белка был проведен ранее [7]. Материалы и методы. Полиэдрин получали растворением полиэдров в 0,1 н. NaOH (30 мин) при комнатной температуре. Раствор центрифугировали на ультрацентрифуге в течение 1,5 ч при 20 000 об/мин и 8 °С. Белок осаждали из надосадочной жидкости 14 %-м раствором трихлоруксусной кислоты и промывали дистиллированной водой. Осажденный белок восстанавливали, карбоксиметилировали [8] (ВКМ-белок) и расщепляли трипсином («Worthington», США). Протеолиз проводили в 0,2 н. NH 4 HCO 3 (рН 7,8, 37 °С) в течение 12 ч с промежуточной добавкой свежего фермента через 6 ч. Фермент-субстратное соотношение 1 : 50. Реакцию останавливали подкислением реакционной смеси

show abstract

Tryptic peptides of the polyhedrin of the Melacosoma neustria nuclear polyhedrosis virus

Palchikovskaya

Bobrovskaya

Rodnin

et al. 1993

Biopolym. Cell

Self Cite

View full text Add to dashboard Cite

show abstract

Physicochemical properties of the polyhedrin of Selenephera lunigera nuclear polyhedrosis virus

et al. 2001

Self Cite

View full text Add to dashboard Cite

Полиэдрин получен растворением полиэдров «щелочным» (рН 10,5) и «уксуснокислым» (67 %-я СН3СООН) методами. С помощью электрофореза в полиакриламидном геле установлено, что «уксуснокислый» полиэдрин содержит один компонент, а «щелочной»-исходный компонент и его фрагменты Ультрацентрифугированием показано, что «уксуснокислый» полиэдрин в 67 %-й СНъСООН образует один компонент с коэффициентом седиментации 1,9 S, а «щелочной» полиэдрин в растворах при рН 10,5 образует три олигомерных компонента с коэффициентами седиментации 13S (70 %), 19S (20 %) и 23S (10 %). Дансил-методом выявлено, что препарат «щелочного» белка содержит шесть N-концевых остатков аминокислот, а «уксуснокислый белок» не содержит свободной N-концевой аминогруппы. Построена пептидная карта «щелочного» полиэдрина и определен аминокислотный состав «уксуснокислого».

show abstract

scite is a Brooklyn-based organization that helps researchers better discover and understand research articles through Smart Citations–citations that display the context of the citation and describe whether the article provides supporting or contrasting evidence. scite is used by students and researchers from around the world and is funded in part by the National Science Foundation and the National Institute on Drug Abuse of the National Institutes of Health.

Contact Info

hi@scite.ai

10624 S. Eastern Ave., Ste. A-614

Henderson, NV 89052, USA

Blog Terms and Conditions API Terms Privacy Policy Contact Cookie Preferences Do Not Sell or Share My Personal Information

Made with 💙 for researchers

Part of the Research Solutions Family.

Investigation of the some physicochemical properties of the Pyrausta sticticalis nuclear polyhedrosis virus (NPV) polyhedrin

Cited by 2 publications

References 15 publications

Tryptic peptides of the polyhedrin of the Melacosoma neustria nuclear polyhedrosis virus

Tryptic peptides of the polyhedrin of the Melacosoma neustria nuclear polyhedrosis virus

Physicochemical properties of the polyhedrin of Selenephera lunigera nuclear polyhedrosis virus

Contact Info

Product

Resources

About