Identificação do vírus do mosaico do tomateiro (ToMV) Tobamovirus, por meio de anticorpos monoclonais

Abstract

O tomateiro é uma olerícola de grande importância econômica e uma das mais suscetíveis a viroses, dentre as quais, a causada pelo vírus do mosaico do tomateiro (ToMV), gênero Tobamovirus, que tem como sintomas mosaico verde claro-escuro nas folhas, afilamento dos folíolos e diminuição da produção, entre outros sintomas. Visando a identificação do ToMV, foram produzidos anticorpos monoclonais (MAbs), testados através de PTA- ELISA ("plate trapped antigen- enzyme linked immunoassay"). O MAb (10.H1) foi utilizado para avaliar a capacidade de identificação do ToMV em testes no campo em plantas de tomate infectadas. O MAb não apresentou reação cruzada com TMV (tobamovirus do mosaico do tabaco) nem com extrato de plantas sadias. O ToMV das amostras foi isolado, purificado e re-inoculado em plantas de tomateiro e de tabaco, para confirmação dos sintomas. Em "immunobloting" o MAb 10.H1 reconheceu somente a proteína referente à capa protéica do ToMV (de 17,5 kDa). A especificidade do MAb 10.H1 pode permitir o diagnóstico precoce desta doença na fase de plântulas, ainda em casa de vegetação, evitando assim a disseminação desta virose no campo.

Caracterização de uma nova estirpe do Tomato mosaic virus isolada de tomateiro no Estado de São Paulo

“…Confrontando antígenos e anti-soros dos isolados ToMV-SP e TMV-Pet não foi possível diferenciar sorologicamente o ToMV de TMV, uma vez que os valores de absorbância da reação cruzada foram de 0,737 e 0,687, respectivamente. Caner et al (1990) e Duarte et al (2002) já haviam verificado a necessidade de utilizar anticorpos monoclonais para diferenciar sorologicamente estas espécies.…”

“…A correta identificação de vírus infetando tomateiros é importante pois esta é uma das hortaliças mais cultivadas no mundo. O Brasil está entre os nove maiores produtores (Duarte et al, 2002) e o estado de São Paulo é responsável por cerca de 33% da produção nacional (IEA, 2000). Para tanto, a demanda anual de sementes é de aproximadamente 80 ton.…”

Detection and identification of TMV infecting tomato under protected cultivation in Paraná State

“…According to some authors, serological crossreaction between ToMV and TMV limits the efficiency of serological differentiation of these two viruses (Jacobi et al, 1998). In this regard, low cross-reaction was observed by Duarte et al, (2002) for a monoclonal antiserum that showed strong specificity for ToMV, but problems for raising this kind of antibodies limited their immediate use. In this work, definitive determination of virus species was possible after RT-PCR assays that reliably discriminated these two viruses.…”

Diversidade genética de isolados polispóricos de Crinipellis perniciosa (Stahel) Singer

“…Após a coleta do sobrenadante, foram realizadas precipitações com sulfato de amônio de 0-60%, de 60-80% e 80-100% a 0°C seguindo a tabela do livro "Methods in Os ELISAs foram otimizados conforme protocolos descritos anteriormente (Crowther, 1995;Duarte et al, 2002 (May, 1988;McCabe et al, 1999;Pilotti et al, 2002;Suwandi et al, 2004). De modo oposto, reações de intensidade forte foram caracterizadas por linhas mais densa do micélio, que se apresentava inicialmente com pigmentação mais clara e posteriormente mais escuro (marrom escuro) devido ao abortamento da fusão celular, ou seja, as hifas de dois indivíduos não são geneticamente idênticas, evitando, desta forma, que os genótipos existam num mesmo citoplasma (Dahlberg, 1995).…”