Criopreservação De Calos De Arroz

Abstract

RESUMOA criopreservação é uma técnica que mantém germoplasma por longo prazo. Objetivou-se verificar o efeito da criopreservação em nitrogênio líquido na regeneração de calos de arroz induzidos a partir de sementes maduras e avaliar o uso do glicerol como agente crioprotetor. Sementes de arroz BRS-7 TAIM, foram descascadas e desinfestadas, distribuídas em frascos contendo meio MS 2,5 mg dm -3 de 2,4 D para indução de calos e mantidos a temperatura de ±25 ºC no escuro. Após doze dias os calos foram criopreservados em nitrogênio líquido por uma hora, descongelados a 37º C e inoculados no meio de cultivo para proliferação. Utilizou-se cinqüenta calos por tratamento: Testemunha, Testemunha criopreservada, Glicerol 500 g dm -3 e Glicerol 500 g dm -3 criopreservado. A avaliação foi realizada aos trinta dias observando-se o tamanho e coloração dos calos. Transferiu-se o material para meio de regeneração MS 10 mg dm -3 sacarose, 0,5 mg dm -3 de ANA e 2,0 mg dm -3 de BAP e incubou-se em fotoperíodo de 16 h. Avaliou-se a regeneração aos trinta e quarenta e cinco dias de incubação, os parâmetros foram: crescimento dos calos, número de gemas/calo, número de calos com broto e número de brotos/calo. Na proliferação os calos da Testemunha criopreservado oxidaram, porém, na regeneração, aos trinta dias, apresentaram maior tamanho e número de gemas, e aos quarenta e cinco dias maior número de brotos que os demais tratamentos. Conclui-se que a criopreservação pode ser empregada em calos de sementes de arroz, não afetando sua capacidade regenerativa.Palavras-chave: Calos; regeneração; Oryza sativa. ABSTRACTCryopreservation is a technique that allows maintaining long-term germoplasma using ultra-reduced temperature. The objective of this study was to evaluate the regeneration seed´s callus of rice cryopreservated. Seeds of rice BRS-7 TAIM, were peeled and desinfested for establishment in vitro, distributed in flasks containing MS (Murashige & Skoog, 1962) 2,5 mg dm -3 of 2,4 D for induction of callus and maintained the temperature of ±25 ºC in the darkness. After twelve days the calluses were cryopreservated in liquid nitrogen for one hour, thawed 37º C and put back in the middle of cultivation for proliferation. It was used fifty callus by treatment: Test, Test cryopreservated, Glycerol 500 g dm -3 and Glycerol 500 g dm -3cryopreservated. The evaluation of the proliferation was accomplished to the thirty days being observed the size and coloration of the callus. The material was transferred for middle of regeneration MS 10 mg dm -3 sucrose, 0,5 mg dm -3 of ANA and 2,0 mg dm -3 of BAP and it was incubated in fotoperíodo of 16 h. The evaluation of the regeneration was accomplished to the thirty and forty five days of incubation, the parameters were: growth of the callus, sprout and callus number, number of callus with sprout and sprout/callus number. In the proliferation the callus of the treatment Test cryopreservated rusted, however it was observed in the regeneration, to the thirty days, that the same ones presented such adult an...