Recebido em 6/11/09; aceito em 28/4/10; publicado na web em 9/8/10 VALIDATION AND UNCERTAINTY ESTIMATION OF A METHOD BY HIGH PERFORMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHY FOR THE ANALYSIS OF LYCOPENE AND b-CAROTENE IN TOMATO PULP. A method to quantify lycopene and b-carotene in freeze dried tomato pulp by high performance liquid chromatography (HLPC) was validated according to the criteria of selectivity, sensitivity, precision and accuracy, and uncertainty estimation of measurement was determined with data obtained in the validation. The validated method presented is selective in terms of analysis, and it had a good precision and accuracy. Detection limit for lycopene and b-carotene was 4.2 and 0.23 mg 100 g -1 , respectively. The estimation of expanded uncertainty (K = 2) for lycopene was 104 ± 21 mg 100 g -1 and for b-carotene was 6.4 ± 1.5 mg 100 g -1 .Keywords: tomato pulp; validation; uncertainty estimation.
INTRODUÇÃOO tomate (Lycoperson esculentum) é um fruto originário das Américas, sazonal, disponível por apenas 3 ou 4 meses ao ano. 1 O Brasil é o 9º produtor mundial de tomates, sendo os estados de São Paulo, Minas Gerais e Goiás responsáveis por aproximadamente 65% da produção nacional. Em 1850, o tomate começou a ser industrializado e no início do século XX a produção de tomate tornou-se um ramo industrial extremamente rentável e bastante popular no mercado na forma de polpa concentrada ou extrato de tomate. 2 O tomate caracteriza-se por possuir alto teor de licopeno, responsável pela cor vermelha em seus produtos, b-caroteno, que apresenta atividade pró-vitamínica A, e outros carotenoides em menor concentração. 3 Embora o Food and Drug Administration (FDA -USA) considere limitada a evidência de associação do consumo de tomates e a redução do risco de câncer de próstata, ovário, gástrico e pâncreas, 4 os carotenoides estão relacionados com ação antioxidante e controle ou prevenção de doenças crônicas. 5 Segundo Carvalho, 2 o Brasil apresenta expansão da cultura de tomates e a indústria de processamento tem acompanhado o crescimento, o que torna necessário um controle mais eficaz das etapas do processamento, bem como dos produtos obtidos. Desta forma, se fazem necessários métodos validados e com a estimativa de incerteza calculada, para acompanhar o rendimento e degradação de carotenos durante as etapas de processamento e estocagem de produtos de tomate.No processo de validação de um método, a estimativa da incerteza é o principal foco de interesse devido a sua importância em mostrar a qualidade dos dados. O Guia EURACHEM/CITAC 6 define incerteza como "um parâmetro associado ao resultado de uma medição, que caracteriza a dispersão de valores que poderiam ser razoavelmente atribuídos ao mensurando". Para a maioria dos casos, a incerteza expandida (U) deve ser utilizada. U é obtida pela multiplicação da incerteza padrão combinada (m) por um fator de abrangência (K). A escolha do fator K é baseada no nível de confiança desejado. 6 Dentre as técnicas analíticas para determinar carotenoides, é recomendada a cromato...