Comparative evaluation between the extenders TES-TRIS and ACP-112® and the association of Sálva Marajó oil (Lippia origanoides) in the quality of cryopreserved buffalo sperm

Abstract

Based on these data, we demonstrated the beneficial effects of TES-TRIS for post-thaw buffalo sperm quality; however, no protective effect was observed for buffalo sperm cryopreserved with the different tested concentrations of Lippia origanoides extract oil. Key words: Powdered Coconut Water. Lippia. Cryopreservation. Spermatozoa. Buffalo. ResumoPara a implantação da inseminação artificial é indispensável à utilização de sêmen congelado, que pode provocar mudanças deletérias na estrutura e na integridade das membranas espermáticas, comprometendo sua função. Para evitar estes danos celulares, há a necessidade de se utilizar meios diluidores e substratos adequados que recuperem o maior número possível de células viáveis pós-descongelação. Para isso, foram avaliados, no experimento I, três diferentes diluidores, o diluidor TES-TRIS, bastante utilizado para bubalinos, e um diluidor a base de água de coco em pó (ACP-112  ), associado ou não ao leite (ACP-112  -Leite), na congelação do sêmen de bubalinos; e no experimento II, foi avaliado o efeito do óleo extraído da Lippia origanoides na proteção dos espermatozóides contra as crioinjúrias decorrentes da congelação do sêmen bubalino. Foram utilizados 10 touros bubalinos para as colheitas de sêmen (10 ejaculados/touro), sendo os ejaculados diluídos em TES-TRIS (controle), ACP-112  e ACP-112  -Leite no experimento I; e no experimento II, os ejaculados foram diluídos no melhor diluidor obtido no experimento I, acrescido de 2.5 µg mL -1 , 5 µg mL -1 e 10 µg mL -1 da planta e o grupo controle, constituído somente do diluidor. O sêmen recém colhido foi analisado quanto as características convencionais, tais como, motilidade, concentração, morfologia e viabilidade. Após a descongelação das amostras foram avaliados novamente, motilidade e viabilidade espermática, e posteriormente, foram realizados os testes de termo-resistência, hiposmótico e de avaliação das membranas dos espermatozóides, através das sondas fluorescentes PI, FITC-PSA e JC-1, utilizando a citometria de fluxo. Os dados obtidos foram submetidos à ANOVA e ao Teste de Tukey a 5%. No experimento I, o diluente TES-TRIS apresentou melhores resultados para as várias características avaliadas quando comparado com o ACP-112  e ACP-112  -Leite (P < 0.05), demonstrando maior proteção deste diluidor às estruturas espermáticas durante a criopreservação do sêmen de bubalinos. No experimento II, as diferentes concentrações do óleo extraído da Lippia origanoides não demonstraram nenhuma diferença (P > 0.05) entre as variáveis avaliadas, quanto à proteção das estruturas espermáticas durante a criopreservação. Com base nestes dados, pôde-se demonstrar os efeitos benéficos do diluidor TES-TRIS na qualidade pós-descongelação dos espermatozóides bubalinos; entretanto, nenhum efeito protetor foi observado sobre os espermatozóides bubalinos criopreservados em associação com o óleo extraído da Lippia origanoides, nas diferentes concentrações utilizadas. Palavras-chave: Água de coco em pó. Lippia. Criopreservação. Espermatozóid...

Plant Extracts as Alternative Additives for Sperm Preservation

“…The addition of this plant to the freezing extender in buffalo [95] did not enhance any sperm parameter after semen thawing. The extract concentrations employed were 2.5, 5, and 10 µg/mL.…”