Characterization of excretory-secretory antigens of adult Toxocara canis by western blotting

Abstract

Toxocara canis is one of the most common helminth worm of dogs which continues to stimulate both public health concern alongside the higher scientific interest. It may cause visceral and ocular damage in humans especially in children. The identification of specific antigens of T. canis is important so as to develop better diagnostic techniques. Excretory-secretory (ES) antigens were prepared by culturing the adult T. canis worms in RPMI 1640 medium without serum supplementation followed by ammonium sulphate precipitation. These antigens were separated using sodium dodecyl sulphate-electrophoresis (SDS-PAGE). Recovered proteins ranged from 30 to 384 kDa. The specific reactivity of the T. canis excretory-secretory (TC-ES) proteins was checked by western blotting. The immuno-reactivity of the naturally infected dog sera with the TC-ES antigens showed five bands at 43, 57,105, 139 and 175 kDa. The immuno-reactivity of the hyper immune serum raised in rabbits against TC-ES antigens was observed with ten polypeptides of 21, 25, 30, 37, 45, 50, 57, 69, 77 and 105 kDa. Common antigens band were observed at 57 and 105 KDa. These antigens merit further evaluation as candidate for use in diagnosis of toxocariasis in humans and adult dogs.

Experimental infection with T. canis and T. leonina in farm mink (Neovison vison)

“…Several antigens of about 24, 28, 30, 35, 56, 67, 117, 136, and 152 kDa are recognised by antibodies present in infected human sera (32). Similarly, an immunoblot profile of T. canis ES antigens with hyperimmune serum raised in rabbits, which are also paratenic hosts, shows a similar pattern: 21, 25, 30, 37, 45, 50, 57, 69, 77, and 105 kDa (34).…”

Biểu Hiện Và Đánh Giá Hoạt Tính Kháng Nguyên Của Protein Tes-30 Tái Tổ Hợp Bằng Western Blot

“…(Toxocara canis từ chó và Toxocara cati từ mèo) ở người, có biểu hiện lâm sàng không đặc hiệu, đặc trưng bởi sự di chuyển của ấu trùng đến các cơ quan nội tạng của người và một số động vật [1], [3]. Đa số người bệnh không có biểu hiện rõ ràng do bệnh chủ yếu ở thể ẩn và cũng ít được các bác sĩ lâm sàng chú ý [5]. Chính vì vậy việc phát hiện bệnh là rất khó khăn, chẩn đoán chủ yếu dựa vào phản ứng ELISA để xác định sự lưu hành của kháng thể IgG kháng lại kháng nguyên tiết TES (Toxocara Excretory/Secretory antigens).…”

“…Các hạn chế trên của việc sử dụng các kháng nguyên TES tự nhiên nói trên có thể được giải quyết bằng cách sản xuất kháng nguyên TES ở dạng tái tổ hợp trong E. coli. Quy trình thu nhận kháng nguyên TES tái tổ hợp (rTES) kéo dài trong vòng 5 ngày [5]. cho phép thu nhận một lượng lớn kháng nguyên TES với độ tinh sạch cao.…”

Establishment of an Experimental Procedure for Preparing Trial Serum Samples for the Specific Serodiagnosis of Toxocara canis for External Quality Assessment Schemes

“…The immune responses to Toxocara sp. in dogs, cats, rabbits, and humans are completely different [17][18][19]. In this study, serum was taken from patients.…”