Carragenana da epífita Hypnea musciformis obtida do cultivo experimental de Solieria filiformis em Flecheiras, Estado do Ceará, Brasil

Abstract

RESUMO.O cultivo da rodofícea Solieria filiformis vem sendo desenvolvido na praia de Flecheiras, Estado do Ceará, como perspectiva de utilização sustentável do recurso para biotecnologia, mas o crescimento de epífitas sobre a espécie compromete seu bom crescimento. Desta forma, avaliou-se a eficiência de duas metodologias (M I e M II) no isolamento da Kappa-carragenana (κ-CAR) da alga marinha vermelha Hypnea musciformis. A κ-CAR foi obtida mediante digestão proteolítica (M I) ou água quente (80°C) (M II). Os extratos foram analisados quanto à sua composição química, seguido por cromatografia de troca iônica em coluna de DEAE-celulose usando um gradiente de NaCl. A atividade anticoagulante foi avaliada pelo teste do tempo de tromboplastina parcial ativada (TTPA), usando plasma humano normal e heparina (HEP) padrão (193 UI mg ABSTRACT. Carragennan from Hypnea musciformis epiphyte obtained fromSolieria filiformis experimental culture at Flecheiras, Ceará State, Brazil. Solieria filiformis (Rhodophyceae) culture is being developed at Flecheiras Beach, state of Ceará, Brazil, for its future sustainable use in biotechnology. However, epiphyte growth on the species jeopardizes suitable development. The efficiency of two methods (M I and M II) in the isolation of kappa-carrageenan (κ-CAR) from red marine alga Hypnea musciformis has been evaluated. κ-CAR was obtained by proteolytic digestion (M I) or by hot water (80°C) (M II) and extracts were analyzed with regard to their chemical composition and then by ion-exchange chromatography on DEAE-cellulose column with NaCl gradient. Anticoagulant activity was evaluated by the activated partial thromboplastine time (APTT) test with common human plasma and standard heparin (HEP) ). Yield difference reached 4.28 ± 0.26%% (p < 0.05), and the lowest sulfate content was obtained with M I (17.00%) when compared to that with M II (26.30%). Further, different chromatographic profiles were reported between the two methods. Whereas M I was efficacious in obtaining κ-CAR anticoagulants (2.67 IU mg -1 ), alternative M II was efficient for the food industry. Results suggest that κ-CAR extraction method from H. musciformis depends on the industry's usage criterion.

Isolamento, fracionamento e avaliação toxicológica in vivo de polissacarídeos sulfatados de Hypnea musciformis

“…Extração por digestão enzimática (Método I) -Os PSs foram extraídos com papaína bruta (30mg mL -1 ) em tampão acetato de sódio 100mM (pH 5,0) contendo cisteína e EDTA (5mM) em banho-maria (6h; 60°C) como descrito previamente (RODRIGUES et al, 2011b).…”

“…As frações de PSs eluídas com 0,50M de sal foram analisadas quanto ao grau de homogeneidade e densidade de carga por eletroforese em gel de agarose (BioAgency, São Paulo, SP, Brasil) a 0,5% em tampão 1,3-acetato diaminopropano (0,05M) (Sigma-Aldrich, St. Louis, EUA) (pH 9,0) e comparadas à heparina. Ambos os procedimentos foram realizados como relatados anteriormente (RODRIGUES et al, 2011b Neste trabalho, diferenças foram encontradas na composição química dos PSs entre os métodos utilizados. O maior rendimento de PSs foi obtido pelo M II, o que pode ser o resultado da extração de precursores (galactose-6-sulfato) e outros elementos constituintes não formadores de gel, comuns em algas marinhas vermelhas e presentes nas camadas mais externas do tecido, haja vista a extração aquosa a frio, que foi realizada previamente sob agitação constante, possuir a propriedade de remover tais componentes, enquanto a extração aquosa a quente obter polissacarídeos conhecidos como "amido das florídeas", os quais são ricos em glucose (MURANO et al, 1997), além de justificar os maiores teores de CTs e PCs encontrados no referido método, comparado aos demais.…”

“…As diversas propriedades desses compostos têm motivado a maricultura de algas no Brasil, como, por exemplo, as espécies rodofíceas Hypnea musciformis (REIS et al, 2006) e Solieria filiformis (RODRIGUES et al, 2010), além de propiciar estudos relacionados à biologia de algas, extração e caracterização físico-química e de atividades biológicas de ficocolóides (RODRIGUES et al, 2010;RODRIGUES et al, 2011b).…”

“…Esse ficocolóide apresenta propriedades funcionais físicas de interesse para a indústria de alimentos (CAMPO et al, 2009) e com capacidade de alterar a coagulação sanguínea in vitro (RODRIGUES et al, 2011b). O objetivo desta pesquisa foi isolar e fracionar os PSs de H. musciformis, quando obtidos por três métodos de extração (papaína e água), assim como avaliar a toxicidade in vivo em camundongos, contribuindo com os estudos relacionados à identificação e caracterização química desses polímeros presentes na espécie e para obtenção de novas moléculas com mínimos efeitos.…”