RESUMOOs procedimentos de manipulação do ejaculado podem aumentar o estresse oxidativo sofrido pelos espermatozoides, com consequente redução da sua longevidade. Estudos mostram que o processo de criopreservação induz a lipoperoxidação, o que suscita a realização de pesquisas que estabeleçam estratégias para reduzir os danos causados. O objetivo do experimento foi avaliar o efeito antioxidante da glutationa reduzida adicionada ao sêmen equino pré-congelação, nas concentrações de 3 mM, 5 mM e 7 mM, sobre os níveis de lipoperoxidação após a descongelação. Os ejaculados (n=19) foram congelados em diluente a base de gema de ovo (Botucrio ® ). Foram analisadas as variáveis espermáticas: motilidade, morfologia, viabilidade/status acrossomal, atividade mitocondrial e nível de lipoperoxidação. As médias dos tratamentos foram comparadas pelo teste de LSD, em nível de 5% de significância. Quando comparada a ação das diferentes concentrações de GSH após a descongelação, não foi observado efeito protetor contra a lipoperoxidação, sendo que as concentrações de 5 mM (45,3% vs. 61,6%) e 7 mM (25,3% vs. 61,6%) causaram uma redução significativa da motilidade quando comparadas ao grupo controle, respectivamente. Conclui-se que as concentrações de glutationa reduzida testadas não conferiram proteção antioxidante durante o processo congelação/descongelação do sêmen equino, com as concentrações de 5 mM e 7 mM apresentando efeito deletério sobre a motilidade espermática. PALAVRAS-CHAVE: antioxidante, espermatozoide, estresse oxidativo, ROS