Imunossupressão com tacrolimus favorece a regeneração hepática induzida por hepatectomia extensa em ratos

Abstract

DESCRITORES -Tacrolimo. Hepatectomia. Regeneração hepática.RESUMO -Racional -A regeneração hepática representa o resultado de respostas fisiológicas que ocorrem após perdas de parênquima, como consequência de agressões tóxico-medicamentosas, infecciosas, traumáticas ou cirúrgicas. Objetivo -Avaliar, em dois momentos distintos da regeneração hepática, a influência do tacrolimus sobre o fenômeno da regeneração hepática desencadeada pela ressecção de 70% do parênquima hepático em ratos plenamente desenvolvidos. Método -Utilizaram-se 40 ratos Wistar com peso médio de 510,08 g ± 11.66 g divididos aleatoriamente em dois grupos de 20 (Estudo e Controle), cada grupo subdividido em dois subgrupos conforme o dia da morte após a hepatectomia (24 horas e 7 dias). De acordo com o grupo os animais receberam por gavagem, diariamente, iniciando três dias antes da hepatectomia e prolongando-se por todo o período de observação, solução aquosa de tacrolimus 0,1 mg/kg/dia ou solução salina no mesmo volume. Após três dias de pré-terapia todos foram submetidos à hepatectomia de 70% pela ressecção dos lobos hepáticos mediano e lateral esquerdo que foram pesados para posterior cálculo da regeneração hepática pela fórmula de Kwon. Vinte e quatro horas ou sete dias após a hepatectomia, 10 animais de cada grupo foram mortos, os fígados remanescentes (regenerados) foram pesados e amostrados para realização de índice mitótico por hematoxilina-eosina e estudo imunoistoquímico com os marcadores PCNA e Ki-67. Resultados -Os animais que receberam tacrolimus mostraram índice maior de regeneração hepática, atingindo significância estatística quando comparado ao subgrupo de animais mantidos com placebo quando analisados pelos parâmetros: fórmula de Kwon, índice mitótico e marcador PCNA. A tendência para o marcador Ki-67 foi idêntica aos outros parâmetros, mas não alcançou significância estatística. Conclusões -A imunossupressão com tacrolimus possui efeito estimulante no processo de regeneração hepática desencadeado pela hepatectomia 70% em ratos Wistar adultos, plenamente desenvolvidos.ABSTRACT -Background -Liver regeneration is the result of physiological responses that occur after loss of parenchyma, as a consequence of drug abuse-toxic, infection, trauma or surgical procedure. Aim -To analyze, during two different moments of liver regeneration, the effect of the immunosuppressant tacrolimus on the 70% hepatectomy model-induced liver regeneration in adult rats. Methods -Forty Wistar adult rats, weighing 510.08+11.66 g were randomly divided into two groups (Study or Control), each group divided into two subgroups according to the death day after 70% hepatectomy (24 hours or 7 days). According to the group of study, rats received 0.1mg/Kg/day of tacrolimus or the same volume of saline solution, by gavage, daily, starting three days before hepatectomy until the end of observation (animal death´s day). After three days of pre-therapy, all animals were submitted to 70% hepatectomy by resection of median and left lateral hepatic lobes which were weig...

Liver regeneration with l-glutamine supplemented diet: experimental study in rats

“…Data from the metaanalysis by Novak et al 8 showed that glutamine supplementation may be associated with a reduction in infectious complications, oxidative stress and mortality rates in critically ill patients. Liver regeneration evaluated by the Kwon formula in the work of Gama Filho et al 9 was significant in the control group as in the experiment one (using Tacrolimus) in the first 24 hours and on the seventh posthepatectomy day. When the values were compared within each group there was an increase in both, more pronounced in the study group.…”

“…Glutamine supplementation to rats leads to increased replication of hepatocytes with 24h, being beneficial to liver regeneration 7 . In their study testing the effect of tacrolimus on liver regeneration, Gama Filho et al 9 found inter-and intragroup statistical difference in periods of 24 hours and seven days, with a gradual increase in the mitotic index, therefore concluding that the more time under the action of Tacrolimus, the greater the positive effect on liver regeneration, which does not corroborate the results of this work, where we found a greater number of intragroup mitosis (glutamine group) only at 72 hours of the experiment (p = 0.003). Among groups there was a trend towards statistical significance (p = 0.056).…”

Estudo da espectroscopia de fluorescência a laser em fígados de ratos com isquemia hipotérmica

“…O Ki67 é um antígeno nuclear expresso nas fases G1, S, G2 e M do ciclo celular. A avaliação imunohistoquímica de Ki67 é utilizada para quantificar a atividade celular proliferativa 45,46 , e atualmente é considerada o padrão ouro para este fim.…”

“…Os espectros de autofluorescência celular abrangem a maior parte da faixa espectral visível ao olho humano, uma vez que, diferentes fluoróforos endógenos emitem diferentes comprimentos de onda, como as flavinas, NAD e lipofuscina emitem luz verde, azul e laranja, respectivamente, quando excitados em comprimentos de onda apropriados 46,47 .…”

“…As coenzimas NADPH e flavinas já foram consideradas principalmente para o monitoramento da autofluorescência da funcionalidade do fígado em transplantes e cirurgias. Os fluoróforos endógenos adicionais estão se tornando de interesse para a detecção precoce de doenças e danos hepáticos, considerando o aumento de patologias hepáticas graves e suas implicações tanto para a progressão da doença quanto para o transplante 46 .…”