Avaliação da atividade antioxidante utilizando sistema beta-caroteno/ácido linoléico e método de seqüestro de radicais DPPH•

Abstract

Os radicais de oxigênio (radicais hidroxila e peroxila) e o ânion superóxido têm um papel importante nas reações bioquímicas/fisiológicas do corpo humano. No entanto, se houver produção excessiva de radicais de oxigênio durante os processos patofisiológicos ou devido a fatores ambientais adversos e não existirem antioxidantes disponíveis in vivo, podem ocorrer doenças e danos profundos em tecidos [1,2].Antioxidantes são substâncias que retardam a velocidade da oxidação, através de um ou mais mecanismos, tais como inibição de radicais livres e complexação de metais [3]. Eles podem ser sintéticos ou naturais e, para serem utilizados em alimentos, devem ser seguros para a saúde. RESUMOA atividade antioxidante de extratos de frutas (acerola, amora, açaí e morango) e compostos puros foi avaliada por meio de dois métodos: sistema β-caroteno/ácido linoléico e método de seqüestro de radicais livres (DPPH• -2,2-difenil-1-picrilhidrazila). As metodologias foram previamente adaptadas para a realização em microplacas, de forma a reduzir a quantidade de reagentes e amostras necessárias, aumentar o número de análises simultâneas e permitir a automatização das leituras de absorbância. Os resultados mostraram que a atividade antioxidante dos extratos metanólicos dos frutos estava de acordo com a apresentada pelos compostos puros, isto é ácido ascórbico e compostos fenólicos, nos dois sistemas. O extrato de acerola, devido ao seu alto conteúdo de vitamina C, comportou-se como pró-oxidante e os de açaí, amora e morango como antioxidantes no sistema β-caroteno/ácido linoléico. Entretanto, quando avaliado pelo método de seqüestro de radicais livres, o extrato de acerola apresentou a maior atividade antioxidante, seguido pelos extratos de amora, açaí e morango. As adaptações realizadas nos métodos de avaliação de atividade antioxidante utilizando microplaca permitiram a realização de múltiplas análises simultâneas, além de minimizar significativamente o uso de reagentes e amostras. Palavras-chave: antioxidante, frutas, DPPH•, β-caroteno, microplaca, fenólicos. SUMMARYEVALUATION OF THE ANTIOxIDANT ACTIVITy USING THE B-CAROTENE/LINOLEIC ACID SySTEM AND THE DPPH SCAVENGING METHOD. The antioxidant activity of fruit extracts (acerola, açaí, black-berry and strawberry) and pure compounds has been analysed by two methods: β-carotene/linoleic acid and DPPH•(2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl) radical scavenging assay. First, those methodologies were adapted to be performed in microplates, in order to reduce the sample and reagent amounts, to increase the number of simultaneous analyses and to automate absorbance lectures. The results showed that the antioxidant activity of the fruit extracts was in accordance with those of pure ascorbic acid and phenolic compounds, in the two systems. The acerola extract, due to its high vitamin C content, acted as pro-oxidant, but açaí, black-berry and strawberry extracts acted as antioxidants in β-carotene/ linoleic acid system. However, by the DPPH• radical scavenging assay the acerola extract presented the ...

Commercial spices and industrial ingredients: evaluation of antioxidant capacity and flavonoids content for functional foods development

“…The extracts obtained above were used to assess the antioxidant capacity through DPPH (2, 2-diphenyl-1-picrylhydrazyl) radical-scavenging method, according to BrandWilliams, Cuvelier and Berset (1995) with some modifications (DUARTE-ALMEIDA et al, 2006). A 50 mL aliquot of the extract previously diluted and 250 mL of DPPH (0.5 mm) were shaken, and after 25 minutes the absorbance was measured at 517 nm using a Microplate Spectrophotometer (Benchmark Plus, Biorad, Hercules, CA).…”

Flavonoids, total phenolics and antioxidant capacity: comparison between commercial green tea preparations

“…The antioxidant capacity was determined by the DPPH • (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl) radical-scavenging method according to Brand-Willians, Cuvelier and Berset (1995), with some modifications (DUARTE-ALMEIDA et al, 2006). A 50 µL aliquot of the sample previously diluted and 250 µL of 0.5 mM methanolic DPPH were mixed, and after 20 minutes the absorbance was measured at 517 nm using a Microplate Spectrophotometer (Benchmark Plus, BioRad, Hercules, CA).…”

Compostos fenólicos e capacidade antioxidante de cultivares de uvas Vitis labrusca L. e Vitis vinifera L.

“…A capacidade antioxidante foi avaliada utilizando-se o método do seqüestro de radicais livres do DPPH (2,2-difenil-1-picrilhidrazila) em microplaca 10 . Uma alíquota de 250 µL da solução metanólica de DPPH 20 mg.L -1 foi adicionada a 50 µL do extrato metanólico.…”