Caracterização do Tomato chlorotic spot virus isolado de jiló no Vale do Paraíba, Estado de São Paulo

Abstract

Os tospovírus são responsáveis por perdas significativas em diversas culturas, principalmente solanáceas. No município de São José dos Campos (SP), plantas de jiló (Solanum gilo) apresentando sintomas de mosaico, bolhosidades, nanismo e queda acentuada da produção foram coletadas para análise. Visando a caracterização do agente causador dos sintomas, testes biológicos, elétrono microscópicos, sorológicos e moleculares foram realizados. Através de inoculação mecânica em plantas indicadoras das famílias Amaranthaceae, Chenopodiaceae e Solanaceae obtiveram-se resultados típicos aos esperados para tospovírus. Ao microscópio eletrônico de transmissão, observaram-se, em contrastação negativa, partículas pleomórficas com diâmetro entre 80 e 110 nm e em cortes ultra-finos partículas presentes em vesículas do retículo endoplasmático. Através de DAS-ELISA, identificou-se o Tomato chlorotic spot virus (TCSV). A partir de RNA total extraído de folhas infetadas, amplificaram-se, via RT-PCR, fragmentos correspondentes ao gene da proteína do capsídeo (cp) os quais foram seqüenciados e comparados com outros depositados no "GenBank". A homologia de nucleotídeos e aminoácidos deduzidos foi respectivamente de 99 e 95% quando comparada com seqüências de isolados de TCSV. A comparação com as outras espécies do gênero Tospovirus apresentou valores de homologia entre 72 e 84%. Estes resultados confirmam a identidade deste vírus como pertencente à espécie TCSV, que é predominante no Estado de São Paulo e importante patógeno de outras plantas cultivadas. Além disso, variedades de jiló quando inoculadas foram susceptíveis tanto ao TCSV como às espécies Tomato spotted wilt virus (TSWV) e Groundnut ringspot virus (GRSV).

Tomato chlorotic spot virus in hydroponically-grown lettuce in São Paulo State, Brazil

“…Infected lettuce leaf extracts were negatively stained with 2% uranyl acetate and observed under a Philips EM 208 electron microscope, according to Eiras et al (2002).…”

“…Extraction of total RNAs was performed according to Eiras et al (2002), from 1 g of infected lettuce leaves. The complementary DNA (cDNA) strands were synthesized by mixing 1 µg of total RNAs with the "Preamplification System First Strand cDNA Synthesis" (Gibco BRL), according to the manufacturer's instructions, and using the primer named BR60 (5´ AGAGCAATTGTGTCA 3´), (Eiras et al, 2002).…”

“…The complementary DNA (cDNA) strands were synthesized by mixing 1 µg of total RNAs with the "Preamplification System First Strand cDNA Synthesis" (Gibco BRL), according to the manufacturer's instructions, and using the primer named BR60 (5´ AGAGCAATTGTGTCA 3´), (Eiras et al, 2002). PCR was carried out using 10 µl of the cDNA strands, 10 ng/µl of the BR60 and BR65 (5`ATCAAGCCTTCTGAAAGTTCAT 3`) primers, one unit of Taq DNA polymerase, 1µl of the deoxynucleotide mixture (0.03 M) and 5 µl of enzyme buffer.…”

Detection and identification of TMV infecting tomato under protected cultivation in Paraná State

“…Among the viruses reported to cause significant losses in tomato (Lycopersicum esculentum Mill. ), the commonly found are Cucumovirus, Begomovirus, Luteovirus, Potexvirus, Potyvirus, Tobamovirus, and Tospovirus (Eiras et al, 2002). Fukuda et al, (1981) classified the species of Tobamovirus into two subgroups according to the location of their origin of assembly.…”

“…There are reports about Tobamovirus infection in tomato, mainly from São Paulo, Minas Gerais, and Federal District (Resende and Cupertino, 1996). The host range of some isolates include, Nicotiana tabacum L., Petunia sp, tomato and species of Zinnia for TMV, and Tomato for ToMV; (Caner et al, 1990;Bastos et al, 1999;Maritan and Gaspar, 2001;Moreira et al, 2001;Eiras et al, 2002). In Sapopema, tomato plants growing under plastic houses, showing narrowing and leaf distortion in 90% of the plants, suggested a toxity caused by herbicide residues.…”