Fases estacionárias modernas para cromatografia líquida de alta eficiência em fase reversa

Abstract

Recebido em 15/12/09; aceito em 1/4/10; publicado na web em 29/6/10 MODERN STATIONARY PHASES FOR REVERSED PHASE HIGH PERFORMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHY. This review first discusses the limitations of many of the supports and stationary phases used in reversed phase high performance liquid chromatography and then describes those, developed more recently, that present better stabilities and more versatile selectivities. Emphases will be given to stationary phases that use higher purity silicas, hybrid silicas, monolithic silicas, metallic oxides and mixed oxides as supports and those that have embedded polar groups or contain phenyl or fluoro groups as the stationary phase as well as the phases used for mixed mode or hydrophilic interaction separations. These modern stationary phases facilitate the analysis of complex mixtures.Keywords: RP-HPLC; modern stationary phases; stability. INTRODUÇÃOO alto nível de desenvolvimento e expansão alcançado pela cromatografia líquida de alta eficiência em fase reversa (CLAE-FR), ao longo das últimas décadas, deve-se principalmente a sua vasta aplicabilidade, que engloba o desenvolvimento de novos produtos, o controle da qualidade desses produtos e, também, as possíveis contaminações provenientes desses produtos e dos disponíveis no mercado há anos. Dentro deste contexto estão envolvidas as indústrias farmacêuticas, alimentícias, agropecuárias e químicas, as agências reguladoras que tratam do meio ambiente e outras. A ampla aplicabilidade da CLAE-FR foi o que impulsionou e continua impulsionando as pesquisas em busca do aprimoramento desta técnica, principalmente referente ao desenvolvimento de novas fases estacionárias (FE). Hoje a CLAE-FR pode ser considerada uma técnica de análise (separação, confirmação e quantificação) bem difundida e empregada, em consequência das colunas cromatográficas e equipamentos de alta tecnologia que se encontram disponíveis.As FE empregadas em CLAE-FR consistem de uma camada orgânica apolar ligada quimicamente ou imobilizada ou apenas sorvida a um suporte cromatográfico. A forma de obtenção dessas camadas apolares e a variedade de óxidos empregados como suportes cromatográficos resultam nos diferentes tipos de FE. O método mais comum e também o mais empregado para a obtenção das FE consiste na introdução de monocamadas orgânicas através de reações com reagentes apropriados, que dá origem às fases estacionárias quimicamente ligadas (FEQL).1-4 As FEQL podem ser obtidas por diferentes processos, como esterificação, cloração seguida por reação com reagente de Grignard ou com compostos organo-lítio e organossilanização. Uma forma alternativa de preparo de FE é o método de recobrimento do suporte com polímeros orgânicos, que pode ser realizado de duas maneiras: mistura de um polímero pré-sintetizado de composição química bem definida em solução com o suporte e posterior evaporação do solvente e, polimerização in situ de uma solução de monômeros ou oligômeros, iniciada ou propagada na superfície do suporte, geralmente seguida de uma etapa de imobilização....

Bactérias extremófilas facultativas melhorando a germinabilidade de sementes de Eucalyptus urophylla S.T. blake

“…Isso pode ser alcançado através do uso de técnicas, tal como a cromatografia líquida de alta eficiência -CLAE (MALDANER et al, 2010).…”

Suportes cromatográficos e fases estacionárias para cromatografia líquida: preparo, evolução e tendências

“…A sílica apresenta-se em unidades tetraédricas (SiO 4 ) aleató-rias unidas por grupos siloxanos e sua superfície apresenta grupos silanois [7,8] . O destaque da sílica como suporte cromatográfico em HPLC ocorre devido às suas características favoráveis como, por exemplo, boa resistência mecânica, estabilidade química térmica, área superficial e estrutura de poros controláveis e grupos silanois suscetíveis a posteriores modificações no preparo de diferentes fases estacionárias [9][10][11][12][13][14] .…”

“…Um segundo exemplo de materiais híbridos observa-se na reação de TEOS com bis(trietoxissiletano) formando suportes que contêm ligações de etano na estrutura do polímero (Figura 9c). Adicionalmente, outra metodologia utiliza a modificação da superfí-cie da partícula de sílica com um organossilano para ampliar a faixa de pH utilizada sem perder a estabilidade mecânica do material (Figura 9d) [1,11,36] . Além disso, a inserção de um grupo organossilano [aminopropiltrietoxissilano (APTES) ou viniltrimetoxissilano (VTMES)] é interessante, pois a presença desses grupos funcionais facilita a reação química com outros grupamentos orgânicos.…”

O desafio de analisar solutos básicos por cromatografia líquida em modo reverso: algumas alternativas para melhorar as separações

“…1,2 Por sua vez, mais de 70% dos fármacos disponíveis no mercado são bases e a RP-LC é a técnica mais utilizada para analisar solutos básicos, 1,3 mas alguns problemas acontecem quando solutos básicos são analisados por RP-LC e, por esta razão, esta revisão se dedica a apresentar estes problemas e a fornecer algumas alternativas para superá-los, contribuindo com outras revisões produzidas pelo nosso grupo de pesquisa a respeito da RP-LC. [4][5][6][7][8][9] Em RP-LC o principal objetivo é obter separação dos solutos, que é avaliada através da resolução (R s ), que determinada o grau de separação entre dois picos adjacentes. A resolução pode ser expressa em função da eficiência (N 2 ), da seletividade (α) e do fator de retenção do segundo pico (k 2 ), com a aproximação de que ambos os picos têm aproximadamente a mesma largura à meia altura.…”