Avaliação das variáveis analíticas do método de Folin-Ciocalteu para determinação do teor de taninos totais utilizando como modelo o extrato aquoso de folhas de psidium guajava L.

Abstract

Psidium guajava L. LEAVES AQUEOUS EXTRACT AS A MODEL. The main analytical variables of a modified Folin-Ciocalteu method were studied by UV-Vis and gradient HPLC-PDA methods, using purified (PC) and technical grade (TGC) casein. Rutin and an aqueous extract of Psidium guajava L. leaves were used as models. The best results were ascribed to TGC. Certainly PC bonds the polyphenols of the P. guajava extract better than TGC, but TGC afforded better precision. A lack of specificity occurred when rutin was analyzed together with the P guajava extract. Additional analyses performed with the flavonoid fraction of P. guajava extract by HPLC-PDA had confirmed that casein was able to bind catechin, gallic acid and P. guajava flavonoids in a non-specific way.Keywords: tannins; casein; hide powder. INTRODUÇÃOAtualmente, os principais métodos para determinação do teor de taninos abrangem a cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) e a espectrofotometria. Os métodos espectrofotométricos mais aceitos envolvem a complexação prévia dos taninos com substratos protéicos (pó-de-pele, caseína, albumina) ou poliméricos (PVPP). Em todas as suas variantes, os métodos por oxi-redução derivam, basicamente, da proposta de quantificação do ácido úrico por Folin e Macallum 1 , mais tarde modificado para polifenóis 2 . Nestes, os polifenóis reagem com reagentes de oxi-redução específicos, formando um complexo de coloração azul, passível de ser quantificado por espectrofotometria no visível. Conseqüentemente, a reação não é específica para taninos. Uma forma de contornar essa falta de especificidade é retirando os taninos do meio mediante adsorção com substratos protéicos. Assim, o teor de taninos é calculado como a diferença entre o teor de polifenóis totais e teor da fração polifenólica não-adsorvida 3-5 . Vários métodos espectrofotométricos atualmente aplicados a drogas vegetais foram desenvolvidos em um marco regulatório diferente do atual, tendo-se desenvolvido a partir do reagente de Folin e Macallum. Diferentes Farmacopéias e Códigos Oficiais determinam condições de análise distintas ao longo dos anos. Isso não necessariamente parece ter implicado a validação específica dos mesmos como métodos gerais ou específicos. Isso inclui o método de determinação do teor de taninos totais, baseado no uso de pó-de-pele e caseína como agentes complexantes. No presente trabalho, foram avaliadas as principais variáveis analíticas, com ênfase na especificidade da caseína frente à presença simultânea de flavonóides no meio reacional. Com esse intuito, rutina e Psidium guajava foram selecionados como substância e extrato modelo.Nos métodos por CLAE o reagente de Folin-Ciocalteu não é utilizado. No entanto, esse tipo de método foi empregado nesse trabalho com fins de caracterização do extrato vegetal de Psidium guajava. A utilização dessa técnica com fins analíticos foi desconsiderada no presente trabalho, partindo-se do pressuposto que a quantificação de polifenóis individuais não reflete a parcela polimérica dos taninos. PARTE EXPERIMENTAL Solvent...

Study of the Specificity of Cross-Povidone (PVPP) as binding agent in the quantification of polyphenolic compounds

“…5,11,14,15,25 In a former work we asked whether casein and hidepowder were able to bind P. guajava tannins in the presence of flavonoids in a specific way. 8 This question can be extended to PVPP because some of the main features of the casein-tannin and hide-powder-tannin binding are also noticeable in PVPP cases. Alike these protein substrates, the influence of hydrogen bonds and hydrophobic interactions are also manifested in the PVPP molecule, namely, in the pyrrolidone moiety and in the vinyl chain, respectively.…”

“…6,7 It was recently demonstrated that methods using hide-powder and casein are non-specific when flavonoids are also present in the reaction milieu. 5,8 The lack of specificity was also related to other methods intended for the tannin assay, including gravimetric and HPLC-UV methods. 9,10 The capacity of insoluble cross-linked povidone (PVPP) to bind polyphenols arises in this context as a seldom explored analytical alternative.…”

Extract of the Bark of Bathysa cuspidataAttenuates the Development of Chemically-Induced Preneoplastic Colorectal Lesions in Rats

“…The concentration of total phenols was determined colorimetrically (absorbance at 760 nm) using the Folin-Ciocalteu method (Verza et al 2007). The proanthocyanidin content was determined according to the method of Price et al (1980).The results were expressed in milligram catechin equivalents per gram of dry matter.…”

Preclinical evaluation of Trichilia catigua extracts on the central nervous system of mice

“…The total phenolic content was determined according to the European Pharmacopoeia spectrophotometric method (European Pharmacopoeia, 2007;Verza et al, 2007). Stock solution was prepared from lyophilized CE (0.15 g) or EAF (0.03 g) of powered sample mixed with 250 ml of water.…”