Protocolo para a embriogênese somática do mamoeiro

Abstract

RESUMO -O presente trabalho teve por objetivo estabelecer um protocolo de embriogênese somática para o mamoeiro (Carica papaya L.) cv. Baixinho de Santa Amália, grupo Solo. Foram utilizados quatro tipos de explantes e duas condições de cultivo, sendo as fases de indução de calos, indução e maturação de embriões somáticos, alongamento e enraizamento das plântulas avaliadas em diferentes meios de cultura. A combinação explante hipocótilo com folhas cotiledonares e meio de cultura ½MS + 10 mg L -1 de 2,4-D, sob condições de escuro, foi a mais favorável para a indução de calos friáveis. Os meios de cultura HMH com 0,2 mg L -1 de ANA e 2,0 mg L -1 de cinetina e ½MS foram adequados para a indução e maturação de embriões somáticos; o meio MS com 1 mg L -1 de GA 3 foi adequado para o alongamento das plântulas; e o meio MS com 1 mg L -1 IBA, para o enraizamento. A eficiência das fases de indução de calos, indução de embriões, maturação de embriões, alongamento, enraizamento e aclimatação das plântulas foi de 100%, 98%, 44%, 42%, 50% e 80%, respectivamente. O protocolo estabelecido possibilita que o processo de embriogênese somática seja realizado em um período de 230 dias, com uma eficiência final de 7%, e pode ser utilizado em trabalhos de transformação genética do mamoeiro.Termos para indexação: explante, calo, embrião somático, desenvolvimento embrionário, plântula, cotilédone. PAPAYA SOMATIC EMBRYOGENIC PROTOCOLABSTRACT -The objective of this work was to establish a protocol for somatic embryogenesis of papaya (Carica papaya L.) cv. Baixinho de Santa Amália, Solo group. Four explants and two culture conditions were used. The phases of callus induction, somatic embryo induction and development, elongation and rooting were evaluated in different culture media. The combination among hypocotyl with cotyledonal leaves, ½MS medium with 10 mg L -1 2.4-D and dark conditions was the best to induce friable calli. HMH medium with 0.2 mg L -1 ANA and 2.0 mg L -1 kinetin and ½MS medium were suitable to induce and to develop somatic embryos. MS medium with 1 mg L -1 GA 3 was the best to elongate the plantlets and MS medium with 1 mg L -1 IBA to root them. The efficiency of callus induction, embryo induction, embryo development, elongation, rooting and acclimatization phases were 100%, 98%, 44%, 42%, 50% and 80%, respectively. The somatic embryogenic protocol enables the process to be done in 230 days with final efficiency of 7%. This protocol can be used in papaya genetic transformation.

Recovering polyploid papaya in vitro regenerants as screened by flow cytometry

“…Also, the use of 2,4-D in the induction of somatic embryogenesis may have a direct or indirect effect in the occurrence of somaclonal variation (Gesteira et al 2002;Rakoczy-Trojanowska 2002;Pontaroli and Camadro 2005), due to its mutagenic potential (Pontaroli and Camadro 2005). Likewise the present work, this growth regulator has been widely used for papaya tissue culture (Fitch and Manshardt 1990;Chen and Chen 1992;Fitch 1993;Castillo et al 1998a, b;Almeida et al 2000Almeida et al , 2001Koehler 2004). In spite of that, so far no cytometric-based works have been reported to assess DNA ploidy level in the recovered papaya plantlets.…”

“…Ten immature zygotic embryos (Fig. 1a) were placed in 60 9 15 mm Petri dishes (J. Prolab 1 , Brazil) with embryogenic induction medium containing halfstrength MS basal salts supplemented with MS vitamins (Murashige and Skoog 1962), 9.05 lM 2,4-D, 0.55 mM myo-inositol, 2.75 mM L-glutamine, 6% (w/v) sucrose and 0.28% (w/v) Phytagel (Sigma 1 , USA), as recommended by Castillo et al (1998a, b), Almeida et al (2000Almeida et al ( , 2001 and Koehler (2004). The pH of this medium was adjusted to 5.7 prior autoclaving.…”