ВЕТЕРИНАРНА МЕДИЦИНА № 1-2 • 2017 • ВІСНИК Полтавської державної аграрної академії 113 УДК 576.31: 611.018.26:612.419 © 2017 Ковпак В. В., кандидат ветеринарних наук, докторант (науковий консультант -доктор ветеринарних наук А. Й. Мазуркевич) Ковпак О. С., аспірант (науковий керівник -доктор ветеринарних наук А. Й. Мазуркевич) Національний університет біоресурсів і природокористування України ПОРІВНЯЛЬНА ХАРАКТЕРИСТИКА ФЕНОТИПОВИХ ЗМІН КУЛЬТУР КЛІТИН ЖИРОВОЇ ТКАНИНИ ТА КІСТКОВОГО МОЗКУ В ПРОЦЕСІ КУЛЬТИВУВАННЯ Рецензент -доктор ветеринарних наук С. П. Долецький У статті описані дані щодо зміни фенотипу культур клітин жирової тканини (ККЖТ) та кісткового мозку (КККМ) у процесі культивування. Дослідження первинних культур клітин кісткового мозку та жирової тканини щура показали, що вони морфологічно гетерогенні, у їх склад входили: невелика кількість клітин полігональної форми, а основну масу складали фібробластоподібні. За подальшого культивування відмічали процес переходу від гетерогенних культур на нульовому пасажі до найбільш гомогенних у кінці дослідження. Нами були відмічені відмінності у імунофенотипі культур клітин кісткового мозку та жирової тканини, які не зникали з пасажами.Ключові слова: культура клітин, кістковий мозок, жирова тканина, імунофенотипування, морфологія, СD-маркери.
У статті наведено результати порівняння різних методів дезагрегації підшлункової залози щура задля отримання первинної культури. Нами порівняно 4 методи дезагрегації: обробка первинної тканини колагеназою, тепла та холодна трипсинізації, а також модифікований метод експланту. Для аналізу результатів здійснювали підрахунок кількості клітин після утворення моношару в одній із чашок. Аналізуючи результати дослідження, можна стверджувати, що оптимальним методом отримання культури стовбурових клітин підшлункової залози щура є модифікований метод експланту, оскільки кількість клітин на 14-ту добу культивування становила 627,3±9,7 тис., що достовірно більше порівняно з іншими досліджуваними методами. In the treatment of diabetes mellitus is particularly relevant to study the culture of cells derived from pancreatic tissue. However, the question of selected cells which could to adhesive and david, from this gland, is not studies enough. This, in turn, necessitates the development and comparison of various methods for the selection of stem cells from the pancreas in order to identify the optimal. That is why the purpose of our study was to compare different methods of disaggregation of the pancreas of the rat to obtain primary culture. To determine the optimal method for obtaining the culture of stem cells of the pancreas of the rat, we compared four methods treatment of tissue: collagenase treatment, warm trypsinization method, cold trypsinization method, modified explant method. The analysis of the results, was counting the number of cells, which carried out after formation a monolayer in one of the cups. On the third day of cultivation in Petri dishes revealed the appearance of single adhesive cells at use of the first three methods of disaggregation. For using the fourth method of disaggregation pancreatic tissue, was noted the appearance of adherent cells on the fourth–fifth day after sowing. However, it should be noted that the proliferation of cells was the highest in the use of the explant method. The least effective of the investigated methods was the treatment of pancreatic tissue 2 mg/cm3 collagenase. The number of cells in the 14th day of cultivation was 2.9 times lower compared to control (without the use of enzymes) and amounted to 216.3±12.4 thousand. With the use of the warm trypsinization method, the number of cells per 14th days of cultivation was 1.6 times smaller than that of the control and amounted to 385.0±16.2 thousand. The best effect of using the enzymatic processing of the pancreas was obtained using the cold trypsinization method. The number of cells per 14th days of cultivation when using this method was 475.0±27.9 thousand and was in 1.3 times lower compared to control. Analyzing the results of the study, it can be argued that the optimal method for obtaining the culture of stem cells of the pancreas of the rat is the modified method of explant. The number of cells per 14th days of cultivation was 627.3±9.7 thousand. This is significantly more compared with other investigated methods.
У статті описано вплив різних видів культур клітин (підшлункової залози, кісткового мозку та жирової тканини) на перебіг експериментального цукрового діабету у щурів. Досліджено, що оптимальним методом введення клітинного матеріалу, є трансплантація його під капсулу підшлункової залози. Під час дослідження стану острівкового апарату за введення різних видів культур клітин на фоні цукрового діабету виявили, що всі вони володіють позитивним терапевтичним ефектом під час лікування вказаної патології. Отримані дані підтверджуються збільшенням загального об’єму острівкової тканини у тварин-реципієнтів (у порівнянні з контрольною групою), що у свою чергу призводить до зниження рівня глюкози у сироватці крові. The article describes the influence of various cell cultures (pancreas, bone marrow, adipose tissue) on the clinical course of experimental pancreatic diabetes of rats. It is found out that the optimal method of cell material injection is its transplantation under the pancreatic capsule. The study of islet cell condition under injecting various cell cultures in the setting of pancreatic diabetes showed that all of them produce a positive therapeutic effect in the treatment of the this pathology. The obtained data is testified by the growth of a general volume of islet tissue of recipient animals (compared to a control set); this in its turn results in the decrease of blood serum glucose level.
Досліджено вплив гормону росту (rhGH) у різних концентраціях та Biolaminin 521 LN на проліферативну активність та генетичну стабільність стовбурових клітин, отриманих з кісткового мозку, жирової тканини та міокарду кота. Встановлено, що гормон росту у низьких концентраціях (10 нг/мл) позитивно впливає на проліферативну активність стовбурових клітин, отриманих із жирової тканини та міокарду кота. Разом із тим, на культуру стовбурових клітин кісткового мозку ефект низьких концентрацій rhGH був протилежний. Культивування стовбурових клітин за додавання Biolaminin 521 LN призвело до достовірного збільшення індексу проліферації у всіх досліджуваних культурах. За даними цитогенетичного аналізу встановлено, що додавання гормону росту у культуральне середовище не призводить до достовірного збільшення кількості генетичних помилок. Водночас, додавання Biolaminin 521 LN призводить до зменшення кількості клітин із зміненим каріотипом (у порівнянні з контролем) у всіх досліджуваних культурах. The usage of cell technology in clinical practice requires a large amount of cell material. It in turn provokes the development of methods that will allow to obtain a greater amount of cell material for a much shorter period of time. According to literary sources it is known that the growth hormone and the Biolaminin LN 521 can have a positive influence on the mitotic activity of stem cells. Considering the differences in the cell composition of the cell cultures obtained from different tissues, the effects of recombinant human growth hormone (rhGH) and Biolaminin 521 LN will be different. Therefore, our aim was to study the effects of recombinant human growth hormone (rhGH) in various concentrations and to study the Biolaminin LN 521 for the proliferative activity of stem cells obtained from bone marrow, adipose tissue and cardiac muscle of cat. The effects of recombinant human growth hormone (rhGH) in various concentrations and the effects of Biolaminin LN 521 for proliferative activity and genetic stability of stem cells obtained from bone marrow, adipose tissue and cardiac muscle of cat were studied. It was found that the growth hormone has a positive effect on the proliferative activity of stem cells in cell cultures of adipose tissue and cardiac muscle of cat at low concentrations (10 ng/ml), while the effect on the cell culture of bone marrow stem cells was the opposite. According to the cytogenetic analysis it was found that adding recombinant human growth hormone to the culture media does not lead to a significant increase in the number of genetic errors, while adding the Biolaminin 521 LN leads to a decrease in the number of cells with altered karyotype (in comparison with control) in all the studied cell cultures.
scite is a Brooklyn-based organization that helps researchers better discover and understand research articles through Smart Citations–citations that display the context of the citation and describe whether the article provides supporting or contrasting evidence. scite is used by students and researchers from around the world and is funded in part by the National Science Foundation and the National Institute on Drug Abuse of the National Institutes of Health.
hi@scite.ai
10624 S. Eastern Ave., Ste. A-614
Henderson, NV 89052, USA
Copyright © 2024 scite LLC. All rights reserved.
Made with 💙 for researchers
Part of the Research Solutions Family.