Leptospirosis is a globally distributed zoonosis. Epidemiological data are scarce and present major challenge because of the varied clinical presentations. Multilocus Sequence Typing has already proven to be a robust molecular typing method providing accurate results for strain characterization. We have adapted our MLST scheme by reducing the set of loci to facilitate Leptospira typing directly from human clinical samples. The application of this 3-locus scheme provides Leptospira species and allelic profiles of the samples retaining the power of discrimination of the whole scheme. Moreover, an approach to the serogroups was also achieved. Our results contribute to the epidemiological study of Leptospirosis, since the direct typing on clinical specimens could detect and update allelic variants and serogroups present in a region. The simplified scheme allowed at the same time to take advantage of limited genetic material available in clinical samples that may increase the sources of information for epidemiological monitoring.
Background Leptospirosis is a zoonotic disease that can be transmitted by contact with the urine of infected mammals. Rodents play a mayor role in the transmission of leptospires to humans. The province of Santa Fe reports the greatest number of cases in Argentina. Yet, in this region, there are still knowledge gaps regarding the diversity of rodent species that may be hosts of pathogenic leptospires. The aims of this study were to evaluate the presence of leptospiral antibodies in rodents from three riverside communities of Santa Fe, and to identify factors associated with leptospiral infection. Methodology/Principal findings Each community was divided into three environmental settings based on the level of human disturbance, and sampled during two springs (Sep-Oct 2014 and 2015) and one autumn (Mar-Apr 2015). Serum samples of captured sigmodontine and murine rodents were tested for leptospiral antibodies by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), and microagglutination test (MAT) was used to assess the infecting serovar in seropositive individuals. Factors influencing seropositivity were analyzed using logistic regression models. We caught 119 rodents, of which 101 serums were suitable for analysis. Most frequently trapped species were Scapteromys aquaticus, Akodon azarae and Oligoryzomys spp., with seroprevalences of 41.3%, 42.9% and 55% respectively. Seropositivity was higher in individuals with an average body condition score and in those that were sexually mature, but in the latter the differences were marginally significant.
RESUMEN
La leptospirosis es una enfermedad zoonótica de distribución mundial que puede transmitirse por contacto directo o indirecto con orina o tejidos de animales infectados. En Argentina, la leptospirosis es endémica en la provincia de Santa Fe y presenta brotes epidémicos durante las inundaciones. Sin embargo, se sabe muy poco sobre el papel que cumplen los roedores silvestres en la diseminación de la enfermedad en el país. El objetivo de este estudio fue identificar las especies hospederas de leptospiras patógenas entre los roedores presentes en un asentamiento ribereño de la provincia de Santa Fe.
Se realizó un muestreo de roedores durante octubre de 2015. Los riñones de los animales capturados se analizaron por real-time PCR para el gen LipL32 de leptospiras patógenas. En los animales que resultaron positivos, se realizó test de microaglutinación (MAT) y tipificación molecular por amplificación del gen 16S rRNA y dos esquemas de MLST.
Se capturaron 37 roedores de las especies Akodon azarae, Cavia aperea, Oligoryzomys flavescens, Rattus rattus y Scapteromys aquaticus. En el análisis por real-time PCR resultó positivo un macho de Scapteromys aquaticus. El suero de este individuo y del resto de los S. aquaticus capturados (n = 18) se analizaron por test de microaglutinación (MAT), y fueron no reactivos para los 10 serovares probados. La amplificación del gen 16S rRNA identificó la especie infectante como Leptospira interrogans, mientras que no se obtuvo amplificación para los dos esquemas de MLST.
El hallazgo de este estudio aporta nueva información acerca de presencia de leptospiras patógenas en roedores silvestres, que es relevante para la zona por tratarse de una especie ampliamente distribuida en ambientes pantanosos e inundables de América del Sur.
Objetivo. Evaluar si el uso del panel de 19 cepas de leptospiras, sugerido por la Sociedad Internacional de Leptospirosis para la microaglutinación (MAT, por sus siglas en inglés), permite mayor confirmación de casos que el de 12 cepas. Material y métodos. Estudio observacional de corte transversal. Se estudiaron 441 muestras de sueros de pacientes de Argentina, derivadas para el diagnóstico de leptospirosis en los periodos de julio de 2009 a diciembre de 2010 y enero a octubre de 2013. Resultados. Se obtuvo el mismo resultado con el panel reducido que con el ampliado. En seis casos resultó presumiblemente infectante algún serovar del panel ampliado, aunque siempre coaglutinando con cepas del reducido. Conclusión. En Argentina, el diagnóstico de leptospirosis por MAT podría continuar realizándose con el panel reducido, lo que reduciría el costo y tiempo de diagnóstico. La información adicional que aportaría el panel ampliado está relacionada con la epidemiología, mediante un mejor conocimiento del serogrupo presumiblemente infectante.
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