Rabies laboratory diagnosis is performed by using microscopic examination for Negri bodies (MEN), fluorescent-antibody test (FAT) and mouse inoculation test (MIT). In the majority of cases, when specimens are properly collected and conserved and the laboratory worker has good experience, agreement among employed techniques is verified. Comparing the sensitivity of these three diagnosis techniques in 3,713 samples (hippocampus and brain stem) received during 1981-1994 period, being 3,010 from bovine (983 positives) and 703 from equine (111 positives) species, it was observed that in equine rabid samples, this agreement was not maintained. For the latter specie, only in few opportunities the Negri bodies could be observed. With respect to FAT, the test detected a lower porcentage of positive equine samples compared to bovine species. Statistical analysis demonstrated that the difference was significative. Mouse inoculation test proved to be more sensitive. However, a significant difference in mice incubation period was observed for samples from both species. The absence of inclusion bodies and the longer incubation period for equine samples suggest that rabies pathogenesis studies for equine species have to be intensified.
O objetivo do estudo foi realizar a caracterização sorológica e molecular em amostras de rotavírus suíno na região Sul do Brasil. Para sua realização, foram colhidas 167 amostras de fezes de suínos nas fases de maternidade e creche em 52 granjas de produção de suínos que apresentavam freqüentes casos de diarréia, em 14 municípios dos Estados do Rio Grande do Sul, Santa Catarina e Paraná, durante o período compreendido entre junho de 1995 e outubro de 1997. Todas as amostras foram submetidas a um ensaio imunoenzimático (ELISA) para a detecção de rotavírus do grupo A, das quais 59 (35,33%) foram positivas. Por meio da eletroforese em gel de poliacrilamida (PAGE) foi possível revelar a existência de um único eletroferótipo de rotavírus suíno nas regiões estudadas. As amostras positivas foram testadas para a caracterização de subgrupo por meio de um ELISA com anticorpos monoclonais (mAb-ELISA), onde 9 amostras foram específicas para o subgrupo ll e 50 não reagiram para nenhum dos subgrupos, sendo classificadas como nãoI-nãoII. Para a caracterização de genótipos G e P utilizou-se a técnica de transcrição reversa, seguida da reação em cadeia da polimerase (RT-PCR) com primers específicos para rotavírus de suínos, bovinos e humanos. As amostras foram caracterizadas como genótipos G3, G4, G5, G9, G10 e P[6], P[7] e misturas de P[6] + P[7] no mesmo animal. Este estudo evidenciou a existência de diferentes genótipos de rotavírus suínos, circulando ao mesmo tempo em uma mesma região e ou em uma mesma granja, incluindo o genótipo G9 que até o último ano tinha sido encontrado somente em amostras humanas.
O Brasil possui, atualmente, um dos maiores rebanhos de suínos do mundo, estando entre os sete detentores da produção mundial, com um plantel estimado em 36,5 milhões de cabeças. A região Sul, incluindo os Estados do Rio Grande do Sul, Santa Catarina e Paraná, onde estão localizados os maiores núcleos de criação de suínos, é responsável por mais de 70% das exportações brasileiras de carne suína. Em todos os países onde a suinocultura é explorada de forma intensiva, os rotavírus representam uma das maiores causas de diarréias infecciosas endêmicas, em várias espécies animais, com alta incidência em suínos e bovinos recém nascidos e desmamados. As diarréias neonatais pré e pós-desmama causam elevadas perdas econômicas, em função da mortalidade de suínos e do decréscimo da taxa de peso vivo e da conversão alimentar. Os rotavírus pertencem à família Reoviridae e ao gênero Rotavirus e possuem tripla camada protéica que envolve o material genético, constituído por 11 segmentos distintos de RNA fita dupla (dsRNA), sendo que cada segmento do dsRNA codifica pelo menos uma proteína viral. A caracterização sorológica dos rotavírus está baseada nas seguintes proteínas: a VP6, proteína do capsídeo interno responsável pela caracterização de grupo e subgrupo; a VP7 e a VP4, localizadas no capsídeo externo e responsáveis pela caracterização de sorotipos e genotipos G e P, respectivamente. Foram colhidas 117 amostras de fezes de leitões nas fases de maternidade e creche em 21 granjas de produção de suínos, das regiões de Toledo, Dois Vizinhos, Marechal Cândido Rondon e Castro, todas do Estado do Paraná, que apresentavam quadros freqüentes de gastroenterite aguda. Todas as amostras foram submetidas a um ensaio imunoenzimático (EIARA-FIOCRUZ) para a identificação de rotavírus do grupo A, das quais, 40 (34,19%) foram positivas. As amostras positivas foram testadas para a caracterização de subgrupo através de um ensaio imunoenzimático com anticorpos monoclonais (Mab-ELISA). Nove amostras foram caracterizadas como grupo A e subgrupo II e 31 fizeram parte do grupo A e subgrupo nãoI-nãoII. Para a caracterização de genotipos G e P utilizou-se a técnica de transcrição reversa, seguida da Reação em Cadeia de Polimerase (RT-PCR) com primers específicos para rotavírus suínos, bovinos e humanos. Das 40 amostras positivas para rotavírus, 18 puderam ser caracterizadas como genotipo G e 30 como genotipo P. Foram encontrados os genotipos G3, G4, G5, G9 e G10 e uma amostra com os genotipos G4 e G9 ocorrendo simultaneamente. Quanto ao genotipo P foram observadas amostras P[6], P[7] e misturas de P[6] e P[7] ocorrendo num mesmo animal. Este estudo mostrou uma diversidade de genotipos ocorrendo ao mesmo tempo em uma região e em uma mesma granja, inclusive o genotipo G9, que até o momento não havia sido descrito em amostras de suínos, somente em humanos.
The G (VP7) and P (VP4) serotype distribution of Brazilian porcine rotaviruses was determined using reverse transcription-PCR genotyping methods. Common porcine G types G3, G4, and G5 were detected in combination with P types [6] and [7]. The detection of nonporcine G types and unusual G-P combinations and the characterization of an atypical virus indicated that interspecies transmission may contribute to the genetic diversity of porcine rotaviruses.
The G (VP7) and P (VP4) serotype distribution of Brazilian porcine rotaviruses was determined using reverse transcription-PCR genotyping methods. Common porcine G types G3, G4, and G5 were detected in combination with P types [6] and [7]. The detection of nonporcine G types and unusual G-P combinations and the characterization of an atypical virus indicated that interspecies transmission may contribute to the genetic diversity of porcine rotaviruses.
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