Dez lotes de vacina contra a Raiva, tipo Fuenzalida & Palacios, líquida, uso humano, produzidos no Instituto Butantan, foram estocados às temperaturas de 45, 37, 28 e 2-8ºC. Amostras de cada lote, colhidas a intervalos de tempo que variavam com a temperatura de estocagem, tiveram sua potência (valor antigênico) determinada pelo método do N.I.H. Foram consideradas satisfatórias vacinas portadoras de um valor antigênico (VA) >0,3. Foi verificado que apenas um dos lotes apresentou VA inferior ao mínimo requerido, após 2 h de exposição a 45ºC. Todos os lotes mantiveram VA satisfatório até 3 dias de armazenamento de 37ºC, enquanto que, a 28 e 2-8ºC, o mesmo ocorreu com 10 e 360 dias, respectivamente. À temperatura ideal de armazenamento (2-8ºC), 100% dos lotes retiveram a potência mínima por período de tempo mais longo (16 meses) do que o prazo de validade (12 meses), o que permite sugerir que a validade da vacina contra a Raiva, que nos países da América Latina e Caribe é de 6 a 12 meses, poderia ser ampliada para 16 meses, de modo a evitar o descarte de produto em condições de uso.
To determine the rabies antibody level of twenty-four hyperimmune equine sera, Standard Mouse Neutralization (SMN) and Couterimmunoelectrophoresis (CIE) tests were carried out, both at the Instituto Butantan (IB) and Instituto Panamericano de Proteccíon de Alimentos y Zoonosis (INPPAZ). Statistical analysis has shown a correlation (r) of 0.9317 between the SMN and CIE performed at the IB, while at the INPPAZ it scored 0.974. Comparison of CIE data of both laboratories yielded a correlation of 0.845. The CIE technique has shown to be a sensitive and efficient as the SMN in titrating antirabies hyperimmune equine sera. Based on CIE results, a simple, rapid and inexpensive technique, titers of sera antibody can be rellably estimated in SMN test.
RESUMO A profilaxia antirrábica em bovinos no Brasil é baseada no uso de preparações vacinais de vírus inativado. O Programa Brasileiro de Controle da Raiva Bovina indica o uso de uma dose destas vacinas (1 mL) seguida de um reforço. O objetivo deste trabalho foi avaliar e comparar os níveis de anticorpos induzidos por 5 esquemas alternativos de vacinação antirrábica em bovinos. Para isto, foram instituídos cinco grupos experimentais, denominados A, B, C, D e E, contendo 9 animais cada grupo. Os bovinos receberam, inicialmente, uma dose da vacina (dia 0). As doses de reforço foram aplicadas de acordo com o seguinte protocolo: grupo B (uma dose no dia 30); grupo C (uma dose no dia 180); os grupos D e E receberam duas doses de reforço, nos dias 30 e 60 e 30 e 180, respectivamente; o grupo A não recebeu dose de reforço. Amostras de sangue para obtenção de soro foram colhidas de todos os animais nos dias 0 (controle), 30, 60, 90, 180, 210 e 360 após o início da vacinação. Para aferir os níveis de anticorpos antirrábicos foi utilizado o Teste Rápido de Inibição de Focos Fluorescentes (RFFIT) e foram consideradas positivas as amostras com títulos ? 0,5 UI/mL (Unidades Internacionais/mL). O esquema de vacinação adotado no grupo E foi o mais eficiente, determinando níveis mais elevados de anticorpos e persistência dos mesmos por tempo mais prolongado e os resultados obtidos ilustram a necessidade de duas doses de reforço para melhor proteção de bovinos. Em função dos resultados observados, os autores sugerem que a vacinação contra a raiva nestes animais seja realizada com 3 doses, sendo os reforços administrados nos dias 30 e 180 após a primeira dose.
Four rabies antigen batches were produced from virus suspensions resulting from BHK21 cells adhered to microcarriers (Cytodex 1), inoculated and cultured in a bioreactor. In parallel the methodology of production of rabies virus through cultures of BHK21 cells in monolayers in bottles was used. The results obtained showed that infecting titles were 106.69 DL50/mL and 107.28 DL50/mL for suspensions cultured in bottles and in the bioreactor, respectively. The viral suspension volumes collected were on average 11,900 per batch from the bioreactor and 800mL per bottle. Ten horses were immunized with the antigen produced in the bioreactor. The means of antirabies antibody titers found were 240 and 212 IU/mL after the initial and the first booster doses, respectively. Rabies antigen with satisfactory infecting titers can be obtained on a large scale by culturing in a bioreactor inoculated BHK21 cells adhered to microcarriers. Foram produzidos quatro lotes de antígeno rábico a partir de suspensões de vírus resultantes de células BHK21 infectadas, aderidas a microcarregadores do tipo Cytodex 1 e cultivadas em biorreator. Em paralelo foi utilizada a metodologia de produção de vírus rábico com células BHK21 em monocamadas, contidas em garrafas de 350cm2. Os resultados encontrados demonstraram que os títulos infectantes foram de 106.69 DL50/mL para as suspensões virais obtidas em garrafas e 107.28 DL50/mL para as do biorreator. Os volumes das suspensões virais colhidas foram, em média de 11.900mL por lote do biorreator e 800mL por garrafa . Com o antígeno produzido no biorreator foram imunizados 10 cavalos. As médias dos títulos de anticorpos anti-rábicos encontrados no soros destes animais foram de 240 e 212 UI/mL, respectivamente após a base e o primeiro reforço. Através da infecção de células BHK21 aderidas a microcarregadores e cultivadas em biorreator, pode-se obter antígeno rábico em larga escala e com títulos infectantes satisfatórios
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