The Brazilian Spotted Fever (BSF) is a zoonotic disease caused by Rickettsia rickettsii and transmitted by ticks of the genus Amblyomma, more frequently, Amblyomma cajennense. The aim of this paper was to report the first molecular detection of R. rickettsii on R. sanguineus naturally infected in Rio de Janeiro, Brazil. Ticks were collected from dogs in a rural region of Resende municipality, Rio de Janeiro State, Brazil (22º30'9.46"S, 44º42'44.29"WO), where occurred five human cases of BSF in 2006. The ticks were identified under a stereoscopic microscope and separated in pools by stages, species and sex. DNA extraction was carried out using QIAamp DNA Mini Kit (QIAGEN®). The DNA was submitted to PCR amplification using 04 set of primers: Rr190.70p/Rr190.602n (OmpA, 532bp), BG1-21/BG2-20 (OmpB, 650bp), Tz15/Tz16 (17 kDa protein-encoding gene, 246bp) and RpCS.877p/RpCS.1258n (gltA, 381bp). PCR products were separated by electrophoresis on 1% agarose gels and visualized under ultraviolet light with ethidium bromide. PCR products of the expected sizes were purified by QIAquick® and sequenced by ABI PRISM®. The generated nucleotide sequences were edited with using Bioedit® software and compared with the corresponding homologous sequences available through GenBank, using Discontiguous Mega Blast (http://www.ncbi.nlm.nih.gov). It was confirmed R. rickettsii by sequencing of the material (GenBank FJ356230). The molecular characterization of R. rickettsii in the tick R. sanguineus emphasizes the role of dogs as carriers of ticks from the environment to home. Moreover, this result suggests that there is a considerable chance for active participation of R. sanguineus as one of tick species in the transmission of R. ricketsii to human being in the Brazilian territory.

There is increasing interaction between man and pathogens transmitted by arthropods, especially by ticks. It is on this background that a holistic approach stands out, for the sake of Public Health. Brazilian Spotted Fever is an endemic disease at the country's southeast, with Amblyomma sculptum as its major contributor, followed by A. aureolatum and potentially Rhipicephalus sanguineus. Dogs have been considered sentinels, and in some areas the disease in dogs can precede human disease. Considering the importance of this disease for human health, the serological evidence in dogs, and the transmission of ticks between dogs and their owners, this review aimed to elucidate the importance of the epidemiological investigation, the diagnosis in dogs, and the role of veterinarians in Public Health to control vector-borne zoonotic diseases. We encourage veterinarians to include this rickettsial infection in the diagnosis of febrile diseases of common occurrence in dogs.

RESUMO: Doenças causadas por rickettsias tem ampla distribuição geográfica e estão associadas a artrópodes hematófagos. Rickettsia rickettsii é espécie mais patogênica do Grupo da Febre Maculosa (GFM) e responsável pela Febre Maculosa Brasileira. No sudeste do país a doença é endêmica e inquéritos sorológicos tem demonstrado presença de anticorpos para antígenos do GFM em cães, reforçando a participação do cão como sentinela. Os principais vetores são carrapatos do gênero Amblyomma, cujos hospedeiros são, muitas vezes, animais de vida silvestre. Assim, objetivou-se avaliar a circulação de rickettsias do GFM no entorno de Unidades de Conservação (UC) no Rio de Janeiro por meio da Imunofluorescência Indireta em cães, além de determinar os fatores associados. Amostras de soro de 155 cães foram testadas, sendo 16,1% dos animais sororreagentes pelo menos a um dos antígenos testados. Houve associação entre a sororreatividade dos cães e o acesso à mata; falta de assistência médico-veterinária; falta de medidas contra carrapatos; e renda familiar do responsável de até dois salários mínimos. Cães com este perfil apresentaram maior chance de serem expostos aos agentes do GFM. De acordo com o modelo de regressão logística, não frequentar áreas de mata foi considerado um fator de proteção para o cão, juntamente com possuir acompanhamento médico-veterinário e receber medidas contra carrapatos. Concluiu-se que patógenos do GFM circulam no entorno das UC estudadas, sendo possível que R. rickettsii e R. parkeri infectem cães, uma vez que os animais demonstraram exposição aos dois agentes. Ressalta-se a participação do veterinário e a adoção de medidas de combate a carrapatos como ferramentas na prevenção da infecção rickettsial.

The aim of this study was to investigate the presence of anti-Rickettsia spp. antibodies in dogs, the tick fauna, and the ticks that are carriers of rickettsiae of the spotted fever group (SFG). About 68 (24%) of the 283 serum samples tested by indirect immunofluorescence (IFA) reacted against the R. rickettsii crude antigen. The titers varied between 1:64 and 1:512. At the time of collection, 189 (64.5%) of the 293 dogs included in this study, were infested with ticks. Ticks classified as Rhipicephalus sanguineus and Amblyomma sculptum were identified. None of the ticks examined for SFG rickettsiae using polymerase chain reaction (PCR) were positive. The presence of the anti-R. rickettsii antibodies detected by IFA, albeit at low titers, suggests the circulation of SFG rickettsiae, which requires permanent surveillance because there are records on human fatalities related to spotted fever and to avoid any future threats to the students moving extensively in the areas near of the Rural Federal University of Rio de Janeiro. Key words: Spotted fever, Rickettsia, zoonosis, dogs ResumoEste estudo teve como objetivos investigar a presença de anticorpos anti-Rickettsia spp., a fauna de carrapatos e a ocorrência de riquétsias do grupo da febre maculosa em carrapatos coletados em caninos do município de Seropédica, estado do Rio de Janeiro. Dos 283 soros testados pela imunofluorescência indireta (IFI), 68 (24%) apresentaram reatividade contra antígeno bruto de R. rickettsii. A titulação variou entre 1:64 à 1:512. Dos 293 cães avaliados, 189 (64,5%) estavam infestados por carrapatos no momento da coleta. Foram identificados carrapatos das espécies Rhipicephalus sanguineus e Amblyomma sculptum. Nenhum carrapato examinado por meio da reação em cadeia de polimerase (PCR) apresentou-se positivo. A presença de anticorpos contra R. rickettsii pela IFI, mesmo que em baixos títulos, sugere a circulação de rickettsias do grupo da Febre Maculosa, devendo-se ter uma vigilância permanente devido ao grande trânsito de alunos nas áreas próximas ao campus da UFRRJ e ao registro da ocorrência de óbitos em humano por Febre Maculosa.

Borreliose aviária é uma doença septicêmica aguda, cosmopolita, que acomete diferentes espécies aviárias, sendo causada por Borrelia anserina Sakharoff, 1891. O objetivo do presente trabalho foi avaliar as alterações hematológicas em Gallus gallus domesticus experimentalmente infectados por B. anserina via vetor Argas (Persicargas) miniatus. Um total de 27 aves da espécie G. g. domesticus com 67 dias de vida, foram divididas em três grupos inteiramente casualizados contendo nove animais cada. Um grupo foi exposto a carrapatos infectados por B. anserina (Grupo 1); outro a carrapatos livres deste agente (Grupo 2); além de um grupo não exposto aos carrapatos (Grupo 3). Realizaram-se esfregaços sangüíneos diariamente, a partir do primeiro dia de exposição ao vetor, até o 25º dia pós-exposição (DPE). Amostras de sangue foram coletadas 3 dias antes da exposição aos carrapatos, e 3, 8 e 18 dias pós-exposição (DPE), para a realização dos hemogramas. O exame dos esfregaços das aves do Grupo 1 revelou grande número de espiroquetas. Os esfregaços sangüíneos dos Grupos 2 e 3 mantiveram-se negativos durante todo o período experimental. De acordo com os resultados das avaliações hematológicas, as aves do Grupo 1 apresentaram um quadro de anemia normocítica normocrômica em oito DPE, além de leucocitose com heterofilia e monocitose que cursaram paralelamente ao período de espiroquetemia. Concluiu-se que a infecção por B. anserina determinou nas aves do Grupo 1 alterações hematológicas compatíveis com uma infecção bacteriana de moderada gravidade, evoluindo para auto-cura, nas condições experimentais estabelecidas neste trabalho.

No abstract

The present paper is the first to perform this evaluation in dogs from the cities of Natividade, Porciuncula and Varre-Sai. The aim of this study is to search for Spotted Fever Group Rickettsia in canine sera using indirect immunofluorescence assay and to identify the probable causative agent of sera reactions in animals. Of the 253 sampled canines, 67.59% (171/253) were seroreactive for Rickettsia rickettsii and 11.07% (28/253) for Rickettsia parkeri, both in dilution 1:64. Titration of tested sera against R. rickettsii antigens reached 1:131.072 and, for R. parkeri, 1:4.096. We conclude that dogs are important sentinels for R. rickettsii infection, and can be infected regardless of sex, age, the habit of visiting woodlands or being in direct contact with equines and capybaras. Serological diagnosis has highlighted many dogs infected by R. rickettsii, and ambient conditions, such as the presence of flowing water bodies, was important for the occurrence of Brazilian Spotted Fever in the northwestern of Rio de Janeiro State.

Spotted fever group rickettsioses are emerging diseases. In some of these diseases, domestic dogs act as sentinels. Canine serological studies have demonstrated that rickettsial dispersion is concentrated in rural areas, seroprevalence being higher where human rickettsioses are endemic. In Rio de Janeiro, the Atlantic forest vegetation has been devastated by urbanization. In this context, we aimed to detect Rickettsia spp. in urban areas of the West Zone of Rio de Janeiro. Sera from 130 dogs were tested by Indirect Immunofluorescence Assay, and ticks collected from these dogs were tested by polymerase chain reaction. We found the rate of serological reactions against R. rickettsii and R. parkeri in our study area to exceed those of rural and non-endemic areas, highlighting the importance of dogs as urban sentinels. The possibility of contact with opossums and capybaras increased the chances of exposure to Rickettsia spp., reinforcing the hypothetical link between the landscape and the rickettsial wild cycle. Rhipicephalus sanguineus sensu lato was the tick most frequently observed. PCR-positive samples showed similarity with R. rickettsii and R. felis, an emerging pathogen rarely reported from ticks. We observed that rickettsiae circulate in urban places and ticks from indoor environments, which may be involved in bacterial epidemiology.