Вступ. Трансформація ентеробактерій плазмідною ДНК є звичайною процедурою у молекулярному клонуванні. Проте відносно низька трансформованість природних штамів Klebsiella [1, 2] та інших енте-робактерій є причиною того, що у ці організми, як правило, уводять готові генноінженерні конструкції. За такої організації експериментів фактор часу відіграє велику роль і, як наслідок, проблема розробки швидких, але достатньо ефективних методів введення плазмідної ДНК у ентеробактерії є актуальною. Стандартні процедури, які використо-вують для виготовлення компетентних клітин Klebsiella та інших ен-теробактерій (звичайно для цієї мети користуються методом, розроб-леним Cohen [3], та його модифікаціями), займають багато часу. При цьому засоби тривалого збереження компетентних клітин бактерій, відмінних від Escherichia coli, розроблені погано. Більш того, звичай-но нема необхідності (або можливості) зберігати препарати компе-тентних клітин усіх штамів, з якими працюють у лабораторії. Нещо-давно Merrick et al.[4] опублікували модифікований метод заморо-жування-відтавання для трансформації Е. coli і Klebsiella.Незва-жаючи на досить високу ефективність цього метода (до 7-Ю 4 транс-формантів на 1 мкг ДНК для К. aerogenes), він обіймає досить трива-лі етапи «розгонки» нічної культури (2 год) та інкубації клітин після відтавання (2-4 год.). Ми пропонуємо дві модифікації цього методу: стандартну та спрощену. Остання виключає використання обох цих стадій і дозволяє на протязі 5 хв зробити трансформацію Е. coli та K-oxytoca з ефективністю біля 1-Ю 4 трансформантів на 1 мкг ДНК-Матеріали і методи У роботі використовували штами Е. coli JM109
scite is a Brooklyn-based organization that helps researchers better discover and understand research articles through Smart Citations–citations that display the context of the citation and describe whether the article provides supporting or contrasting evidence. scite is used by students and researchers from around the world and is funded in part by the National Science Foundation and the National Institute on Drug Abuse of the National Institutes of Health.